胀果甘草叶总黄酮提取工艺及治疗前列腺炎的物质基础研究

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1、中南民族大学硕士学位论文胀果甘草叶总黄酮提取工艺及治疗前列腺炎的物质基础研究姓名：邓引梅申请学位级别：硕士专业：生物化学与分子生物学指导教师：宋发军20080501中南民族大学硕士学位论文摘要从民间的治疗实践中发现，胀果甘草叶水提物对于治疗前列腺疾病，尤其是慢性非细菌性前列腺炎有很好的疗效，但确切疗效的物质基础并不清楚。本文首先优化胀果甘草叶中总黄酮提取工艺及测定甘草酸、总糖的含量。其次，进行了甘草叶水提取物的成分分析及二甲苯所所致小鼠耳片肿胀和角叉菜胶所致小鼠足跖肿胀急性炎症模型抗炎作用的研究。最后，在这两个抗炎实验中

2、均显示了较好的抗炎作用前提下，研究了甘草叶水提物的不同剂量对慢性非细菌性前列腺炎的作用效果，为前列腺疾病的新药开发研制提供一些理论和实践基础。(1)利用正交实验法和响应面法分别对总黄酮的闪式提取工艺进行优化。结果表明：闪式提取法所用提取时间短、提取溶剂用量少。前者的最佳提取工艺为固液比1：40，乙醇浓度70%、提取时间6min；后者的最佳工艺条件为：乙醇浓度为 70.2%、液固比为40.3：1、提取时间为5min，此工艺条件下总黄酮的提取率高达 2.91%，与模型预测值基本相符。两种不同的分析方法的优化结果基本吻合，表

3、明本文确定的最佳工艺条件准确，可靠。其次，用HPLC法测定了甘草根、茎、 叶中的甘草酸含量。其中根中甘草酸的平均含量为2.94%，叶中的甘草酸含量很 低，仅为0.033%，茎中几乎检测不到。最后用苯酚‐硫酸法测定甘草叶中总糖含 量为15.93%，RSD=0.55%。(2)采用2.2的最佳提取工艺条件及测定方法测定了甘草叶水提物中的总黄酮 含量为2.73%，采用同2.3、2.4的测定方法测定了甘草叶水提物中的甘草酸、总糖 的含量，甘草酸检测不到，总糖为5.92%。采用二甲苯所所致小鼠耳片肿胀和角叉菜胶所致小鼠足跖肿胀两种模

4、型研究抗炎作用。结果表明，水提物和水提物分离得到的3个乙醇溶液洗脱组分在抗炎实验中的肿胀抑制率比正常组有明显提高， 且50%乙醇溶液洗脱组分的抗炎效果最好。(3)采用前列腺背叶注入1%角叉菜胶生理盐水溶液的方法成功地制作了慢性非细菌性前列腺炎的动物模型，将甘草叶水提物分为大、中、小剂量组，研究了甘草叶水提物对慢性非细菌性前列腺炎的治疗作用。结果显示，甘草叶大、中剂量组效果好于阳性对照组，白细胞数量得到明显降低，卵磷脂小体密度明显升高。病理切片结果显示了其抗前列腺炎的良好效果。关键词：胀果甘草叶；总黄酮；甘草酸；耳肿胀；足

5、肿胀；水提物；抗炎；慢性非细菌性前列腺炎I胀果甘草叶总黄酮提取工艺及治疗前列腺炎的物质基础研究AbstractFolkmedicalexperienceshowedthatwaterextractfromleavesofGlycyrrhiza inflataBatal.isprettyeffectiveforprostaticdiseases,especiallychronicnonbacterial prostatitis,butthepotentialbasisisnotclearatpresent.Firstly,

6、theconditionsoftotal flavonoidswereoptimizedandglycyrrhizicacidcontent,totalSugarcontentwere determinated.Secondly,theanti-inflammatoryeffectoftheleavesofGlycyrrhiza inflataBatal.wasresearchedusingearedemainducedbyxyleneandpawedema causedbycarrageen.Atlast,basedo

7、nthegoodanti-inflammatoryeffect,studiedthe dosedependenceofthecurativeeffectonchronicnonbacterialprostatitisusingwater extractfromleavesofGlycyrrhizainflataBatal.TheseprovidedsomeusefuLtheory fornewprostatemedicineresearch.(1)Theconditionsofhomogenateextractionof

8、totalflavonoidswereoptimized byorthogonaltestandresponsesurfacemethodrespectively.Theresultsshowthat homogenateextractionrequireslessextractiontimeandsolvent.A