预防猪繁殖与呼吸综合征病毒传播的生物安全规程.doc

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预防猪繁殖与呼吸综合征病毒传播的生物安全规程AndreaPitkin,BSMSSatoshiOtake,DVMPhDScottDee,DVMMSPhDDipACVM猪病根除中心明尼苏达大学动物医学院翻译：王冬朱连德 致谢美国猪病基金会明尼苏达农业快速反应基金猪病根除中心合作伙伴生猪发展公司Genetiporc勃林格殷格翰PharmacologicalSolutions,Inc.辉瑞动物保健NovartisAnimalHealthNovekoPipestoneVeterinaryClinicFairmontVeterinaryClinicCliniqueDemeterSwineVetCenter 目录标题概述……...………………………………...…...…………...……………………………4病毒总论……...………………………………...…………………………………………4传播途径和生物安全规程直接传播途径猪体及精子朱………………………………………………………………………………4间接传播途径设备……...…………………………………………...……………………………………5针头……...…………………………………………………………………………………6运输……...…………………………………………………………………………………6员工……...…………………………………………………………………………………7工作设备&工具……...…………………………………………………………………….8昆虫……...…………………………………………………………………………………9气溶胶……...………………………………………………………………………………9其他猪肉……...………………………………………………………………………………...11废水排放……...…………………………………………………………………………...11尸体处理……...…………………………………………………………………………...12结束语……...………………………………………………………………………………12参考文献……...……………………………………………………………………………12 概述猪繁殖与呼吸综合征是一种极具经济影响的猪病，据估计每年美国养猪业由此疫病造成的损失大约有5.6亿。防止PRRSV在猪群间及其内部传播是猪场疫病防控方案中的重要一环。为了达到控制病原传播的目的，这本手册向您提供了本研究小组在明尼苏达大学进行的相关试验研究的数据总括，设计试验的目的是为了确定PRSSV传播途径，通过完善生物安全规程从而降低病毒的威胁。在过去的两年里，我们一直在猪病根除中心（SDEC）生产区域的模型猪场里进行一项后续实验，在此过程中，所有的规程均已合法化，并将一直继续其合法化的进程。本手册的作者们每天不断地实践这些规程及操作；因此，我们对其控制PRSSV传播的能力极具信心。我们希望猪场兽医们能够应用这些信息帮助他们的客户对PRRS可持续防控的生物安全程序进行卓有成效地完善。病毒总论在讨论病毒是如何在猪场之间和种群之中进行传播之前，我们先要了解其宿主范围和生化特性，这是十分重要的。基于研究人员的出色工作，我们认识到PRRS的病原，猪繁殖与呼吸综合征病毒PRRSV是单股正链RNA病毒，属于套式病毒目，动脉炎病毒科，动脉炎病毒属。PRRSV是一种宿主特异性的病毒，仅能感染猪。因此，其它哺乳动物、昆虫或鸟类均不能作为此病毒的生物载体。若论PRRSV在猪体的外生存能力，对高温、pH值变化（<6及>7.65）、长时间暴露于紫外线下以及化学失活等处理均较为敏感。然而，PRRSV能在冷冻（-20℃）的状态下存活几个月甚至几年时间，随着温度升高，活性降低。