中华青鳉胚胎发育及胚胎低温保存初步的研究

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1、上海海洋大学硕士学位论文答辩委员会成员名单姓名工作单位职称备注答辩地点答辩日期2上海海洋大学学位论文原创性声明本人郑重声明：我恪守学术道德，崇尚严谨学风。所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果。除文中已经明确注明和引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品及成果的内容。论文为本人亲自撰写，我对所写的内容负责，并完全意识到本声明的法律结果由本人承担。学位论文作者签名：日期：年月日上海海洋大学学位论文版权使用授权书学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电

2、子版，允许论文被查阅或借阅。本人授权上海海洋大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。保密□，在年解密后适用本版权书。本学位论文属于不保密□学位论文作者签名：指导教师签名：日期：年月日日期：年月日3中华青鳉胚胎发育及胚胎低温保存的初步研究摘要本研究对中华青鳉（Oryziaslatiipessinensis）在28℃受精卵发育做了连续跟踪观察，并确定了发育时期和每一发育时期经历时间，描述了每个时期的发育状况。然后对中华青鳉胚胎的三个时期发眼期，十六肌节期，脊索空泡化完成期做了两种溶液，四种保存方式的

3、低温（0-4℃）15天保存，记录了胚胎存活率。后续又将青鳉胚胎在28℃下恒温孵化，记录孵化率。最后将孵出的正常仔鱼数与样本中胚胎总数做对比，得出了经过低温保存15天后28℃孵化的正常仔鱼率研究内容主要包括：1中华青鳉胚胎发育（28℃）过程本试验对中华青鳉受精卵的发育做了连续观察，并对发育时期做了细分和描述。结果表明：中华青鳉受精卵经过了六大时期(卵裂时期、囊胚形成时期、原肠胚形成时期、神经胚形成时期、器官形成时期、孵化期)，32个具体发育时期才会孵出仔鱼。2四种方式低温（4℃）保存青鳉胚胎试验本实验对三个不同发育时期（发眼期，十六肌节期，脊索空泡化完成期）的中华青鳉胚胎

4、做了低温15天保存，结果表明：在只使用聚维酮碘保护液时，三个时期的平均胚胎存活率为75.0%，71.1%，62.5%，保存结果较好的是发眼期在0.5mg/l达到84.4%，十六期在0.5mg/l和1.0mg/l达到82.2%。使用添加泥炭土的聚维酮碘保护液时，三个时4期的平均胚胎存活率为86.0%，84.3%，74.5%，保存结果较好的是发眼期和十六期在0.5mg/l水平上达到88.9%，86.7%。只使用孔雀石绿保护液时，三个时期的平均胚胎存活率为74.5%，68.3%，72.7%，发眼期保存结果较好，十六期在1.0mg/l水平上达到86.7%。使用添加泥炭土的孔雀石

5、绿保护液时，三个时期的平均胚胎存活率为84.3%，79.0%，80.5%。3低温保存恒温（28℃）孵化胚胎试验本试验为低温保存后的后续试验，将存活的青鳉胚胎从低温保存中的样品袋中取出，放入装有纯净水的培养皿中28℃水浴锅中恒温培养，直至孵化出膜，记录孵化结果。结果表明：低温保存时只使用聚维酮碘保护液的三个时期胚胎平均孵化率为73.7%，73.0%，79.1%，孵化结果较好的是发眼期在0.5mg/l水平达到84.4%，十六肌节期在0.5mg/l和1.0mg/l水平达到75.7%，78.4%。低温保存时添加泥炭土的聚维酮碘保护液的三个时期胚胎平均孵化率为79.5%，74.0

6、%，79.1%，发眼期在0.5mg/l水平上能达到92.5%孵化率。低温保存时只使用孔雀石绿保护液的三个时期胚胎平均孵化率为73.3%，73.8%，66.2%，十六肌节期在2.0mg/l水平上达到87.9%的孵化率。低温保存时添加泥炭土的孔雀石绿保护液的三个时期胚胎平均孵化率为74.5%，78.1%，69.3%，发眼期在1.0mg/l,2.0mg/l水平的孵化率为87.5%，82.5%。十六期的三个处理组孵化率能82.1%，94.3%，84.4%。脊索期在1.0mg/l,2.0mg/l水平的孵化率分别为71.8%，78.4%。54孵化青鳉胚胎正常仔鱼试验本试验为青鳉胚胎

7、在28℃恒温孵化后体式显微镜下观察胚胎的体型及内脏发育状况，记录发育正常的仔鱼结果。结果表明：低温保存时只使用聚维酮碘保护液的三个时期胚胎正常仔鱼率为54.0%，48.2%，48.3%，发眼期在0.5mg/l水平上的仔鱼正常率为71.11%，十六期在0.5mg/l，1.0mg/l水平上的仔鱼正常率分别为62.2%，60.0%。脊索期中0.5mg/l，1.0mg/l水平上的仔鱼正常率分别为62.2%，57.8%。低温保存时添加泥炭土的聚维酮碘保护液的三个时期胚胎正常仔鱼率为67.1%，59.8%，56.8%。发眼期在0.5mg/l，1.0m