腺病毒介导kdr启动子的胸苷激酶基因对血管内皮细胞的靶向杀伤作用

《腺病毒介导kdr启动子的胸苷激酶基因对血管内皮细胞的靶向杀伤作用》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、腺病毒介导KDR启动子的胸苷激酶基因对血管内皮细胞的靶向杀伤作用作者：朱欠元，周玉梅，李宝金，毛慕华，彭才圣，郭剑【关键词】内皮,血管；KDR启动子；单纯疱疹病毒属；胸苷激酶；腺病毒科　　SelectivekillingofvascularendothelialcellsbasedonadenovirusmediatedherpessimplexvirusthymidinekinasegenetransfectionunderthedrivingofKDRpromoter　　【Abstract】

2、AIM:Toinvestigatethetargetkillingeffectofadenovirusmediatedherpessimplexvirusthymidinekinasegene(HSVtk)transfectionunderthedrivingofKDRpromoteronthevascularendothelialcellsinvitro.METHODS：ByusingAdEasysystem,rebinantadenovirusplasmidcontainingKDRorcy

3、tomegalovirus(CMV)promotercontrolledHSVtkgene(AdKDRtkandAdCMVtk)plificationin293cells,thevirusanumbilicalvenousendothelialcells(HUVEC)andKDRunexpressedE2.Folloinistrationofganciclovir(GCV),thesurvivalrateofgeransfectedHUVECandE2ethod.RESULTS：TheAdEas

4、ySystemproducedahightiteroftherebinantadenovirus(1×1013pfu/L).Underinfectionindexof100,0upto50mg/L,thesurvivalratesofAdKDRtktransfectedHUVECandE2decreasedfrom(89.4±4.6)%and(91.5±4.4)%to(22.9±4.7)%and(71.4±2.9)%atproperorderrespectively(P<0.01),(89

5、.9±6.2)%and(90.8±5.7)%to(12.8±2.6)%and(18.8±6.1)%,respectively(P>0.05).CONCLUSION：AdenovirusmediatedHSVtktransfectionunderthedrivingofKDRpromotercouldyieldthespecifickillingeffectonvascularendothelialcellsentofGCV.　　【Key,vascular;KDRpromoter;simpl

6、exvirus;thymidinekinase;adenoviridac　　【摘要】目的：体外实验评估腺病毒介导KDR启动子胸苷激酶系统(HSVtk)杀伤血管内皮细胞的作用.方法：采用新型AdEasy系统，构建受KDR启动子和巨细胞病毒(CMV)启动子调控并可表达HSVtk基因的AdKDRtk和AdCMVtk，在293细胞中包装、扩增后，体外分别感染表达KDR的人脐静脉血管内皮细胞株（HUVEC）和不表达KDR的人鼻咽癌细胞株E2，用丙氧鸟苷(GCV)处理受染细胞，并以MTT法检测其细胞增殖情况

7、.结果：病毒滴度均为1×1013pfu/L.在感染复数（MOI）为100的条件下，GCV浓度由0增至50mg/L时感染含AdKDRtk的HUVEC细胞和E2细胞存活率从(89.4±4.6)%和(91.5±4.4)%分别下降至(22.9±4.7)%和(71.4±2.9)%（P<0.01），而感染AdCMVtk的HUVEC细胞和E2细胞存活率从(89.9±6.2)%和(90.8±5.7)%分别下降至(12.8±2.6)%和(18.8±6.1)%（P>0.05）.结论：腺病毒介导KDR启动

8、子胸苷激酶系统具有特异性杀伤血管内皮细胞作用.　　【关键词】内皮，血管；KDR启动子；单纯疱疹病毒属；胸苷激酶；腺病毒科　　0引言　　肿瘤生长有赖于血液营养和氧气供给，阻断肿瘤组织内血管生成和血管化是一个很有发展前景的灭瘤或阻止肿瘤转移有效的途径［1-2］.随着分子生物学及基因工程技术的发展，基因治疗给恶性肿瘤的治疗提供了新方法.研究表明胸苷激酶系统(HSVtk/GCV)能有效杀伤血管内皮细胞［3］，血管内皮细胞生长因子(VEGF)是目前所发现血管生成相关因子中最重要的血管生长因子，其生物效应是