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时间:2018-12-01
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1、天王补心丹延缓衰老作用的实验研究论文.freell药液,放入4℃冰箱保存备用;维生素E-C颗粒,由无锡嘉菱医药有限公司生产,批号:060302,使用前用蒸馏水振荡配成5%的混悬液;D-半乳糖,由国药集团化学试剂有限公司提供;SOD试剂盒、MDA试剂盒,均购自于南京建成生物研究中心。1.3仪器水浴恒温振荡器(江苏金坛市实验仪器厂)、低速离心机(北京医用离心机厂)、电动搅拌机(杭州仪表电机厂)、LD型电子秤(沈阳龙腾电子有限公司)、GF-D800型半自动生化分析仪(山东高密彩虹分析仪器有限公司)。1.
2、4给药与造模[1-2]将小鼠随机分为6组,每组10只。分别为空白组、模型组、维生素E-C组、天王补心丹高、中、低剂量组。空白组:皮下注射生理盐水0.1ml.10g,造模第11d起灌胃蒸馏水0.1ml.10g;模型组:皮下注射D-半乳糖0.1ml.10g,造模第11d起灌胃蒸馏水0.1ml.10g;维生素E-C组:皮下注射D-半乳糖0.1ml.10g,造模第11d起灌胃维生素E-C颗粒0.1ml.10g;天王补心丹高、中、低剂量组:皮下注射D-半乳糖0.1ml.10g,造模第11d起按不同浓度配比灌
3、胃天王补心丹每天0.1ml.10g。实验周期:42d。1.5跳台实验[3]将小鼠分别放入反射箱内,适应3min,然后通电,小鼠受到电击时,其正常反应是跳上跳台以躲避电击,绝大多数小鼠会再次跳下跳台,受到电击又跳回去,训练持续5min,隔24h进行测试。测试时将小鼠置于跳台上,小鼠每次从跳台上跳下或双足同时接触电铜栅为1次错误,记录它第1次错误的时间(潜伏期)和5min内的错误次数。1.6SOD和MDA各组小鼠末次给药跳台测试后,将小鼠通过摘眼球取血的方法,取血清待测,随后颈椎脱臼处死小鼠,迅速取出
4、肝脏,用冰冷的生理盐水漂洗,滤纸吸干,精称0.4g,加生理盐水3.6ml,匀浆管中制成10%肝匀浆,3000r.min离心10min,在-20℃冷冻待测。SOD采用黄嘌呤氧化酶法测定,MDA采用硫代巴比妥酸比色分析法测定。1.7统计方法所有数据以均数±标准差(ˉx±s)表示,组间差异采用t检验。2结果2.1跳台实验结果见表1。表1各组小鼠跳台实验结果比较(略)注:与空白组比较#P0.05,##P0.01,###P0.001;与模型对照组比较*P0.05,**P0.01,***P0.001(下同)。
5、表1表明,天王补心丹高、中、低剂量组均具有一定的增强记忆力的作用。2.2对衰老模型小鼠自由基的影响见表2。表2表明:天王补心丹各给药组小鼠血清和肝组织中的SOD活性均有所提高,而MDA含量均降低,说明天王补心丹具有延缓衰老的作用。表2各组小鼠血清和肝组织中SOD、MDA测定结果(略)3结论天王补心丹对小鼠记忆获得性障碍、巩固障碍、再现障碍均有明显改善作用,方中人参具有提高SOD活性,清除体内致衰老自由基的作用;丹参可明显降低急性心肌缺血大鼠血浆及心肌中MDA含量,提高SOD活性,减轻心肌损伤;其它
6、各药也均有抗衰老的作用[5]。本实验结果证明:天王补心丹可以改善衰老小鼠的记忆能力,提高血清和肝组织中的SOD活性和MDA含量,具有一定的延缓衰老的作用。【
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