荧光定量pcr检测乙肝dna分析前质量控制

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1、荧光定量PCR检测乙肝DNA分析前质量控制关玲英（新疆维吾尔自治区人民医院临检中心新疆乌兽木齐830001）【摘要】目的:探讨荧光定量PCR检测乙肝DNA分析前质量控制措施。方法：选取木院收治的25例乙肝两对半检测确诊为乙肝大三阳患者的血液，每个患者的血液平均分为A、B、C、D组，A组即刻测定，B组室温放置2天测定，C组4°C放置7天测定，D组溶血即刻测定，比较不同的储存时间、温度以及标木是否溶血对乙肝病毒DNA进行荧光定量测量结果的影响。结果：未溶血标木与溶血标木相比以及不同储存时间和温度相比，差异均无统计学意义（P〉0.05）。结论：标木熔血、储存时间以及温度对荧光定量PCR检测乙肝大

2、三阳血清标木DNA的结果无影响。【关键词】荧光定量PCR;乙肝DNA;分析前质量控制【中图分类号】R575【文献标识码】A【文章编号】2095-1752（2016）10-0037-02QualitycontrolbeforeanalysisoffluorescencequantitativePCRdetectingHBV-DNAGuanLingying.TheXinjiangUygurAutonomousRegionPeople’sHospital,Xinjiang,Urumqi830001,China【Abstract】ObjectiveToinvestigatethemeasureof

3、QualitycontrolbeforeanalysisoffluorescencequantitativePCRdetectingHBV-DNA.MethodsSelectourhospital25casesofpatientsdiagnosedwithhepatitisBpositiveblood,thebloodofeachpatientweredividedintoA,BzC,Dgroups.Agroupimmediatelydetermined,groupBatroomtemperaturefor2daysbeforedetermination,groupCat4°Cfor7da

4、ysbeforemeasured,Dhemolyticgroupmeasuredimmediately.Comparewhetherdifferentstoragetime,temperatureandtheeffectofsamplehemolysisaffectthemeasurementsoffluorescencequantitativeHBV-DNA.ResultsNohemolysiscomparedwithhemolysis,differentstoragetimeandtemperaturecomparedwitheachother,thedifferencewasnots

5、tatisticallysignificant（P>0.05）.ConclusionHemolysis,storagetimeandtemperaturehavenoeffectonthefluorescencequantitativePCRanalysisofDNAsamplesofserumhepatitisBpatients.【Keywords】FluorescencequantitativePCR;HBV-DNA;Qualitycontrolbeforeanalysis乙型肝炎病毒是一种嗜肝性病毒，不仅能引起肝脏疾病，还会侵犯艽他器官组织［1】。本研究分析标本溶血、储存吋间以及温度

6、对乙肝大三阳血清标本DNA荧光定量PCR检测结果的影响。现报告如下。1.资料与方法1.1研究对象选取本院收治的25例乙肝两对半检测确诊为乙肝大三阳患者的血液，并将每个患者的血液平均分装于四支试管中。三支试管中的血液直接进行血清的制备，然后分为即刻检测（A组），室温放置48h后检测（B组），4°C放置7天后检测（C组）；另一支试管通过震荡制备溶血血清，即刻检测（D组），溶血程度通过用血液分析仪测定血红蛋白量获得。1.2方法将A、B、C、D组血清按照既定方法进行检测，每份血清标本均制成模版，按照荧光定量PCR检测的说明书进行操作，定量检测乙肝病毒DNA。其中，血红蛋白测定用日本SysmesK6

7、000血液分析仪，实吋荧光定量PCR检测系统为美国产MjRESEARCH实吋荧光基因扩增诊断仪，HBV-DNA荧光定量试剂盒来自深圳匹基生物技术开发有限公司。1.3观察指标（1）比较溶血标本对乙肝病毒DNA含量测定的影响；（2）比较不同储存吋间和温度对乙肝病毒DNA含量测定的影响。1.4统计学处理采用SPSS18.0软件进行数据统计处理。数据以x-&pluSmn;S表示，两组间计量资料采用t检验，计数资料采用χ2