体细胞克隆技术的研究进展

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1、体细胞克隆技术的研宄进展摘要体细胞克隆绵羊“多莉”的诞生，表明成年哺乳动物体细胞具有基冈组的全能性。论文从“多莉”诞生的背景、体细胞克隆技术的研宄现状、体细胞核移植过程中的核质互作、该技术目前存在的问题及其在制作转基因动物上的应用等方面，概述了体细胞克隆技术的研究进展。关键同体细胞克隆；体细胞核移植；转基因动物一、体细胞克隆技术体细胞克隆技术是指把动物体细胞经过抑制培养，使细胞处于休眠状态。采用核移梢的方法，利用细胞拆合或细胞重组技术，将卵母细胞去核作为核受体，以体细胞或含少量细胞质的细胞核即核质体作为核供体，将后者移入前者中

2、，构建重组胚，供体核在去核卵母细胞的胞质巾重新编程，并启动卵裂，开始胚胎发育过程，妊娠产仔，克隆出动物的技术，又可称之为体细胞核移植技术。早在1950年，美国生物学家布格斯和金就幵始了青蛙胚胎细胞的克隆研宄。在1960年，英国生物学家格登利成功的用青蛙体细胞克隆出蝌蚪。1993年斯迪尔曼和赫尔报道在试管婴儿研究中，获得可分裂的但不能在体外存活的人类胚胎细胞。1997年2月英国罗斯林研究所的科学家成功的克隆了高等哺乳动物绵羊，诞生了克隆羊多莉。这一切在技术上为克隆人类自身铺平了道路。克隆绵羊的诞生证明一个完全分化成熟的体细胞，还

3、能恢复到早期原始细胞状态，还能象胚胎细胞一样保存全部遗传信息，推翻了生物学界有关”用成年动物细胞无法培育成胚*’的理论，是生物技术及某理论的革命。其次，克隆技术的发展，使科学家们拥有一件新的非常有效的工具，来深入研宂重要的生命科学问题，包括各种疾病的发病机理、生物生长发育的机制、遗传和环境对生物的不同影响等等。再次，克隆技术将为动物遗传操作技术提供新途经，从而培育出优良的家畜、家禽，并克隆出生长快、抗疾病的转基因动物，生产重要的药物，或者为人类提供移植用的器官、组织和细胞。另外，克隆技术可以人为的保持人群中合理的性比，可以保存

4、珍贵的少数民族遗传组成，可以增加对生理性状有益的基因在群体中的频率，可以为无精子患者产生自己的后代。二、动物体细胞克隆技术的研宂进展动物克隆指不通过精子和卵子受精过程而获得与亲本具有相同遗传物质的后代的过程。动物克隆包括孤雌生殖、卵裂球分离与培养、胚胎分割和细胞核移植等。（一）突破性进展——克隆羊目前，哺乳动物的克隆方法主要有胚胎分割和细胞核移植两种。过去人们认力，细胞的分化程度越高，它指导早期胚胎发育成新个体的能力就越低，高度分化的高等成年动物体细胞甚至完全不具备这种基因组全能性。但是，1997年2月罗斯林研宄所的伊恩•维尔

5、穆特宣布世界首例体细胞克隆绵羊“多莉”诞生这一突破性进展打破了这一观念。具体过程为：从芬兰多塞特母绵羊的乳腺中取山乳腺细胞，将其放入低浓度的营养培养液中，细胞逐渐停止了分裂（称之为供体细胞），再将其细胞核取出；从一头苏格兰黑而母绵羊的卵巢屮収出未受精的卵细胞，并立即将其细胞核除去，留下一个无核的卵细胞（称之力受体细胞）利用电脉冲的方法，使供体细胞核与去核卵细胞发生融合，融合细胞还可以产生类似于H然受精过程中的一系列反应，能像受精卵一样进行细胞分裂、分化，从而形成胚胎细胞；将胚胎细胞转移到另一只苏格兰黑面母绵羊的子宫内，胚胎细胞

6、进一步分化和发育，最后产出“多莉”这只小。绵羊与多塞特母绵羊的外貌完全相同。因为它是世界上第一例经过体细胞核移植出生的动物，是克隆技术领域研究的历史性突破，具有划时代意义。意味着在理论上证明了成年哺乳动物的体细胞不仅具有基因组的全能性，而且还能在卵母细胞质中回复到发育的起始状态，完成整个个体发生的过程；在实践上证明了利用体细胞进行动物克隆的技术是可行的，将有无数相同的细胞作为供体进行核移植，并n在与卵细胞融合前可对这些供体细胞进行一系列复杂的遗传操作，从而为大规模复制动物优良品种和生产转基因动物提供了有效方法。令人兴奋的是它采

7、用了一种全新的生殖方式，即不经过精卵结合且其后代在基因型上与其亲代完全等同，它预示了一场涉及生殖、医学、生物制药等诸多领域的变革。冋时一些伦理及宗教界人士也为此感到恐慌，担心这项技术的应用会引起诸如乱伦等社会学w题。于是各国纷纷出台禁止克隆人的政策，但对于其它动物，这项技术依旧方兴未艾。许多学者从不同方面研宄了影响体细胞克隆成功率的因素，如核供体、核受体、供受体间的相互作用及核移植操作过程等，其目的在于提高体细胞克隆的成功率。（二）克隆羊诞生后的体细胞核移祖研究成果a）同种属内的体细胞核移植1998年7月，美国T.Wakaya

8、ma等用小鼠卵丘细胞作核供体，克隆出小鼠，而后又成功地用克隆出的小鼠卵丘细胞作核供体，从屮克隆出第二代小鼠。他们克隆小鼠的技术相对简单且成功率较高——“檀香山技一称术”。至1999年底，全世界己有6种类型细胞（胎儿成纤维细胞、乳腺细胞、卵丘细胞、输卵管/子宫上皮细胞、肌肉细胞