例如，病毒在21℃下可存活6天，37℃为24小时而在56℃下仅能支持20分钟。而在湿润的条件下病毒活性能持续11天以上。传播途径及生物安全规程直接传播（生猪和精液）如上所述，猪是PRRSV感染的唯一宿主。一但发生感染，感染猪将通过血液、唾液、乳汁和初乳、尿液和粪便以及污染的精子持续性排毒。因此，对引种中购买的遗传物质进行常规检测是重中之重。我们认为，在交易之前，双方兽医通过当面交流对猪群的健康状况并进行检查，之后再对动物进行隔离检测的做法是值得大力推广的。以下事例是减少由引种导致PRRSV进入猪场的风险的操作规程：*隔离隔离圈舍是PRRSV生物安全程序中的重要组成部分。隔离舍应位于种畜圈舍120米之外，若和种畜舍分设两地最为理想。引进畜群合群之前，需隔离至少30天。猪场工作人员应每天监测动物的临床表现。在此期间，猪场兽医应与购进猪场兽医保持密切联系，以防种畜或隔离动物中疑似疾病的发生。*检测后备畜群未购进猪场，到达隔离圈舍24至48小时后及合群前5至7天前分别进行血样检测。感染发生24小时后，猪血液中能检出PRRSV的RNA；因此，对样品进行PCR检测来加强对过急性感染的监测。隔离晚期采集的样品也可用ELISA检测PRRSV抗体。通过采集血液拭子，AI中心能够通过对当天采自种公猪的血液进行PCR检测，连同对精子的常规PCR检测，主动地监测种猪的状态。由于诊断实验室拥有“一天见效 ”的PCR结果的能力，生产商和兽医们能够及时收到检测结果为PRRSV阴性的精液，并将其安全地引进到猪群中。进行血样检测的早期断奶后备母猪处于隔离中间接传播PRRSV能通过几种途径自动传播。接下来的部分，我们将对传播途径进行概述，并提出针对性地生物安全管理措施。圈舍猪场圈舍应遵循全进全出（AIAO）的管理模式，以此来降低PRRSV从感染大猪向阴性小猪传播的几率。除了AIAO流动模式，在引进易感动物之前对圈舍进行有效消毒也同样重要。对于圈养过PRRSV阳性动物的圈舍进行消毒的步骤要求如下：*彻底清除一切有机物（粪便、尿液、饲料、垫料和体液）并全力冲洗地面。我们应该特别注意门控、食槽、饮水嘴、地面金属条以及一切“狭缝或裂纹”，这些地方很可能藏有以上提到的污染物并可能被忽略。清扫秽物是进行畜舍有效清洁的重点*若要进行清洁，则整个圈舍区域应用有效的消毒剂进行处理。经证实，以下产品在清除PRRSV方面有效，即季铵与戊二醛混合物（Synergize）和改良的单过硫酸氢钾（Virkon）。使用浓度分别为0.8%和1%，持续最少2小时。利用起泡机进行消毒能够让消毒位置更易观察并可延长化学物质与消毒面接触的时间。 利用起泡机进行消毒能够增强消毒效果*清洁消毒过后，彻底停用并干燥圈舍。这在彻底灭活病毒的卫生规程中是至关重要。清洁良好的保育舍图示针头一但猪被感染，血液中PRRSV的数量将会达到一个很高的水平。因此，污染过的针头连续注射其它猪会造成病毒的血源性传播。为了降低传染风险，建议在妊娠期第三个月对母猪注射时更换针头或使用“无针注射”技术。运输车辆PRRSV能够通过接触污染的运输车辆感染易感动物。因此，与圈舍消毒一样，在对运输车辆中的拖车进行清洁时也应该严格遵守清洁/消毒和干燥的规程。用来苏儿等消毒剂对卡车（踏板、地垫等）进行喷雾消毒将有效消除病毒的潜在威胁。对拖车来说：清理一切有机污染物（粪便、尿液、饲料、垫料等）。“消毒盲点”位置需要重点注意，例如拖车的角落，门栓/锁链等可能藏有上述污物的地方。 受到污染的运输工具可作为PRRSV感染健康猪的传染源*清洁时应对车辆进行有效消毒，使用上述消毒剂的工作浓度、接触时间和使用方法。干燥是运输工具消毒过程中最重要的组成部分*清洁消毒后，一定要有充分的干燥时间，使车辆干燥。与畜舍消毒一样，干燥是彻底灭活病毒中至关重要的步骤。大功率暖风能够减少干燥时间。我们推荐在干燥拖车时使用由PIC公司改进过的热辅助干燥净化（TADD）系统，这样能将干燥时间缩至最短。研究表明以TADD方法使用大功率暖空气干燥120分钟能够有效地从运输拖车的污染面上清除PRRSV。