通塞脉微丸及中间体中总黄酮含量的紫外分光光度法测定论文

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1、通塞脉微丸及中间体中总黄酮含量的紫外分光光度法测定论文李伟东,狄留庆,姚海峰,蔡宝昌【摘要】目的测定通塞脉微丸及中间体中总黄酮的含量。方法采用紫外分光光度法。结果选择甘草苷为标准品,标准曲线方程为:A=24.667C-0.03446(r=0.9999),通塞脉微丸总黄酮的含量范围在17%~21%之间;通塞脉微丸中间体总黄酮的含量范围在27%~29%之间。平均加样回收率为99.44%(n=6),RSD为0.97%。结论该方法操作简便,结果可靠.freelinethecontentofgeneralflavonesinTo

2、ngsaimaipelletsanditsintermediateproducts.MethodsUltravioletspectroscopicmethodountrangeofgeneralflavonesinTongsaimaiPelletsountrangeofgeneralflavonesinTongsaimaiPelletsintermediateproductsethodisconvenient,rapidandaccurate.Itcanbeusedforqulitycontrolinproductio

3、nofTongsaimaipellets.Keyaipellets;TongsaimaiPelletsintermediateproducts;Generalflavones;Ultravioletspectroscopicmethod通塞脉微丸是以黄芪、当归、金银花、玄参、甘草等6味药材精制而成的复方制剂,是以缺血性脑中风为主治病症的新型中药制剂,具有清热养阴、活血化瘀的功效[1]。通塞脉微丸组方中各单味药的化学成分研究表明,其主要含有黄酮类、皂苷类、有机酸类等成分,这几类成分群对心脑血管疾病均有较好的治疗和保护作用

4、。为了考察有效成分群的含量,本文对总黄酮含量进行了定量分析,为通塞脉微丸有效部位群的质量控制提供依据。1仪器与材料1.1仪器TU-1800S紫外可见分光光度计(北京普析通用仪器有限公司);HH-6数显恒温水浴锅(江苏省金坛市荣华仪器制造有限公司);KQ-500E型超声波清洗器(昆山市超声波仪器有限公司)。1.2试剂与药品95%乙醇(医用酒精,南京白敬宇实业公司);亚硝酸钠,硝酸铝,氢氧化钠,甲醇、乙醇、醋酸乙酯(均为AR级,上海久亿化学试剂有限公司);甘草苷(自制),经HPLC面积归一化测定含量大于98%;通塞脉微丸(

5、南京中医药大学中医药研究院制剂研究室提供,批号:031006,031016,031025,031103,031108);通塞脉微丸中间体(自制,批号:041104,041106,041108)。2方法与结果2.1实验溶液的制备[2]2.1.1对照品溶液的制备精密称取甘草苷标准品7.68mg,置25ml容量瓶中,加60%乙醇溶解并定容(c=0.3072mg/ml)。2.1.2供试品溶液的制备①精密称取微丸约30mg,置25ml容量瓶中,加60%乙醇溶解并定容,取3ml样品溶液进行测定;②精密称取微丸中间体约30mg,置2

6、5ml容量瓶中,加60%乙醇溶解并定容,取1ml样品溶液进行测定;③取黄芪、金银花、甘草适量,分别置10ml容量瓶中,加60%乙醇溶解并定容,取1ml样品溶液进行测定。2.1.3空白液制备取10ml容量瓶,加入5%亚硝酸钠溶液和10%硝酸铝溶液各0.3ml,摇匀,放置6min后,加4%氢氧化钠溶液4ml,用60%乙醇定容至10ml,备用。2.2测定波长的确定及样品测定吸取对照品溶液、供试品溶液、空白对照溶液分别加入5%亚硝酸钠和10%硝酸铝各0.3ml,摇匀,放置6min,分别加入4%氢氧化钠4ml,用60%乙醇加至1

7、0ml,摇匀,放置12min,置1cm比色杯中,于200~800nm范围内测定吸收光谱。结果见图1~2。结果表明,以甘草苷为对照品测定总黄酮的含量,最大吸收波长宜选择410nm。2.3标准曲线测定分别吸取对照品溶液0,0.5,1.0,2.0,3.0,5.0ml于10ml容量瓶中,加入5%亚硝酸钠和10%硝酸铝各0.3ml,摇匀,放置6min,分别加入4%氢氧化钠4ml,用60%乙醇加至刻度,摇匀,放置12min,以空白作对照,置1cm比色杯中,于410nm处测定吸收度,并以吸光值A为纵坐标,浓度C为横坐标绘制标准曲线。

8、标准曲线回归方程为:A=24.667C-0.03446,r=0.9999。2.4精密度实验将对照品重复测定6次。结果平均浓度为0.0303mg/ml,RSD为0.14%。2.5重复性实验按供试品测定方法,取同一批样品约10mg重复测定6份,结果样品中总黄酮平均含量为21.69%,RSD为1.08%。2.6稳定性实验取供试品溶液显色

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