万寿菊花萃取物中叶黄素的分离与纯化论文

《万寿菊花萃取物中叶黄素的分离与纯化论文》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、万寿菊花萃取物中叶黄素的分离与纯化论文李高峰聂永亮王佩维【摘要】目的从万寿菊花萃取物的皂化产物中分离、纯化制备高纯度叶黄素。方法万寿菊干花颗粒经超临界CO2萃取得到万寿菊花萃取物，加碱皂化的产物用水稀释后，用二氯甲烷从中萃取叶黄素，在分出的水相中加入氯化钙，分离出被分散在水相的叶黄素，蒸馏溶剂后用醋酸乙酯与石油醚的混合溶剂洗涤，再用无水乙醇洗涤，制得高纯度叶黄素。结果实验确定了加水量为皂化产物的4倍；二氯甲烷用量为水与皂化产物的和；醋酸乙酯与石油醚的体积比为1∶4.freelg，用流动相配成8×10-6g·ml-1的溶液。色谱条件:色谱柱为Di

2、amonsilC18柱;甲醇∶乙腈∶醋酸乙酯∶水（V∶V∶V∶V）=30∶29∶40∶1为流动相;流速0.75ml·min-1;检测波长450nm;柱温25℃;进样量20μl。色谱图见图1。3结果3.1分离过程3.1.1皂化产物稀释过程中的加水量加水稀释皂化产物,可以去除其中水溶性杂质,水的用量过大，会使油水界面上的脂肪酸皂浓度增大，容易形成较厚的中间层，要想得到较好的分离效果，必须加大二氯甲烷的用量；而水的用量过小，则会使体系的黏度过大，不利于分离。经实验确定：水的用量为皂化产物脱出溶剂后浓缩物量的4倍。3.1.2萃取分离中二氯甲烷的用量皂化

3、生成的脂肪酸皂能使部分二氯甲烷和叶黄素单体分散于水相中，所以二氯甲烷与水的体积比至关重要，太大则造成溶剂浪费，太小则不利于叶黄素单体分离。经实验确定二氯甲烷用量为水与皂化产物脱出溶剂后浓缩物量的和。3.1.3水洗二氯甲烷层中水的用量水洗二氯甲烷层要确保滤液呈中性，且无色透明。3.1.4回收水相中分散的叶黄素由于皂化生成产物中的脂肪酸皂具有表面活性,使部分叶黄素分散于水相中难以分出,加入氯化钙，形成脂肪酸钙皂悬浮于水的表面，使得叶黄素释放出来，氯化钙加量应使得水相无色透明，过滤悬浮物，二氯甲烷洗涤滤饼，滤液为二氯甲烷的叶黄素溶液。3.2纯化过程3

4、.2.1叶黄素结晶中溶剂的选择在结晶纯化过程中要求溶剂对杂质和叶黄素的溶解具有很好的选择性,且毒性要小,安全性好。实验确定了醋酸乙酯与石油醚的混合溶剂，在一定配比和用量下，能够除去与叶黄素结构相似、难以去除的杂质，如隐黄素等。3.2.2混合溶剂的用量比15g万寿菊萃取物经皂化、分离所得的叶黄素粗品用不同配比的醋酸乙酯与石油醚的混合溶剂60ml洗涤，所得叶黄素晶体经无水乙醇洗涤、40℃真空干燥得到叶黄素单体。所得结果如图2（a）。取样品20.0mg，用流动相配成8×10-6g·ml-1的溶液，在上述色谱条件下测定叶黄素含量。所得结果如图2（b）。

5、从图中看出，当醋酸乙酯与石油醚体积比为1∶4时，叶黄素的得量与含量均最高。3.2.3混合溶剂用量15g万寿菊萃取物经皂化、分离所得的叶黄素粗品用体积比为1∶4的醋酸乙酯与石油醚的混合溶剂分别用不同用量洗涤，所得叶黄素晶体经无水乙醇洗涤、40℃真空干燥得到叶黄素单体。所得结果如图3（a）。取样品20.0mg，用流动相配成8×10-6g·ml-1的溶液，在上述色谱条件下测定叶黄素含量。所得结果如图3（b）。从图3中看出，叶黄素晶体的得量随着混合溶剂的用量的增加而减少，这主要是由于醋酸乙酯对叶黄素的溶解度较大，使得部分叶黄素溶入混合溶剂,当混合溶剂用

6、量为粗品的3倍（ml/g）时叶黄素含量最高,说明此时混合溶剂溶剂杂质效果最好。3.2.4叶黄素重结晶用混合溶剂结晶出的叶黄素晶体含有少量极性较强的杂质，用无水乙醇洗涤晶体可以驱除此类杂质，无水乙醇洗涤至滤液无色透明为止。叶黄素在无水乙醇中重结晶后，色泽纯正，纯度可达90%以上。3.3真空干燥在40℃下真空干燥6h，得到高纯度叶黄素晶体。4结论用二氯甲烷从万寿菊花萃取物的皂化产物中萃取分离叶黄素单体，脂肪酸钾皂使部分叶黄素单体增溶于水相中，很难完全分离，加入氯化钙形成脂肪酸钙皂，释放出叶黄素单体，然后用二氯甲烷溶解这部分叶黄素，可以完全分离叶黄素

7、单体，提高其收率。选用醋酸乙酯与石油醚、无水乙醇纯化叶黄素，此法工艺简单，产品纯度高，色泽纯正，有较高的工业生产应用价值。【