员工员工的手、连体工作服和胶靴都能够成为传播PRRSV的工具。以下是降低PRRSV以这些途径进行传播的风险的规程：入场规程*员工隔离在进入猪场之前，工作人员必须经过一晚上的隔离驯化适应。研究表明没有必要为此病原延长驯化时间。*进出淋浴经证实，淋浴规程能够在进场前成功防止PRRSV通过工作人员传播。因此 建议每天进场前都进行淋浴。*丹尼斯进入系统此系统应用的措施有：在进入动物饲养环境前应更换连体工作服和胶靴，并在指定位置洗手；经证实，此系统能够非常有效地降低工作人员在猪场和建筑之间传播PPRRSV的风险。手*手套使用手套能够防止病毒传播。应勤换手套，如在不同窝次之间。*消毒剂及洗手使用含碘的消毒剂洗手能成功清除手上的病毒。连体工作服*连体工作服所有圈舍都应备有猪场专用的连体工作服，且需定时洗涤。使用一次性工作服也是一种选择。胶靴*濯足濯足能够极大地降低PRRSV在猪群中传播的威胁。消毒足池应至少做到每天换水，且应保持消毒剂的效果。含氯漂白剂、季铵与戊二醛混合物（Synergize）和改良的单过硫酸氢钾（Virkon）消毒剂均能有效灭活病毒。应使用一次性或圈舍专用的胶靴。胶靴不能离场，且应仔细清洗去除鞋底的粪便，并定时消毒。工作设备&工具污染设备，如猪场电机和饲料罐均能作为传播PRRSV的工具。因此，所有进场电机在引进之前都应消毒，最少2小时。“双袋装”发电机是一项降低传播风险的可用方法。应使用专用房间作为污染物消毒和干燥的房间（D&D）。在进场前将所有新买电机都置于此处，对机器的各个面进行消毒，时间最少为2小时。消毒时可以使用冷雾喷雾器将消毒剂以“雾状”喷洒在消毒面上。在消毒剂接触后，接触时间不能少于5分钟，应将污染物旋转后将雾状消毒剂喷洒在其底部，至少5分钟后在屋中放置时间不得少于2小时。在消毒时分别将季铵与戊二醛混合物（Synergize）和改良的单过硫酸氢钾（Virkon）消毒剂稀释至0.8%和1%再使用。在指定D&D室中用气溶胶消毒剂对购入电机进行消毒 昆虫家蝇和蚊均为PRRSV传播的载体，从感染猪场携带的病毒的传播距离至少为2.4公里。病毒在蝇体的胃肠道内滞留，病毒的衰减期受到吸入量和环境温度的影响。为了防止PRRSV以昆虫途径进行传播，我们建议使用下列措施：*防虫网应将昆虫可以进入的所有进气口、窗户和区域都用防虫网覆盖。为了保持良好的换气，防虫网应定时清洗。经证实，在边墙入口装上防虫网可有效减少昆虫进入*杀虫剂除虫菊酯类杀虫剂极为有效，能买到喷雾剂或洗液的产品。*粘虫板使用Quik-Stike的粘虫条是控制昆虫数量的有效方法。*厂区管理为了减少昆虫繁殖地，我们建议除去圈舍周围的杂草和死水。气溶胶PRRSV的气溶胶扩散表现为毒株特异性。新出现的PRRSV高致病性分离株，如MN-184和1-18-2，比早期PRRSV株，以气溶胶形式进行长距离传播的能力增强。最近研究表明，PRRSV能以气溶胶形式跨越120米进行感染。然而，实验研究的初步结果以及临床报道显示PRRSV的气溶胶传播距离至少能达到3.3公里（2英里）或更远（Deeetal,文章在整理之中）。因此，由于气溶胶传播具有分离株适应性，应制定相关生物安全规程尽最大努力提供可支持的疾病控制。为了降低PRRSV气溶胶传播的风险，在猪舍中应用的过滤系统应运而生。这些早期系统使用的是MERV16（95%DOP@≥0.3微米）滤膜，在过去的2到3年里的使用效果令人鼓舞。安装空气过滤系统要考虑生产商个人的预算、场址（高密度或低密度养猪）、可承受风险水平和生产系统种类（种猪或商品猪）等。滤膜的安装方法可由二选一，或插在屋顶通风口中，或以滤器组的形式安装在冷却电池板前面。 左.单个MERV16滤器右.6个MERV16滤器的滤器组如果过滤系统安装在使用负压通风的楼内，楼中一切有可能通风的区域都需要密封。这些地方包括楼内的裂缝、门窗四周的缝隙、以及百叶窗和闲置风扇。