外燥对小鼠气管、肺与皮肤影响的病理学研究论文

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1、外燥对小鼠气管、肺与皮肤影响的病理学研究论文丁建中,张六通,陈刚,邱幸凡,龚权,李侃,张渊【关键词】外燥;,,气管;,,肺;,,,皮肤摘要:目的观察外燥对小鼠气管、肺与皮肤组织的影响。方法40只无特定病原体(SPF)级昆明种小鼠随机分为4组:常温常湿组(A组),常温燥组(B组).freelingmice(SPF)almice),groupB(NormaltemperatureandOuterDrymice),groupC(340E,德国),显微镜(Laica,德国),病理图像分析系统(HPIAS1000,华

2、中科技大学同济医学院提供)。10%甲醛、HE染料(上海精细化工科技有限公司,批号050816,分析纯)。1.3方法1.3.1动物分组及饲养40只昆明种小鼠随机分为4组:常温常湿组、常温燥组、温燥组与凉燥组,每组10只,置人工气候箱内,用昆明种小鼠颗粒饲料常规饲养(箱内24h照明条件:照明14h与关灯10h交替进行)。1.3.2“温度湿度风”条件根据气象学上以平均气温10~20℃为春、秋季节、“候平均气温”等为基础,按表1模拟外燥“温度-相对湿度风”综合条件刺激造模。各组第7天和第14天进行病理组织学观察。表

3、1各组小鼠“温度-相对湿度-风”处理条件(略)1.3.3病理组织学观察常规HE染色法[3]。各组小鼠检测前4h禁食、禁水。主要方法:断颈处死小鼠,常规取小鼠气管1.5cm,右肺组织(中)(40±10)mg/只、背部皮肤(0.5cm×0.5cm)与完整左足垫。待检组织置10%甲醛固定,梯度脱水,石腊切片(4μm),常规HE染色与光镜观察。2结果2.1气管与肺部结构观察常温常湿组第7天、第14天气管上皮结构完整、纤毛整齐,气管腺体、细支气管与肺泡未见异常。常温燥组第14天部分气管纤毛倒伏、粘连,肺泡轻度瘀血。温

4、燥组第14天气管上皮鳞状化生、气管纤毛片状缺损明显,气管黏膜炎性细胞浸润,肺泡瘀血、水肿,肺泡间隔增宽,且均比第7天严重,≥40%气管浆液腺上皮黏液腺化生。凉燥组第14天气管上皮鳞状化生,气管纤毛多呈灶状缺损,≤20%气管浆液腺上皮黏液腺化生,肺部瘀血、水肿明显,也较第7天严重。2.2皮肤结构观察常温常湿组第14天背部皮肤结构完整,毛球数多,新生毛干数丰富且层次清晰,足垫皮肤汗腺丰富;凉燥组背部皮肤未见异常,但温燥组第14天背部表皮呈不规则皱缩,毛囊变短,毛乳头数明显减少与皮下脂肪层增厚;同期温燥组与凉燥组

5、足垫表皮增厚,汗腺明显减少与皮下结缔组织增生。3讨论3.1气象学中用“候平均气温”并结合物候的方法,以平均气温10~20℃为春、秋季节,以“季平均温度”、以10月份的平均气温为秋季温度。华北地区南从北纬32°,北至北纬42°左右,为半湿润地区,具有明显的大陆性[4]。气象学中按热量和水分标准将中国划分为九个气候带,全国秋温与春温差别大致以秦岭淮河一带为界。为避免以西部极端干燥地区之温度与湿度条件为基础的实验结果带来的普遍性意义不足的缺陷,本课题以地处华北地区的郑州秋季之平均温度和相对湿度(该地区10月份平均

6、气温为11.8℃,平均相对湿度与最小相对湿度分别为66%和4%)诸值的中间值模拟秋燥之“温度-湿度”量化空间指标。为表达秋令萧瑟之特点,故设立人工外燥环境风速为2.5m/s、每天处理5h。对小鼠进行7~14d连续处理,以模拟秋气变为有碍正常生理功能或造成病理反应的病理过程,是对“清气大来,燥之胜也”之经典理论的初次探索。选用昆明种小鼠为研究对象,一是该品系小鼠对温度与湿度均较敏感,二是受到人工气候箱有效使用空间的限制,选用小鼠则可按实验批次的需要,成批饲养用以研究并减少组间误差。3.2六淫致病与气候异常、机

7、体生理状态和环境中有害物质相关。燥邪清冷肃降,肃杀收引,而肺属金,与秋气相通,故“燥在上,必乘肺经”。尽管常温燥组第14天病变不明显,但温燥组第14天气管上皮出现鳞状化生与炎性细胞浸润、纤毛多呈片状缺损,可致气管“纤毛-黏液毯”局部防御屏障功能受损[5],加之肺部充血、水肿,提示温燥伤肺、伤津,肺失其濡养而致组织细胞功能受损、甚至形态结构的改变[6];该组≥40%气管浆液腺上皮黏液腺化生,从组织学上表明与温燥致气道分泌功能(肺津生成)障碍相关。凉燥组第14天气管上皮纤毛多呈散灶状缺损、气管黏膜炎性细胞浸润较

8、温燥组轻,≤20%气管浆液腺上皮黏液腺化生,但肺部淤血、水肿明显,提示凉燥伤肺,且凉燥之邪的凉气可伤肺阳而致肺津不化、凝聚成痰饮,似可解释临床凉燥者多伴咳嗽稀痰之证。3.3“肺主皮毛”。肺气宣发则津液得以输布,脏腑得其濡养而活,皮毛肌腠得润而泽,腠理固密、护卫御邪,司汗液排泄以维持体温之恒定,谓之“水精四布,五经并行。”(《素问至真要大论》)皮肤是人体内主要贮水库(主要贮于真皮内,构成皮肤生理活动的重要内环境,如

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