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时间:2019-11-28
《荧光定量pcr结果分析》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、如果有标准曲线,按照标准曲线计算。一般都是相对量。则用deltadeltaCT方法来计算。举例如下:对照组基因A的CT值为20,内参(比如βactin)CT值15。实验组基因ACT值18,内参CT值14。首先算加样量:deltaCT=15-14=1。2的1次方是2。也就是说实验组的加样量是对照组的2倍。基因A:deltaCT=20-18=2。2的2次方是4。也就是说基因A的量在实验组是对照组的4倍。但是由于加样量是2倍,所以4处以2=2,最后的相对量是2倍。几点注意:1。必须确定扩增的特异性2。只有相同目标的CT值才能相减(扩增效率有可能不同)3。2的某次方只是
2、理论值,实际扩增效率低于2。4。最好不用SyberGreen由Ct值用2^-△△Ct法计算计算表达量差异的原理,可以看下面的图片:附件的Excel文件是计算用的,感兴趣也可以看看由Ct值是如何一步一步算出2^-△△Ct的。
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