鲎素的抗菌作用

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1、鲎素的抗菌作用陈小芳，汪亚君，丁航，张海涛【摘要】　　目的利用从鲎试剂生产废料中提取出的鲎素，了解鲎素对大肠杆菌、痢疾杆菌、绿脓杆菌的抑菌作用。方法用酸处理和SephdexG-50凝胶层析法从鲎试剂生产废料中提取分子量约为3KD的鲎素，然后把鲎素加入菌液培养，24h后测定结果。结果鲎素能显著抑制大肠杆菌、痢疾杆菌、绿脓杆菌的生长，其24h最小有效抗菌浓度分别为：0.23，0.23，1.88μg/ml。结论鲎素具有抗菌作用，可作为新一代的抗菌药物进行开发研究。【关键词】鲎素抗菌作用　　Abstract：Objective

2、Todetecttheantibacterialactivityoftachyplesin,theaterialoftachypleusamebocytelysate(TAL).MethodsTachyplesinfromtheaterialofTALentandSephdexG-50gelchromatography.TheEscherichiacdi,ShigelladysenteriaeandPseudomonasaeruginosaonasaeruginosa.Theminimuminhibitionconce

3、ntrationonEscherichiacdi,ShigelladysenteriaeandPseudomonasaeruginosal,0.23μg/mland1.88μg/mlin24hours,respectively.ConclusionTachyplesincaninhibitthegros,anditmightbeanel，分别加入大肠杆菌、痢疾杆菌、绿脓杆菌各5ml，37℃200r/min培养过夜，然后各取10μl过夜菌液加入1mlLB液体培养基，混匀，再各取50μl稀释菌液，加入1450μlLB液体培

4、养基，即为终稀释菌液。　　取浓度为800μg/ml的鲎素，稀释如下浓度(μg/ml)：　　A1A2A3A4A5A6A7A8　　02.3444.6889.37518.7537.575150　　取96孔板每孔加入终稀释菌液90μl和鲎素10μl，则鲎素终浓度为（μg/ml）：　　A1A2A3A4A5A6A7A8　　00.230.470.941.883.757.515　　用酶标仪测定。　　3结果与讨论　　结果见表1。　　表1鲎素对各种细菌的抗菌效果（略）　　n=3　　抗菌肽是动物体内诱导产生的，广泛存在于生物界中的一类生物活

5、性肽，一般具有抗细菌或真菌的作用，有些还具有抗原虫、抗病毒或肿瘤细胞的功能〔2～3〕。长期以来，国际上对抗菌肽的研究主要集中在高等动物和一些低等昆虫方面，海洋抗菌肽研究是近10年来发展起来的又一个热点，而鲎是一类珍贵的海洋药用动物。目前人们已从鲎血中分离得到多种抗菌肽，鲎素抗菌肽是存在于鲎细胞的小颗粒中的一族小分子多肽，由17～18个氨基酸组成相对分子量约为2.3KD〔4〕。　　本实验室采用酸提取法和sephdexG-50凝胶层析从鲎试剂生产丢弃的细胞膜中分离提纯出的鲎抗菌肽粗提物经电泳分析结果显示分子量为3KD左右，

6、具有很好的抗菌作用，能明显抑制大肠杆菌、痢疾杆菌、绿脓杆菌，其24h最低有效抗菌浓度分别约为0.23，0.23，1.88μg/ml。在抗生素大量使用甚至滥用的今天，细菌对抗生素产生的广泛耐药性，因而寻找和开发新一代的抗菌药物是当今的热点。由于鲎抗菌肽作用的主要机制是破坏膜结构的完整性，造成细胞膜内容物的泄漏，最终导致细胞死亡，这就使细胞不易对鲎抗菌肽产生耐药，其还具有分子量小，热稳定，水溶性好，抗菌活性强，体内无残留等明显优点，因此，有可能成为替代抗生素的药物。　　本研究为大规模从鲎试剂生产废料中分离提纯鲎抗菌肽及其进

7、一步开发成新的安全无毒副作用的抗生素提供了参考。【