hbv基因分型与病毒载量及血清标志物关系的探讨

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1、HBV基因分型与病毒载量及血清标志物关系的探讨曹军皓，赵冰红，叶彬，黄前川【摘要】　　目的探讨HBV基因型与HBVDNA水平及血清标志物的相关性。方法选择125例乙肝患者血清HBVDNA复制阳性的标本分别检测HBV病毒基因分型、HBVDNA、乙肝血清标志物、谷丙转氨酶(ALT)和总胆红素(TBL)。结果125例HBVDNA复制阳性标本中HBV基因分型以B型为主占71.2%（89/125），C型占24.0%（30/125），BC混合型占2.4%（3/125），非B非C型占2.4%（3/125）；B基因型患者血清ALT（297.3±193.

2、6）U/L和TBL（105.1±59.7）mol/L水平高于C基因型患者ALT（158.1±107.5）U/L和TBL（53.1±22.7）mol/L，P0.01；B基因型患者血清抗HBe阳性率91.0%(81/89)显著高于C基因型的23.3%(7/30)，P0.01；B型HBVDNA水平(5.87±1.72)log10copies/mL与C型(6.01±1.91)log10copies/mL无差异（P>0.05）。结论本地区HBV病毒基因型以B型为主，C型次之，B基因型对肝脏损害较C基因型重，并与HBV载量及HBeAg系统具有相关

3、性，B基因型易发生YMDD突变。【关键词】基因分型；HBVDNA；HBeAg/HBeAb；血清标志物Abstract:ObjectiveTostudytherelationshipsamongHBVgenotype,levelofserumHBVDNAandHBVmarkersinpatientssamples125HBVDNApositivepatientsandHBVgenotyping,HBVDNA，ALT,TBLandHBVserummarkersixedgenotype(B+C)，and2.4%（3/125）inantHBVg

4、enotypeinthelocalareaisgenotypeB.paredpairliverandisliabletoinduceYMDDmutant,in，离心10min，及时分离血清冻存于－40℃冰箱中待检测。　　1.2方法　　1.2.1HBV血清学分型　　采用荧光PCR法，试剂盒由上海复星公司提供，按说明书处理标本及配制反应体系后分别加入B型、C型荧光探针，PCR扩增程序为：50℃，2min→94℃，5min→（93℃，15s→60℃，45s）循环40次，以Ct值判断乙型肝炎病毒的基因型（表1）。表1乙型肝炎病毒的基因型结果判断标准（略

5、）　　1.2.2HBVM血清标志物的检测　　采用ELISA法检测，试剂购自上海科华生物技术有限公司，按说明书操作。　　1.2.3ALT、TBL的检测　　使用美国生产BeckmanCoulterUnicelD×C8000全自动分析仪测定，试剂由上海复星长征医学科学有限公司提供。　　1.2.4HBV血清YMDD突变检测　　采用荧光PCR法，试剂盒由上海复星公司提供，按说明书处理标本及配制反应体系后分别加入C、V、I荧光探针，各代表着YMDD野生株、YVDD突变、YIDD突变，PCR扩增程序为：50℃，2min→94℃，5min→（94℃，20s→

6、53℃，30s）循环40次，以Ct值判断YMDD的突变类型（表2）。表2YMDD突变结果判断标准（略）　　1.2.5统计方法　　组间比较采用方差分析或t检验，P0.05具有统计学意义。　　2结果　　2.1HBV基因分型结果125例标本中HBV基因分型以B型为主，占71.2%（89/125），C型占24.0%（30/125），BC混合型占2.4%（3/125），非B非C型占2.4%（3/125），因BC混合型和非B非C型各仅3例，只将B型和C型病例进行比较研究。　　2.2HBV基因型临床资料比较B基因型血清ALT、TBL水平，HBeAg和HBeA

7、b阳性率与C基因型存在显著差异（P0.01），HBVDNA水平差异不显著（P>0.05），见表3。表3HBV基因型临床资料（略）　　2.3B基因型HBVDNA水平与HBeAg系统、TBL、ALT的相关性66例高复制组（5.0～8.0log10copies/mL）与23例低复制组（3.0～5.0log10copies/mL）HBeAg系统、TBL、ALT存在显著差异（P0.01），见表4。表4B基因型HBVDNA水平与HBeAg系统、TBL、ALT的相关性（略）　　2.4B基因型HBVDNA水平与YMDD突变66例B基因型高复制组中

8、YMDD突变率为90.5%，23例低复制组中YMDD突变率为13.0%，差异有统计学意义（P0.01），见表5。表5B基因型HBVDNA水平与YMD