人类染色体和染色体病

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1、第六章人类染色体和染色体病第一节   人类染色体第二节   染色体畸变第三节   染色体病1第一节人类染色体一、人类染色体的特征和类型染色体的形态、结构特征在细胞周期中，以细胞分裂中期最为典型，称为中期染色体。如何获得中期染色体?2细胞培养与染色体制备正常人外周血或细胞RPMI1640培养基+15%小牛血清=5ml370C，培养68hr加秋水仙素，培养2～4hr（抑制细胞分裂）收集细胞离心，去上清液（1000rpm/10min）低渗处理，0.075MKCI，370C，25min预固定，甲醇：冰醋酸=3：1离心，去上清液（1000rpm/10min）重复固定三次制片，染色，观察，

2、染色体分析3每一个中期染色体均由两条染色单体构成，每一条染色单体由一个DNA分子螺旋而成。两条染色单体互称为姐妹染色单体。两条染色单体通过一个着丝粒彼此连接。着丝粒将染色体分为两臂，长臂（q）和短臂（p）。4人类染色体形态中央着丝粒染色体,着丝粒位于染色体的1/2处。亚中着丝粒染色体,着丝粒位于染色体的5/8处近端着丝粒染色体,着丝粒位于染色体的7/8处5二、人类的正常核型核型（Karyotype）将一个体细胞中全套染色体按一定方式排列起来，构成图像。根据人类细胞遗传学国际命名体制（ISCN），依据染色体的形态、大小和着丝粒的位置，将染色体分为七组：6核型（Karyotype）

3、分析组别染色体编号大小着丝粒位置A1～3最大　中、亚中B4、5大亚中C6～12+X中亚中D13～15中近端E16～18较小中、亚中F19、20小中G21、22+Y，最小近端7核型的描述染色体总数，性染色体正常男性46，XY正常女性46，XX846,XY946,XX102、染色体显带染色体显带：经不同的方法处理染色体，经染色后使染色体在纵轴上显示明、暗或着色深、浅相间的横纹即显带（Banding）。这种带对每一条染色体来说都是独特的，可以区分和确认每一条染色体。11显带方法：G-显带：是最常用的方法。标本经胰蛋白酶处理后，应用Giemsa染色，镜检、分析,显示深染和浅染相间的带纹

4、。12R-banding反G带，因其恰好与G带着色深浅相反13除G显带、R-显带外还有：Q-显带：荧光显带，同G显带带纹。T-显带：末端显带，C-显带：着丝粒显带。新技术的应用使人们能够观察到前中期染色体，比中期染色体更伸展，这样观察的分辨率更高，可显示550~850条带，即高分辨染色体。14显带染色体识别G-banging界标、区和带如：2p1315常规G-banding使每个单倍体（24条染色体）都可以显示350～550条带，每条带大约代表5x106～10x106bp的DNA。每个基因长度不等，从102bp（a珠蛋白基因）～2x106bp（抗肌萎缩蛋白基因）。估计平均每30

5、00bp为一个基因，每条染色体可能代表几个或几百个基因16G显带深染带富含AT，富含长分散DNA序列，是DNA的重复区域，不编码表达基因，G显带浅带，富含GC，含有许多转录基因。这种DNA在间期核中呈现较为伸展的状态。除了转录基因之外，它含有短分散DNA序列。包括Alu序列。染色体上大多数断裂点和重排被认为是发生在浅染带。17新技术的应用使人们能够观察到前中期染色体，比中期染色体更伸展，这样观察的分辨率更高，可显示550~850条带，即高分辨染色体。18三、人类细胞遗传学研究进展荧光原位杂交（Fluorescenceinsituhybridization，FISH）FISH是细

6、胞遗传学方法和分子遗传学方法相结合的产物，可以认为是分子细胞遗传学技术。基本原理：应用Digoxingenin或Biotin标记探针DNA（Nicktranslation标记法），变性成单链后与变性后的染色体或细胞核靶DNA杂交。在荧光显微镜下观察并记录结果。19应用1、基因定位2、检测染色体的数目和结构异常3、遗传病的诊断和产前诊断20FISH技术的发展1、单色FISH2、多色FISH（24种染色）3、DNA纤维FISH4、比较基因组杂交211、单色FISH222、多色FISH（24种染色）23