白首乌多糖降血脂作用研究

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1、白首乌多糖降血脂作用研究杨小红，周远明，张瑜，曾亚翎，刘谋治，赵冰清，唐宇晖【摘要】目的研究白首乌多糖抗高血脂的药理作用。方法采用水提醇沉法提取，用Sevag试剂(氯仿∶正丁醇=5∶1)除蛋白精制多糖。将80只昆明种小鼠随机分成5组，即正常对照组、高脂对照组(模型组)、白首乌多糖小、中、大剂量组。测定白首乌多糖对血清甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)以及低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)的影响。结果白首乌多糖高剂量组能显著降低高脂血症大鼠的TC、TG和LDL-C(P0.01)，并可显著升高HDL-C(P0.01)。结论白首乌多糖具有降低血清总胆固醇、甘油酯和低

2、密度脂蛋白，提高高密度脂蛋白的能力；白首乌多糖具有降血脂功能，对高脂血症的发生有一定的预防作用。【关键词】白首乌；多糖；高血脂症；降血脂　耳叶牛皮消CynanchumauriculatumRoyleexlinn)植物，又名飞来鹤(《植物名实图考》)，老牛冻(湖南，四川)〔1〕；在我国资源丰富，山东、江苏有人工栽培，药用其块根；具有补肝肾、强筋骨、益精血、健脾消食、解毒疗疮等功效〔1，2〕。白首乌总苷对预防动脉粥样硬化斑块形成有一定的意义〔3，4〕。本实验研究白首乌多糖的降血脂作用。　　1器材　　1.1药材与试剂本实验所用白首乌购自江苏滨海，经湖南省药检所方石林教授鉴定为萝摩科植物耳叶牛皮消C

3、ynanchumauriculatumRoyleexWight，实验用酒精（AR），总胆固醇(TC)试剂盒(南京建成生物工程研究所)，甘油三酯(TG)试剂盒(南京建成生物工程研究所)，低密度脂蛋白(LDL-C)试剂盒(南京建成生物工程研究所)，高密度脂蛋白(HDL-C)试剂盒(南京建成生物工程研究所)。氯仿、丙酮、乙醚、正丁醇均为分析纯。　　1.2动物　　昆明种雄性小鼠80只,体质量(20±2)g，长沙市开福区实验动物科技服务部提供,动物合格证号：湘000468。　　1.3仪器与设备　　电热恒温干燥箱，202－3AB型，天津市泰斯特仪器有限公司产品；　　电热恒温水浴锅，DK－98—1A，天津

4、市泰斯特仪器有限公司产品；　　真空旋转蒸发器，RE52－99，上海亚荣生化仪器厂产品；　　抽滤机，SHB－B95型，郑州长城科工贸有限公司产品。总胆固醇(TC)试剂盒，南京建成生物工程研究所产品；　　甘油三酯(TG)试剂盒，南京建成生物工程研究所产品；　　试剂盒，南京建成生物工程研究所产品；　　高密度脂蛋白(HDL-C)试剂盒，南京建成生物工程研究所产品；　　乙醇95%，分析纯AR，长沙安泰精细化工实业有限公司产品；　　离心沉淀机，LXT－II，上海医用分析仪器厂产品；　　氯仿，GB682－89，上海山浦化工有限公司产品；　　正丁醇，HG3－1012－76，上海山浦化工有限公司产品；　　分析

5、天平，TG328B，湘仪天平仪器厂产品。　　2方法　　2.1白首乌多糖的提取和纯化　　采用水提醇沉法提取白首乌多糖。取白首乌粉末于圆底烧瓶中，加入3倍量85%酒精，回流脱脂。将浸提脱脂后的样品，在90℃恒温水浴中热水浸提2h，过滤后，滤渣在相同条件下重复浸提1次。减压过滤，去除滤渣，合并滤液。将滤液减压浓缩至最小体积。在浓缩后的多糖溶液中加入3倍95％乙醇，经抽滤，真空干燥后得粗多糖。粗多糖加蒸馏水复溶后经过Sevag试剂(氯仿∶正丁醇=5∶1)除蛋白，连续操作多次，直到完全脱除蛋白为止。脱蛋白后的多糖溶液中加入3倍95％乙醇，沉淀用乙醇、丙酮及乙醚反复洗涤，经抽滤、干燥后得到精制多糖。　　

6、2.2动物分组及处理实验分为5组，即：正常对照组、高脂对照组、低剂量白首乌多糖组、中剂量白首乌多糖组、高剂量白首乌多糖组。除基础饲料组(正常对照组)外，其它各组均采用高脂饲料(猪油10％，胆固醇5％，基础饲料75％)喂饲。以每天灌胃量为大鼠体重的2％将白首乌多糖配制成相应浓度的溶液，各剂量组给予白首乌的量是：低剂量组50mg/kg体质量；中剂量组100mg/kg体质量；高剂量组200mg/kg体质量。正常对照组和高脂对照组给予相应体积的蒸馏水，实验期为10d。　　2.3血样采集及预处理　　喂养结束后，大鼠禁食12h，摘眼球取血，离心(3000r/min，15min)分离血清，待测。　　2.4

7、测定指标及方法　　2.4.1血清总胆固醇(TC)采用酶比色法(CHOD-PAP法)测定。　　2.4.2血清甘油三酯(TG)采用酶比色法(GPO-PAP法)测定。　　2.4.3血清低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)采用聚乙烯硫酸沉淀法测定。　　2.4.4血清高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)采用磷酸钨-镁沉淀法测定。采用UV1800紫外分光光度仪测定数据。　　2.5实验数据处理实验数据均在LENOVO-patibl