荧光定量pcr检测hbv

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1、荧光定量PCR检测HBV作者：张蓓，杨晓云，刘蕊，纪凤祥【关键词】常规检查；,,HBV-DNA；,,荧光定量PCR　　摘要：目的：探讨HBV-DNA的检出情况与乙肝两对半结果之间的关系。方法：运用荧光定量PCR（FQ-PCR）检测307例疑似乙肝患者血清中的HBV-DNA，同时运用ELISA方法进行两对半指标的检测，并对结果进行相关性探讨。结果：HBsAg(+)HBeAg(+)HBcAb(+)组（大三阳组）患者血清HBV-DNA检出率为98.15%（53/54），平均拷贝数为7.56E+06/ml；HBsAg(

2、+)HBeAb(+)HBcAb(+)组（小三阳组）患者血清HBV-DNA检出率为27.78%（15/54），平均拷贝数为3.79E+05/ml；HBsAg(+)HBcAb(+)组血清HBV-DNA检出率为91.18%（31/34），平均拷贝数为2.85E+05/ml，小三阳组HBV-DNA阳性检出率及拷贝数均低于大三阳组，且与大三阳组比较均具有显著性差异（P<0.01，P<0.05）；HBsAb(＋)组血清HBV-DNA检出率为1.6%(1/63)，平均拷贝数为1.13E+08/ml；HBcAb(+

3、)组血清HBV-DNA检出率为16.67%(1/6)，平均拷贝数为3.00E+04/ml；HBsAb(＋)HBeAb(＋)HBcAb(＋)组血清HBV-DNA检出率为12.50%(4/32)，平均拷贝数为3.00E+05/ml；HBsAg(+)组血清HBV-DNA检出率为0（0/2）；HBV-M全阴性组HBV-DNA检出率为1.61%（1/62），平均拷贝数为2.75E+05/ml。结论：HBV-M阴性患者仍有HBV-DNA阳性者，因此在检测中应联合应用两种方法进行检测，提高检出率，避免漏诊，为临床HBV感染、

4、复制及传染性的判断以及指导治疗提供更为可靠的判定依据。　　关键词：常规检查；HBV-DNA；荧光定量PCR　　CorrelationofDetectionofHBV-DNAbyFluorescentQuantitativePCRinedsamplesfrom307suspectedcasesofhepatitisB.MeanethodseancopynumberlinpatientsofHBsAg(+),HBeAg(+)andHBcAb(+)(groupA),27.78%（15/54）and3.79E+05/m

5、linpatientsofHBsAg(+),HBeAb(+)andHBcAb(+)(groupB),91.18%（31/34）and2.85E+05/mlinpatientsofHBsAg(+)andHBcAb(+)(groupC).The2parametersore,theylinpatientsofHBsAb(＋),16.67%(1/6)and3.00E+04/mlinpatientsofHBcAb(+),12.50%(4/32)and3.00E+05/mlinpatientsofHBsAb(＋),HBeA

6、b(＋)andHBcAb(＋),0(0/2)inpatientsofHBsAg(+)and1.61%（1/62）and2.75E+05/mlinHBV-M-negativepatients.Conclusion：HBV-DNApositivitymayappearinHBV-M-negativepatients.Therefore,the2methodsshouldbesimultaneouslyusedinthedetectionofHBVinfectiontopromotethedetectingratet

7、oprovidemorereliableevidenceforjudgmentofHBVinfection,duplicationandinfectivityanditstreatmentinclinicalpractice.　　Keyl，最高拷贝数为7.70E+09copy/ml。　　2.2HBV-DNA定量测定与HBV-M的关系，见表1。　　表1ELISA法检测HBV-M和荧光定量PCR检测HBV-DNA结果（略）　　注：*与大三阳组比较P<0.01，#与大三阳组比较P<0.05　　3讨论　　　

8、　FQ-PCR是进行临床基因诊断的有效手段，它采用了完全闭管检测，不需要PCR后处理，避免了交叉感染；同时采用实时检测技术，所得Ct值和原始模板数量完全呈线形相关，定量准确率极高［3］，它不仅具有普通PCR的高灵敏性，而且由于荧光探针的应用，可以通过光电传导系统直接探测PCR扩增过程中荧光信号的变化以获得定量结果，所以还具有DNA杂交的高特异性和光谱的高精确性，克服了常规PCR的许多缺