祛风通窍方对血管性痴呆大鼠线粒体氧化损伤保护作用的分析

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1、目录1祛风通窍方对血管性痴呆大鼠线粒体氧化损伤保护作用研究„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„1.1中文摘要„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„1.2英文摘要„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„1.3前言„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„1.4材料与方法„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„1.5结果„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„1.6讨论„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„1.7结论„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„1.8参考文献„„„„„

2、„„„„„„„„„„„„„„„„1.9英汉缩略词对照表„„„„„„„„„„„„„„„„„2致谢„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„3阿尔茨海默病发病机制及治疗研究进展（综述）„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„2祛风通窍方对血管性痴呆大鼠线粒体氧化损伤的保护作用研究摘要目的：研究祛风通窍方对血管性痴呆(VD)大鼠线粒体（MIT）超氧化物歧化酶（SOD）、细胞色素氧化酶（COX）、丙二醛（MDA）及超微结构影响，初步探讨祛风通窍方对VD大鼠海马MTI氧化损伤的保护机制。方法：1.分组方法：造模

3、前后利用Morris水迷宫筛选，符合要求的雄性SD大鼠60只，随机分为假手术组、模型组、尼莫地平组(简称“阳性组”)、祛风通窍方高剂量组（简称“高剂量组”）、祛风通窍方中剂量组（简称“中剂量组”）、祛风通窍方低剂量组（简称“低剂量组”）各10只；2.造模方法：选用永久性结扎双侧颈总动脉（2-VO）法造模；3.给药方法：阳性组予尼莫地平6．25mg/kg/d灌胃，高、中、低剂量组分别给予祛风通窍方26．8g/Kg/d、13．4g/Kg/d、6．7g/Kg/d灌胃，假手术组、模型组予等体积蒸馏水灌胃，连续30天；3.取

4、材：Morris水迷宫检测大鼠行为学，每组随机抽2只心脏灌注内固定，取脑组织；余下大鼠处死后取海马，制成海马匀浆，差速离心法提取MIT,﹣80℃保存。4.指标检测：化学比色法检测SOD活性、MDA含量；ELISA法检测COX活性；RT-PCR法检测细胞色素C氧化酶Ⅱ亚型（COXⅡ）的mRNA表达，光镜观察锥体细胞及电镜观察线粒体形态变化。结果：1.行为学情况：与假手术组比较，模型组、阳性组及高、中、低剂量组逃避潜伏期（EL）延长，原平台象限停留时间缩短，跨越虚拟平台次数减少，差3异有统计学意义(P<0.05)；与模

5、型组比较，阳性组，高、中剂量组学习记忆功能显著改善，大鼠EL随着训练时间延长而缩短，原平台象限的停留时间延长，跨越虚拟平台的次数增加，高剂量组最明显，差异有统计学意义(P<0.05)，低剂量组EL有减少，但无统计学意义（P＞0.05）。2.SOD、MDA、COX检测：与假手术组比较，模型组、阳性组及高、中剂量组SOD活性降低，MDA含量升高，COX活性降低，差异有统计学意义(P<0.05)；与模型组比较，阳性组及高、中剂量组SOD活性升高，MDA含量降低，COX活性升高，差异有统计学意义(P<0.05)；与阳性组比

6、较，高剂量组SOD活性增强，MDA含量降低，COX活性增强，差异有统计学意义(P<0.05)；与高剂量组比较，中、低剂量组SOD活性降低、MDA含量升高，COX活性降低，差异有统计学意义(P<0.05)。3.光镜观察海马CA1区锥体细胞结果:假手术组锥体细胞3～4层，排列整齐紧密；细胞完整，形态正常，界限清晰，胞核大而圆，胞质丰富；模型组锥体细胞丢失明显，细胞1～2层，排列散乱；界限不清，大量细胞变形；核固缩碎裂、呈深蓝色、胞浆浓缩；阳性组及高、中剂量组锥体细胞形态得到了明显改善。4.电镜结果：假手术组MIT结构正

7、常，嵴结构清晰；模型组MIT明显水肿破裂，MIT嵴结构不清晰，MIT部分固缩；阳性组、高剂量组MIT受损情况得到了明显改善；中、低剂量组MIT改变介于阳性组与模型组之间。5.COXⅡ的mRNA表达：各组目的基因条带均出现，与假手术组比较模型组基因条带亮度变暗，各给药组基因条带亮度相对变亮；相对灰度值：与假手术组比较，模型组及各治疗组相对灰度值降低，差异有统计学意义（P<0.05）；与模型组比较，阳性组及高、中剂4量组灰度值明显增加，差异有统计学意义（P<0.05）；与阳性组比较，高剂量组灰度值增加，差异有统计学意义

8、（P<0.05）；与高剂量组比较，中、低剂量组灰度值降低，差异有统计学意义（P<0.05）。结论：1.祛风通窍方可改善VD大鼠学习记忆功能，改善VD大鼠海马锥体细胞及额叶皮层MIT的形态。2.祛风通窍方对VD大鼠线粒体氧化损伤的保护作用呈现一定的量效关系。3.可能的机制：通过增强SOD活性、减少MDA生成，增加COX活性，发挥抗氧化作用，保护MIT功能，改善