弓背青鳉在生物科学专业发育生物学综合性实验设计中的应用

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1、弓背青鏘在生物科学专业发育生物学综合性实验设计中的应用郭昱嵩王中铎刘皓张艳苹刘丽刘楚吾广东海洋大学水产学院南海水产经济动物增养殖广东普通高校重点实验室摘要：以弓竹青■为实验材料，从受精，正常胚胎发育过程的观察，环境因素对胚胎发育的影响，内分泌干扰物的浓度梯队刺激对胚胎发育的形态学观察及相关基因表达水平的检测等一系列连续实验的设计，可为生物科学专业发育生物学的综合性实验设计提供参考，使学生掌握一系列发育生物学的基本实验技术，增强学生对知识的理解层次，培养学生的科研兴趣。关键词：发育生物学;综合性实验;弓背青錯;作者简介：郭昱嵩，女，汉，湖南省桂东县人，博士研究生，

2、广东海洋大学，教授，研宄方向：水产动物遗传与发育生物学。作者简介：王中铎，广东海洋大学副教授，研宄方向：水产动物遗传多样性与发育生物学。基金：国家级水产科学与技术试验教学示范中心建设项目(奥教高函(2013)113)发育生物学是研究生物有机体发育过程与机理的一门学科，是当今生命科学进展最为迅速的分支学科之一［1-3］。发育生物学的产生是以胚胎学为基础，并融入分子生物学、细胞生物学、遗传学和生物化学等学科的相关知识和技术，从20世纪70年代开始形成一门独立的学科，近年来取得了巨大进展，成为解释生物个体发育的基础学科，也成为生命科学领域最活跃的学科之一。国内外各高等

3、院校纷纷开设发育生物学作为本科生的专业基础课程，并开设实验教学课程以增加学生理解层次及培养学生科学思维和综合素质［4-6］。一发育生物学实验涵盖面广、内容丰富、综合性强发育生物学实验内容包括生殖细胞的发生、受精、个体发育的过程、功能基因表达基因调控的机制和原理、发育与环境的关系、凋亡和再生、发育与进化等等；同时吸纳了分子生物学、遗传学、胚胎学等很多领域的研究手段。发育生物学发展速度快、但架构不成熟。近年来，从事发育生物学研究的队伍扩人，研究成果的不断涌现，推动丫发育生物学的不断发展。但是相比其他生物学分支学科，发育生物学实验教学还处于刚刚起步阶段，统一的、可广泛

4、接受和采纳的教学体系还没有形成m。传统的发育生物学实验教学内容中和当比重来源于胚胎学实验，主要是作为理论教学的补充，以验证性实验为主，而综合性、设计性的实验内容相对比较少，对学生综合素质、创新能力的培养没有得到足够重视m。通过综合性的实验，能够充分发挥实验教学作用，使学生从准备实验材料、药品试剂到具体实验操作的整个实验教学过程中都基本能独立完成，掌握发育生物学的基本实验技术，并且能养成和增强学生良好的创新思维习惯，从而提高发现问题、分析问题和解决问题的能力m。但是，至目前为止，由于受到专业领域和实验条件的限制，开设发育生物学实验课程的高等院校还是比较少，难以实现

5、和达到发育生物学的实验目标和对理论课的辅助作用。广东海洋大学水产学院自2002年起对海洋生物学专业本科生开设了发育生物学理论课及实验课，并且不断改革进行和完善发育生物学实验教学体系，于2009年开设了以硬骨鱼类(如金鱼、胡子鲶)和两栖类(如虎纹蛙等)为实验材料的适合于水产类的发育生物学综合性实验，取得了较好的教学效果，但由于实验材料的可操控性不强，使得实验开设的成功率和有效率降低IM。由于模式生物具有生理特征能够代表生物界的某一大类群、容易获得并易于在实验室内饲养繁殖及容易进行实验操等优点，为了不受限于实验材料，基于模式生物的《发育生物学》实践教学改革势在必行。

6、木文利用木地红树林海区的广盐性鱼类弓背青鏘作为潜在的模式生物开发，作为辅助斑马鱼为研宄对象进行发育生物学实践教学的改革探索。弓背青鏘(Oryziascurvinotus)又称海南青鏘，隶属丁•辐鳍亚纲(Actinopterygii)、颌针鱼目(Beloniformes)、怪颌鏘科(Adrianichthyidae)、青鏘属(Oryzias),在我国广东沿海分布广泛,繁殖力强，世代周期短，盐度适应范围广，与日本青鄉(oryziaslatipes)为同一属,在发育上非常相似，为体外受精，所以胚胎从受精开始整个发育过程都是在体外，在鱼苗出膜前，主要器官发育都己完成，且

7、受精成功的胚胎呈透明状，可以直接观察在化学物暴露下胚胎发育过程的致畸等现象。在每个发育阶段都有其明显的特征，可以准确地对在各个不同阶段进行化学物暴露，可减少浪费、降低成本，而II是我国本土物种，不会对当地其他物种造成威胁，同时，对环境污染物干预敏感，具有开发为监测我国环境以及对环境毒理学研宄的模式物种。二弓背青鏘易于繁育，己经幵发完善了一套较为完备实验室养殖规程具体如下:养殖水体要经尼龙、生物吸附剂、活性炭、生化过滤器及紫外杀菌系统处理，溶解氧水平为4-8mg/L，水温为26-30°C.养殖生长期为0.2-0.5L/尾。弓背青鏘性成熟个体体长3.5-4cm，卵生

8、，胚胎于28"C(26-