桑杏汤对温燥小鼠血清与呼吸道抗体的影响

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1、桑杏汤对温燥小鼠血清与呼吸道抗体的影响丁建中，龚权，张六通，邱幸凡，陈刚，朱慧玲，张渊【关键词】外燥；,,桑杏汤；,,血清；,,呼吸道；,,抗体　　摘要：目的观察桑杏汤对温燥小鼠血清IgG（IgGS）、呼吸道液IgG(IgGR)与呼吸道黏多糖（RS）的影响。方法54只SPF级昆明小鼠随机分为常温常湿组（A组）、温燥对照组（B组）和温燥治疗组（C组），每组18只。药物处理后第5天检测IgGS，IgGR，RS（μg/ml）与脾脏及胸腺平均重量（mg）。结果B组IgGR（2.30±0.32）明显低于A组（5.68±0.64，P0.01），C组R

2、S、IgGS明显高于A组，且该组IgGR接近A组，但胸腺平均重量低于其它二组（P＜0.01）。结论温燥可致小鼠气道IgGR降低而抵抗力下降；桑杏汤主要作用机理是促进肺津生成而润燥，加之增加气道IgGR，共同增强气道御邪能力。结果还为中药药物归经理论提供实验证据。　　关键词：外燥；桑杏汤；血清；呼吸道；抗体　　Abstract：ObjectiveToinvestigatetheeffectsonIgGinSerum(IgGS)andrespiratory(IgGR)andmucus(RS)andus(mg)inASTERK30H,韩国），低

3、温冰箱（VXE380，85℃,法国），酶标检测仪（KHBST360,上海），分析天平（MonoBiocAB304S,瑞士）。IgGELISA试剂盒（华美生物工程公司，批号：200501）。主要试剂：咔唑（Singam）、D葡萄糖醛酸内酯（Singam）、四硼酸钠（上海），其余试剂均为A.R。　　1.2实验动物SPF级昆明小鼠54只，体重(18±1)g，雌雄各半，湖北省实验动物研究中心提供，许可证号：SCXK（鄂）20032005。　　1.3实验药物桑杏汤（《温病条辨》）组方：桑叶9g，杏仁9g，沙参15g，象贝母12g，香豉6g，栀子皮1

4、2g，梨皮12g。生药由湖北省荆州中药材公司提供。取1剂，加3倍水浸泡2h后微火煎至100ml，重复3次，将3次煎液过滤并混匀，水浴浓缩至200ml，其生药量为364g/L。按临床成人剂量计算，C组动物按0.009g・kg1・d1生药量给予灌胃处理，1次/d，连用5d。A组与B组用无菌生理盐水代替药物。　　1.4方法　　1.4.1实验动物在实验室常规饲养7d后随机分为3组：常温常湿组（A组）、温燥对照组（B组）、温燥治疗组（C组），每组18只，置人工气候箱内常规饲养，按表1“温度－相对湿度－风”条件综合刺激进行造模。第7天进行药物治疗。表

5、1各组小鼠“温度相对湿度风”处理条件（略）　　1.4.2呼吸道液黏多糖测定（RS,μg/ml）：咔唑比色法〔2〕。药物处理后第5天、各组小鼠在剖杀前4h禁食、禁水。断颈处死小鼠并暴露气管，从喉头处行气管插管，缓慢推注37℃预温的无菌生理盐水1ml，回抽此液并重复2次，离心取上清液检测RS。每份标本分为2个稀释度，每个稀释度测定2次,取均值。用3mmol/L氯化钠稀释D葡萄糖醛酸内酯为25~300μg/ml并制作工作曲线（n=8,r=0.8992）。　　1.4.3血清IgG检测（IgGS）：ELISA方法〔3〕。药物处理后第5天、各组小鼠在

6、处死前4h禁食、禁水。常规眼球取血并分离血清、置65℃备检。每份标本重复测定2次，取均值。以包被液作空白对照，PBSpH7.4（10%小牛血清）作阴性对照。记录标本均值与阴性对照（P/N）倍数之平均值。　　1.4.4呼吸道液IgG检测（IgGR）:各组标本获取方式同RS测定，用ELISA方法〔3〕。　　1.4.5小鼠脾脏与胸腺平均重量检测（均重，mg）：由专人常规剖取实验小鼠脾脏与胸腺后，立即经1/万分析天平重复称重3次，取均值。　　1.4.6统计学处理：实验数据以±s表示，采用SSPS13.0软件，资料之间比较用ANOVA分析，显著性检

7、验采用多个样本均数间q检验（NeanKeuls法），P0.05认为差异有统计学意义，检验水准为双侧α=0.05。　　2结果　　2.1小鼠一般情况：温燥组、凉燥组动物在造模处理后2~3d饮水量增加、饮食减少；活动度明显下降，喜欢群聚、多睡，毛色粗糙，血液黏稠，温燥组动物排出的粪便明显干燥。　　2.2桑杏汤对温燥小鼠RS、IgGS、IgGR和对脾脏与胸腺的影响结果见表2。表2桑杏汤对温燥小鼠RS，IgGS，IgGR与脾脏与胸腺的影响（略）　　3讨论　　根据气象学“候平均气温”，以平均气温10~20℃为春、秋季节，用“季平均温度”（指各季中间所

8、在月分的月平均气温代表各季的气温）、以10月的平均气温为秋季的温度，课题组提出以平均气温15℃和相对湿度70%±2%为常温常湿气候，（22±2）℃为温燥气候，取相对湿度33%±2%模拟秋季干燥