同种异体组织工程复合皮肤移植修复大鼠皮肤缺损论文

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1、同种异体组织工程复合皮肤移植修复大鼠皮肤缺损论文.freelmunorejectionAbstract:AIMToobservetheimmunogenicityandbioac-tivityoftissueengineeringskinandtodetermineitspossibili-tyonclinic.METHODSThetissueengineeringskinaterialsfromneonatalSDratsentsandhistologicaldeterminations.RESULTSTheallograftskinshoa公司,PBS溶液(0.01mmolL-1).1.2

2、方法1.2.1表皮角朊细胞的分离培养无菌条件下取SD新生仔鼠背部皮肤,去除皮下组织,用含抗生素的PBS冲洗,将标本切成规则的细条状,置于2.5gL-1胰酶中4℃过夜,仔细将表皮与真皮分离,分别放置不同的平皿中.将表皮放入含培养液的离心管中反复吹打,收集分离的细胞悬液,台盼蓝染色法行活细胞计数,用FAD培养液以1×105~1×106cm-2的密度接种.待细胞长满后,用trypsin(2.5gL-1)∶EDTA(1gL-1)=1∶1消化传代.1.2.2真皮成纤维细胞的培养将前述分离的真皮放入含新鲜培养液的离心管中,反复吹打,收集分离的细胞悬液,台盼蓝染色法行活细胞计数,用DMEM培养液以密度1×1

3、05~1×106cm-2的接种.细胞长满后,用trypsin(2.5gL-1)消化传代.1.2.3组织工程皮肤的构建将密度为1.5×109L-1的真皮成纤维细胞液与自小牛皮提取的Ⅰ型胶原混合,37℃孵育凝固后,加入培养液培养过夜;次日又在其表面接种密度为1×108L-1的角朊细胞,继续培养至细胞汇集成片,将复合了细胞的胶原升至气液面进行器官培养,培养1~2gkg-1,ip)麻醉大鼠,后在其背部切取全层皮作圆形创面,直径3cm,以供皮肤移植.实验共分为3组:自体移植组:SD大鼠15只,做自体皮片回植,取全层皮片,仔细去除皮下组织并回植于创面,7-0缝合,加压包扎,作为阴性对照,以排除手术操作技术

4、和术后皮片感染、移动等人为因素致皮片坏死的可能性;异体移植组:以SD大鼠为供皮鼠,ilMedUniv),2000;21(10):1185-1188.[3]JiangDY,ChenB,SuYY,HuDH,JiaCY.Preparationandexperimentalstudyofallogeneicacellulardermalmatrixforpositeskingrafting[J].Di-siJunyiDaxueXuebao(JFourthMilMedUniv),1999;20(5):375-378.[4]PhillipsTJ.Neatol,1998;134(3):344-349.[5]

5、LammeEN,Leealsubstituteinexperimentalatol,1998;111(6):989-995.[6]BlackAF,BerthodF,L’heureuxN,GermainL,AugerFA.Invitroreconstructionofahumancapillarylike-workintissueengineeringskinequivalent[J].FASEBJ,1998;12(13):1331-1340.

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