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《亚硫酸钠经坏死途径诱导人正常肝细胞株HL-7702死亡.doc》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、亚硫酸钠经坏死途径诱导人正常肝细胞株ＨＬ－７７０２死亡白剑英黄勤闫丹丹王幼萍梁瑞峰山西医科大学公共卫生学院环境卫生学教研室，太原，030001【摘要】目的观察P53、Bcl-2、Caspase-3、Mdm2、Rip1在亚硫酸钠诱导人正常肝细胞HL-7702细胞死亡中的表达，并探讨其死亡机制。方法以终浓度分别为10、2.5、0.5、0.1mmol/L的Na2SO3处理HL-7702细胞24h、48h，采用WesternBlot法检测肝细胞内P53、Bcl-2、Caspase-3、Mdm2、Rip1的蛋白表达水平。结果10、2.5、0.5、0.1mmol/L的Na2SO3
2、诱导HL-7702细胞中P53蛋白表达降低，Rip1蛋白有增加，Bcl-2和Mdm2蛋白基本无变化，未见Caspase-3裂解条带，即Caspase-3活化形式。结论亚硫酸钠诱导人正常肝细胞通过坏死途径而不是凋亡途径死亡。【关键词】亚硫酸钠；细胞凋亡；细胞坏死；P53；Bcl-2；Caspase-3；Mdm2；Rip1Na2SO3inducesculturedhumanhepatocytesHL-7702deathbynecroticpathwayBaiJianying,HuangQin,WangYouping,LiangRuifeng(DeptofEnvironme
3、ntalHealth,SchoolofPublicHealth,ShanxiMedicalUniversity,Taiyuan030001,China)【Abstract】ObjectiveTostudytheeffectonexpressionofRip1,Caspase-3,P53,Bcl-2,Mdm2intheculturedhumanhepatocyteHL-7702inducedbyNa2SO3andtoexploreitspossibledeathinducingmechanism.MethodsHL-7702cellswereincubatedwithv
4、ariousconcentrations(10.0,2.5,0.5,0.1mmol/L)ofNa2SO3for24hand48h.TheproteinexpressionlevelsofRip1,Caspase-3,P53,Mdm2,Bcl-2,inHL-7702cellswereanalyzedbyWesternBlot.ResultsTheexpressionsofRip1wereincreasedinaconcentrationdependentmannerafter10.0-0.1mmol/LNa2SO3treatmentfor24hoursand48hour
5、swithnochangesofCaspase-3expression．Andwedidn’tfindthecleavedCaspase-3bandsinanytreatmentgroups.Theexpressionofp53wasdecreasedsignificantlyandtheexpressionofBcl-2,andMdm2werenotchanged.ConclusionCelldeathofculturedHL-7702inducedbyNa2SO3wasbyprogrammednecroticpathwaybutnotapoptoticpathwa
6、y.【Keywords】Na2SO3;cellapoptosis;cellnecrosis;Rip1;Caspase-3;P53亚硫酸盐是硫酸盐发生还原以后的一种脱氧产物，可以作为食品添加剂应用于食品生产工业。在食品工业中通常被用作防腐剂、还原剂、疏松剂以及漂白剂等，主要应用于固体食品以及高吸水膨胀性食品等，比如干果、蜜饯、饼干、糖果等[1],此外在酒类和药品中也有一定的添加。关于亚硫酸盐毒性作用的研究比较少，但已有研究提示其对机体多个脏器具有损伤作用[2]，目前,国内外对亚硫酸盐的神经系统和呼吸系统等的毒性作用机制研究已较为深入,而对其可能引起的肝脏功能性和器质性损
7、伤研究甚少。尽管有临床观察提示亚硫酸盐的肝损伤作用[3]，但其诱导死亡机制尚不清楚。有研究表明，亚硫酸盐可导致小鼠肝脏内蛋白质氧化损伤以及DNA-蛋白质交联，同时，还可能通过死亡受体和线粒体途径诱导小鼠肝细胞凋亡[4]。亚硫酸盐对人肝细胞的损伤作用是否与此相关呢，我们观察了Na2SO3对人正常肝细胞株Rip1、Caspase-3、p53、Bcl-2、和Mdm2等蛋白表达水平的影响，为探讨其可能的死亡诱导机制提供线索。1.材料和方法1.1材料1.1.1细胞株正常人二倍体肝细胞株HL-7702，中国科学院上海生命研究院细胞资源中心。1.1.2主要试剂 小
