多种荧光--多通道实时荧光定量PCR检测HPVDNA结果分析

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1、第34卷第5期同济大学学报(医学版)Vo1．34NO．52013年10月JOURNALOFTONG~UNIVERSITY(MEDICALSCIENCE)Oct．．2013doi：10．3969／j．issnl008—0392．2013．05．007·基础研究·多通道实时荧光定量PCR检测HPVDNA结果分析赵旭鸿，李智，赵迪(上海市杨浦区中心医院检验科，上海200090)【摘要】目的探讨多通道实时荧光定量PCR检测HPVDNA的效果，并应用于日常检测工作。方法对临床1100例宫颈分泌物标本采用多通道实时荧光定量PCR仪进行8种高危HPVDNA分型及定量检测。8种

2、高危HPV型别为主要高危型HPV16、18、45、31和次要高危型HPV33、52、58、67。结果在1100例标本中排除了14例p球蛋白为阴性的标本，剩余1086例标本总体的内标平均值为3．71×10IU／ml。随机重复性试验和对每个型别的各浓度标本进行的重复性试验每次扩增均为阳性，型别符合率为100％。共检测出阳性标本287例，HPV16、HPV18／45、HPV31、次要高危型和合并感染各有46、17、14、146和64例，分别占总阳性标本的16％、6％、5％、5l％和22％。所有标本绝对定量值的分布近似于正态分布。结论多通道荧光定量PCR检测HPvDNA

3、灵敏度高、复性好，可用于临床HPV感染的筛查与宫颈病变程度预测以及患者术后疗效观察。【关键词】人乳头状瘤病毒；多通道实时荧光定量聚合酶链反应；病毒载量【中图分类号】R711．32【文献标志码】A【文章编号】1008—0392(2013)05—0031—05DetectionofHPVDNAbyusingmulti-channelfluorescencerealtimequantitativePCRassayZHA0Xu—hong，LIZhi，ZHA0Di(Dept．ofClinicalLaboratory，CentralHospitalofYangpuDistr

4、ict，Shanghai200090，China)【Abstract】ObjectiveToevaluatethedetectionofhumanpapillomavirus(HPV)DNAbyusingmulti—channelfluorescencerealtimequantitativePCRassay．MethodsEightgenotypesofhighriskHPV(HPV16，18，45，31andHPV33，52，58，67)DNAwerequantitativelydetectedbyusingmulti—channelfluorescence

5、Real—TimePCRin1100samplesofcervicalsecretions．ResultsIn1100samples，14wereexcludedbecauseofnegative[3一globin；whilein1086includedsamples，B—globinwasassayedsimultaneouslyforabsolutequantizationofgenomicDNAwithanaveragelevelof3．71E+6IU／m1．Allpositiveresultswereobtainedbothinrandomrepeata

6、bilitytestandrepeatabilitytestforeachtypeswimvousconcentrations．withatypecoincidencerateof100％．HPVDNAwasdetectedin287outof1086samples．ThegenotypedistributionswereHPV16(16％)，HPV18／45(6％)，HPV31(5％)，HPV33／52／58／67(51％)and64samplesweredetectedasco—infectedHPV(22％)．Theabsolutequantitative

7、valuedistributionpresentedasnormaldistribution．ConclusionThemulti—channelReal—TimefluorescencequantitativePCRassayissensitiveand收稿日期：2013—01—23作者简介：赵旭鸿(1975一)，女，主管检验医师，硕士．E—mail：xuhongzhao@yahoo．com·3l·同济大学学报(医学版)第34卷repeatableindetectionofHPVDNA，whichcanbeusedfordetectionofHPVinfect

8、ioninclinica