国家标准猪牛羊体细胞克隆技术规范

《国家标准猪牛羊体细胞克隆技术规范》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。

1、国家标准《猪牛羊体细胞克隆技术规范》编制说明（征求意见稿）一、任务来源本国家标准的制定任务列入国家标准化管理委员会《国家标准委关于下达2018年第二批国家标准制修订计划的通知》（国标委综合〔2018〕41号》，项目编号“20180921-T-424”。本项任务由中国标准化研究院提出并归口，定于2019年完成。本标准由中国农业科学院北京畜牧兽医研究所等单位共同完成。二、目的和意义体细胞克隆技术是非常重要的一项生物技术，在科研、医疗和畜牧产业中都有着重要的应用。在科研方面，体细胞克隆技术具有重要的理论研究价值。体细

2、胞克隆的过程，实质上是细胞重编程以及胚胎发育两个生物学过程，而目前我们对这两个过程都知之甚少。在细胞重编程方面，体细胞克隆技术是唯一的能够获得完整个体的细胞重编程技术。2014年，高绍荣等的研究表明，与iPS技术相比，以体细胞克隆技术获得的干细胞，其端粒和线粒体更容易得到保护。表明体细胞克隆在细胞重编程上具有一定的优势。另外在哺乳动物胚胎发育研究中，体细胞克隆技术也发挥着不可替代的作用。比如目前的研究发现，相比于正常受精的胚胎，克隆胚胎的滋养层细胞明显发育不正常，并且这有可能是导致克隆胚胎流产率高的主要原因。这

3、实际上为我们研究胚胎滋养层发育、胚盘发育以及哺乳动物尤其是猪等非侵入性胎盘动物中胎盘与子宫的相互作用等科学问题提供了最佳的研究材料。除此之外，体细胞克隆技术在研究表观遗传学、核质相互作用等基础科学问题中也具有重要的作用。在医疗研究方面，体细胞克隆技术可以生产出供人类移植用的各种器官、组织；又解决了移植手术中器官或组织异体排斥的难题。更进一步地还可以建立各种基因模型，把握如癌症等疾病产生的根本原因，为根治这些疾病提供技术条件。在畜牧产业方面，体细胞核移植技术不仅能快速复制优良种畜，扩大种畜群体规模，而且与基因编辑

4、技术结合后，能够快速获得大量具有特定表型的畜牧品种，对培育新型畜牧品种具有重大意义。自从2008年我国启动转基因重大专项以来，我国的猪、牛、羊等动物的体细胞20克隆技术研究不断取得新的成果，目前我国的猪、牛、羊等动物的体细胞克隆技术水平已处于国际领先水平，建立了完整的体细胞克隆动物规模化技术体系。尽管如此，体细胞克隆技术仍然存在技术体系不统一、操作流程多样以及缺乏可量化的质量控制标准等问题。不同科研院所或者高校建立的体细胞克隆技术不尽相同。比如体细胞克隆技术中的去核技术，目前就有盲吸法、化学去核法、切割法等不同

5、方法，且不同方法涉及的操作流程、操作条件、试剂种类、耗材型号均不一致。另外，目前的体细胞克隆技术缺乏有效的质量控制标准和方法。这一现状不仅没有很好的发挥我国动物体细胞克隆技术的规模化优势，同时也大大阻碍了体细胞克隆技术在医疗和畜牧产业中的推广和应用，因此急需建立标准化的动物体细胞克隆技术规范。本标准的目的是建立猪、牛、羊三种重要家畜动物的体细胞核移植技术规范，对体细胞克隆技术中的一般要求、卵母细胞采集、成熟培养、胎儿成纤维细胞分离、卵母细胞去核移核、重构胚的融合与激活等技术操作进行标准化和规范化。本标准的制定和

6、实施，将有力的促进体细胞克隆技术在猪、牛、羊三种我国重要的畜牧动物养殖业、生物反应器以及动物疾病模型产业中的应用，为提高我国猪、牛、羊新品种的竞争力奠定基础。三、标准制定原则(一)标准编制原则依据目前最新的研究进展及应用情况，本着“实用性、普及性、可操作性、科学性、合理性”的原则，结合调研情况，提出了适用于猪、牛、羊三种重要家畜动物的体细胞克隆技术操作规范。(二)标准制订主要依据1、标准编写遵循GB1.1-2009《标准化工作导则第1部分：标准的结构和编写规则》的有关要求。2、标准编写内容参考我国与农产品相关的

7、法规、标准，包括《GB/T25881-2010牛胚胎》、《GB/T26938-2011牛胚胎生产技术规程》、《GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法》等等。四、标准主要内容本标准系统性的对猪、牛、羊三种家畜动物的体细胞克隆技术进行了规范，主要包括以下内容：20(一)术语与定义本标准系统整理了猪、牛、羊三种家畜动物的体细胞克隆技术相关的术语，并规定了其具体含义。(二)缩略语本标准涉及的缩略语较多，为便于理解，将本标准中出现的主要缩略语列进行了整理，列在标准正文的表1中。(三)基本要求体细胞克隆对工作区条件、

8、设备等具有特殊的要求，这些条件可能会影响最终操作结果，因此在本标准规定了工作区条件和必备的设备。(四)清洗与消毒同样，在体细胞克隆中设计胚胎和体细胞的采集、分离培养等操作，对培养皿有较高要求，因此本标准规定了清洗和消毒的要求。(五)体细胞克隆技术流程与操作步骤猪、牛、羊三种家畜动物的体细胞克隆操作既有共性，也有各自的特殊要求，为了方便读者理解，本标准首先列出了体细胞克隆技术的整体流程，