长叶胡颓子对大鼠实验性结肠炎作用的研究

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1、长叶胡颓子对大鼠实验性结肠炎作用的研究【关键词】长叶胡颓子;,,,抗氧作用;,,,结肠炎  摘要:目的研究长叶胡颓子果实提取物对大鼠结肠炎损伤的保护作用。方法建立大鼠结肠炎模型,灌肠用药2周后,评价大鼠结肠黏膜损伤指数(CMDI),检测结肠髓过氧化物酶(MPO)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSHPX)活性及丙二醛(MDA)的含量。结果长叶胡颓子果实提取物(300,500,1000mg/kg)灌胃用药均能不同程度降低模型大鼠结肠损伤指数和MPO活性、减少MDA含量,提高SOD,GSHPX活性,且与用药

2、剂量呈一定量效关系。结论长叶胡颓子通过抗脂质过氧化,对大鼠结肠炎结肠损伤进行修复,减轻结肠损伤,抑制结肠炎大鼠炎症反应。  关键词:长叶胡颓子;抗氧作用;结肠炎  StudyontheEffectsofElaeagnusbockiiDielsontheExperimentalColonitisinRats  Abstract:ObjectiveTostudytheprotecteffectofElaeagnusbockiDielsodelucossdamageindexCMDIeasured.ResultsElaeag

3、nusbockiiDielsg/kg)decreasedtheactivityofCMDI,MPOandthelevelsofMDA,increasedtheactivityofSOD,GSHPXinmodelrats.ConclusionTreatmentinatingoxygenfreeradicalandrepairingg/ml),挑选上好果实水煎煮3次,过滤后浓缩成1g/ml的浓度即得。  1.1.2试剂和仪器2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)为美国Sigma公司产品,柳氮磺吡啶(SASP)原药由上海三维制

4、药有限公司提供(国药准字H31020450),MPO、SOD、MDA、GSHPX试剂盒由南京建成生物工程研究所提供。AEPROSET09D0501全自动生化分析仪(美国),TL16G型高速冷冻离心机(上海实验仪器厂生产)。  1.1.3动物健康DI,评分标准为:0=无损伤;1=轻度充血、水肿,表面光滑,无糜烂或溃疡;2=充血水肿,黏膜粗糙呈颗粒状,有糜烂或肠粘连;3=高度充血水肿,黏膜表面有坏死及溃疡形成,溃疡最大纵径<1cm,肠壁增厚或表面有坏死及炎症;4=在3分基础上溃疡最大纵径>1cm,或全肠壁坏死。结肠标本常规

5、石蜡包埋、切片,HE染色,光镜观察。另取新鲜结肠组织,用预冷的生理盐水冲洗除去血液,滤纸吸干称重,加9倍生理盐水,在低温(冰水)中用玻璃研磨器研磨制成10%的组织匀浆,高速离心取上清液低温(3℃)保存待测。MPO,SOD,GSHPX检测操作按试剂盒说明书进行。  1.2.3数据分析实验数据采用SPSS10.0软件进行t检验统计处理。  2结果  2.1结肠标本病理组织学观察模型组大鼠结肠黏膜充血水肿,大量炎性细胞浸润,肠壁增厚,黏膜表面有明显坏死及溃疡形成,腺体中杯状细胞减少。而不同剂量的长叶胡颓子用药组以上病理组织表

6、现明显缓解。  2.2对结肠炎大鼠结肠损伤及炎症反应的影响CMDI,MPO活性分别是反映结肠损伤与炎症程度的主要指标,两者在模型组大鼠升高,而长叶胡颓子(300,500,1000mg・kg-1)与SASP(200mg・kg-1)灌胃用药均不同程度降低了CMDI及MPO活性(P<0.05,P<0.01),且长叶胡颓子用药呈现一定量效关系。结果见表1。  2.3对结肠炎大鼠氧自由基的影响与模型组比较,长叶胡颓子提取物(300,500,1000mg・kg-1)与SASP(200mg・kg-1)灌胃用药均降低结肠组织中MDA含

7、量,升高SOD,GSHPX活性,且长叶胡颓子中、大剂量作用显著(P<0.01)。结果见表2。  表1长叶胡颓子对结肠炎大鼠结肠损伤及炎症反应的影响(略)  与对照组比较,a:P<0.01;与模型组比较,b:P<0.01;c:P<0.05,n=10  表2长叶胡颓子对结肠炎大鼠氧自由基的影响(略)  与对照组比较,a:P<0.01;与模型组比较,b:P<0.01;c:P<0.05,n=10  3讨论  TNBS与乙醇诱发大鼠结肠炎的主要机理为乙醇破坏结肠粘膜屏障,TNBS渗入结肠与大分子物质结合,形成全抗原引起肠壁一系列

8、免疫应答与炎症反应,其发病机理及病理表现与人类炎症肠炎非常相似。免疫异常、氧自由基作用在炎症性肠病的发病机理中占有重要地位。SOD能有效地清除氧自由基从而抑制结肠组织中的脂质氧化反应,并能保护细胞。目前许多实验通过检测SOD活性及MDA浓度的变化来反应其脂过氧化反应。本实验采用TNBS与乙醇诱发大鼠结肠炎模型后,发现大鼠结肠组织中

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