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时间:2018-11-23
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1、长叶胡颓子叶对小鼠免疫功能的影响论文【关键词】胡颓子叶;,,,免疫功能摘要:目的探讨胡颓子叶对小鼠免疫功能的影响。方法用不同剂量胡颓子叶水煎液给正常小鼠连续灌胃10d,检测小鼠免疫器官脏体比、巨噬细胞吞噬功能、T淋巴细胞增殖。结果胡颓子叶水煎液能增加小鼠胸腺指数和脾指数、明显增强小鼠巨噬细胞吞噬功能、促进T淋巴细胞增殖。结论胡颓子叶水煎液显著增强小鼠免疫功能。关键词:胡颓子叶;免疫功能InfluenceofLeavesofElaeagnusbockiiDielsonImmunefunctionsofMiceA
2、bstract:ObjectiveTostudytheeffectofleavesofElaeagnusbockiiDielsonimmunefunctionsofmice.MethodsAftermiceountofphocytesreplicationusandspleen,promotedphagocyticfunctionofphagocytesofmice,enhancedreplicationofTlymphocytes.ConclusionLeavesofElaeagnusbockiiDiels
3、canobviouslyincreaseimmunefunctionsofmice.Keymunefunctions胡颓子科Elaeagnaceae植物,全球共有3属约80余种,我国有沙棘属Hippophae和胡颓子属Elaeagnus两属。沙棘属我国只有4种[1],已经得到较好研究、开发和利用,并取得了巨大的经济、生态及社会效益[2]。胡颓子属我国约有51种[1],全国各地均产,但长江流域及以南地区更普遍.freela公司产品。BRMI1640细胞培养基,GIBCO公司产品。植物血凝素(PHA),Sigma
4、公司产品。二甲基亚砜(DMSO),苏州化工研究所产品。MK3型酶标仪,芬兰雷勃中国总部产品。2方法2.1受试物及给药长叶胡颓子叶常规水煎2次,用纱布过滤后混合并浓缩至1g生药/ml,4℃保存备用。实验小鼠随机分成4组,每组10只,正常对照组用生理盐水灌胃0.4ml/d,共10d;实验1,2,3组分别用胡颓子叶水煎液10,20,30g/kgd-1灌胃,连续10d后测定以下指标。2.2巨噬细胞吞噬功能测定实验第10天各组小鼠称体重,然后每只小鼠腹腔注射5%淀粉肉汤1ml,致敏24h后,腹腔注射1ml,5%鸡红细胞
5、悬液,4h后脱臼处死小鼠,并在腹腔注入5ml冷Hank液,按摩腹部5min后,解剖小鼠,无菌吸取腹腔液涂片,晾干,甲醇固定5min,瑞姬氏复合染色剂染色,镜检,在油镜下观察,随机计数100个吞噬细胞中吞噬鸡红细胞及吞噬的鸡红细胞总数,并计算巨噬细胞吞噬百分率与吞噬指数。2.3免疫器官脏体比的影响上述处死小鼠,无菌操作取胸腺,脾脏称重,分别计算胸腺指数、脾指数。2.4T细胞增殖反应测定(MTT法)[3]无菌取脾脏制备小鼠脾细胞悬液,用RPMI1640I不完全营养液流涤3次,10000r/min离心,然后用完全营
6、养液配成3.5×106ml,台盼蓝染色检测细胞存活率>95%;取100ml加入96孔细胞培养内(每孔含3.5×105ml个细胞,每个样品做3个复孔),加入240mg/L的PHA20ml(使终浓度为40mg/L,同时设不加PHA对照孔),置37℃、5%CO2培养箱中培养48h后,每孔加入MTT10ml(5g/L),再继续培养4h,离心,弃上清,加入30%DMSO100ml充分振荡后静置20min,最后用酶标仪于波长570nm处测OD值。结果以3个复孔的平均值±标准差表示。3结果3.1长叶胡颓子叶对小鼠免疫器官脏
7、体比的影响结果见表1。表1长叶胡颓子叶对小鼠胸腺和脾脏的影响(略)与对照组比较,aP<0.053.2长叶胡颓子叶对小鼠吞噬细胞吞噬功能的影响结果见表2。表2长叶胡颓子叶对小鼠巨噬细胞活性的影响(略)与对照组比较,bP<0.013.3长叶胡颓子叶对小鼠T淋细胞巴增殖的影响结果见表3。表3长叶胡颓子叶对小鼠T细胞增殖的影响(略)与对照组比较,bP<0.014讨论本实验结果显示,长叶胡颓子叶能增加小鼠胸腺指数和脾指数,增强腹腔吞噬细胞的吞噬功能,促进T淋巴细胞增殖,且胡颓子叶对小鼠免疫功能增强作用的程度与胡颓子叶浓
8、度之间有一定的依存关系,在一定范围内随浓度增加而增强(实验2,3组比实验1组效果好),但到了一定剂量后其作用效果就不再继续上升(实验2,3组之间差异无统计学意义P>0.05)。巨噬细胞是机体内生物学作用最为活跃的细胞,具有吞噬、杀伤及消化病原体、杀伤肿瘤细胞,并在特异性免疫应答中参与抗原的提呈及免疫调节作用[4]。T淋巴细胞介导特异性细胞免疫并参与体液免疫应答。而机体抗肿瘤免疫效应一般以细胞免疫为主
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