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时间:2018-11-29
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1、外燥对小鼠气道与大肠功能影响的实验研究【摘要】 目的观察外燥对小鼠气道与大肠功能的影响。方法120只无特定病原体级(SPF)昆明种小鼠随机分为常温常湿组,常温燥组,温燥组,凉燥组,每组30只。于处理后第6,12,18天检测各组气道液黏多糖(RS)、大肠液黏多糖(CS)与粪便含水率(ucusSecretionofRespiratoryandColonsofMiceinOuter-Dry HULi?qun,DINGJian?zhong,ZHANGLiu?tong,ing?ming,HEShang?rong (1.MedicalShoolofYangtzeUniversity,Jingz
2、hou434023,China;2.HubeiCollegeofTraditionalChineseMedicine,ethods120kunmingmice(SPF)al),groupB(normaltemperatureandOuter-Dry),groupC(ASTER-K30H,韩国),紫外分光光度计(FD-TP40,上海),普通烤箱(上海)。主要试剂:咔唑(054K078,Sigam)、D-葡萄糖醛酸内酯(2711EC,Sigam)、四硼酸钠(上海),其余试剂均为分析纯。 2方法 2.1120只昆明种小鼠随机分为常温常湿组、常温燥组、温燥组、凉燥组,每组30只,分批置人工气
3、候箱内常规饲养,按文献方法模拟外燥温度-相对湿度-风综合刺激进行造模。各组小鼠在第6天、12天和第18天分别检测各项目,小鼠实验前4h常规禁食、禁水。职称论文 2.2气道液黏多糖测定(RS)咔唑比色法[3]。标本:断颈处死小鼠并暴露气管,从喉头处常规气管插管,缓慢推注37℃预温的生理盐水1ml,回抽此液,重复2次,离心取上清液当天检测RS。每份标本测定2个稀释度,取均值。用3mmol/L氯化钠稀释D-葡萄糖醛酸内酯储存液成25~300μg/ml并制作工作曲线(n=9,r=0.8867)。 2.3大肠液黏多糖测定(CS)咔唑比色法。断颈处死小鼠后剖腹,从内直肠处向上剪取结肠6cm
4、并剖开,连同肠内粪便置5ml生理盐水中搅匀,离心取上清液当天检测CS。 2.4剖取结肠粪便含水率测定(g)-剖便干重(mg)]/剖便湿重(mg)100% 2.5统计学处理实验数据以±s表示,采用SPSS13.0软件,资料之间比较用ANOVA分析,显著性检验用多个样本均数间q检验(Nean-Keuls法),检验水准为双侧a=0.05。 3结果 3.1小鼠一般情况随着处理时间的延长,温燥组、凉燥组小鼠饮水量比常温常湿组增加,第12天两组动物活动度下降,毛色较粗糙,温燥组粪便较干燥。处理期间各组动物无死亡。 3.2外燥对小鼠气道液黏多糖(RS)的影响结果见表1。表1外燥
5、对小鼠气道液RS的影响(略) 3.3外燥对小鼠大肠黏多糖(CS)与剖便含水率的影响结果见表2。表2外燥对小鼠大肠液黏多糖(CS)与剖便含水率的影响(略) 4讨论 表1结果显示,与常温常湿组比较,第6天时与燥相关3个组RS均升高。常温燥组第12、第18天时RS升高,提示与保护性反馈有关。值得注意的是,温燥组第6天RS略升高,但第12、第18天呈下降趋势;凉燥组则是第6天略升高,第12天最低(P<0.05),第18天再升高。 常温常湿组CS第6、第12与第18天呈增高趋势。常温燥组第6天CS增高(P<0.01),但随后则降低。温燥组则为升高-再升高-降低,凉燥组也呈同样趋
6、势,温燥组、凉燥组第18天CS下降最为显著(P<0.05)。第6、第12天常温常湿组的WF保持稳定,常温燥组、温燥组第6天WF略升高,凉燥组则下降,但第12天则升高;与凉燥组相比,常温燥组、温燥组第12天WF下降(P<0.05)。课题组前期研究中发现,温燥组第7、第14天气道液RS连续下降。为了进一步观察其变化特点,本次采用第6、第12、第18天动态观察外燥对小鼠气道液RS的影响,在温燥组中再次呈现升高-降低-再降低、凉燥组升高-降低-再升高的前期研究结果[1,2]。 结肠能分泌碱性的黏液以润滑黏膜,其主要功能是吸收水分,储存和排泄粪便,也能吸收葡萄糖、无机盐和部分胆汁酸等
7、。与燥相关的三个组大肠液黏多糖含量是先升高、后下降,第18天温燥组、凉燥组显著降低。我们注意到,温燥组第6天RS升高时,CS也升高;第18天RS下降时,CS也同为下降,提示外燥致肺津生成不足时,也致肺肃降之功能障碍。凉燥组第6天RS与CS均增加,第12天RS下降最为明显,但第18天RS增高之时,CS则下降,其WF也增加,提示凉燥之邪同样可伤肺津生成与肃降功能,其机理与温燥有异[4],并影响大肠分清泌浊之功。(责任编辑:编辑04)
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