除此之外，“双开门”进/出系统必须安装过滤系统以防被污染的空气通过高危通道进入动物饲养区，例如员工通道、活/死动物卸载室以及D&D室等。双开门系统的使用规程包括房间使用和特定步骤：*房间必须通过一扇外门和一扇内门与动物饲养区相连。当员工和生猪从外面进来时，外门打开、人猪进入房间并将门关上。而从楼内通过内门进入房间时使用同样的步骤。双门房间的外观*此房间还必须安装排风扇以保证在一定时限内净化室中空气，例如1至5分钟，依房间大小而定。为了排除污染空气，“清洁”的空气将通过装有挡板的通风口由圈舍内的前厅或动物饲养区抽入室内。一旦人畜进入，两扇门将关闭，排风扇将开启并按照设定好的时限开始工作。 室内排风扇的外观*一旦换气过程结束，内门将打开让人畜进入畜舍或由外门离开。室内挡板排风口的外观注意：此双门系统已被广泛测试，它能够高效地防止病毒以气溶胶的形式进入，无论在SDEC生产区域模型或安装滤器的商品猪场均是如此。为了根据猪场中房间的大小确定合理的电扇尺寸以及换气间隔，与经验老道的工程师合作是必不可少的。其它其它与PRRSV传播相关的因素也可能十分重要，生产商门在完善他们自己猪场的生物安全规程时应予以考虑：猪肉PRRSV能在感染猪的猪肉中存活，4℃下至少能存活7天，-20℃甚至能存活几个月。因此，任何时候新鲜或冷冻猪肉是不允许进入猪舍的。废水池废水PRRSV能在20℃或4℃废水中存活3天和7天。PRRSV阳性的废水会作为感染健康猪 污染源。因此，那些在水处理程序中使用废水循环利用的生产商们可能比那些使用深沟的人承担更大的病毒进入的风险。尸体处理在深埋或焚烧尸体的过程中PRRSV会被灭活。故仅能采用这些方法对尸体进行处理。任何时候都应避免处理尸体的卡车驶入场内。焚烧PRRSV阳性的尸体是很有效的处理方法结语依据我们过去2年中的经验，在控制良好的临床条件下，上述方法能够高效地防止PRRSV在猪群中传播。显而易见，员工是否遵守是此规程是否成功实施的关键。无论是作为将有科学依据的生物安全规程引入猪场的组员，还是作为培训员工的老师以及确保规程被最大限度地遵守的审核员，兽医在此过程中起着举足轻重的作用。通过实践以上的规程，我们希望生产商们能有效地降低PRRSV进入猪群的风险并能将生猪健康和生产状况维持在一个高水平上。此外，全面的PRRSV生物安全程序在猪场中的广泛应用将会减少区域内的病毒传播，从而增强区域控制和清除计划的成功率。参考文献以上总结的有关PRRSV传播和生物安全的资料均取自本小组发表研究数据，这些数据都经过同行审阅。气溶胶传播PitkinAN,DeenJandDeeSA.Useofaproductionregionmodeltoassesstheairbornespreadofporcinereproductiveandrespiratorysyndromevirus.VetMicrobiol(Inpress).ChoJG,DeeSA,DeenJ,GuedesA,TrincadoC,FanoE,JiangY,FaabergK,CollinsJE,MurtaughMPandJooHS.Theinfluenceofanimalage,bacterialcoinfectionandporcinereproductiveandrespiratorysyndromevirus(PRRSV)isolatepathogenicityonvirusconcentrationinindividualpigs.AmJVetRes2006;67:489493ChoJG,DeeSA,DeenJ,TrincadoC,FanoE,MurtughMP,CollinsJEandJooHS.Anevaluationofdifferentvariablesonthesheddingofporcinereproductiveandrespiratorysyndromevirusinaerosols.CanJVetRes2006;70:297301.ChoJG,DeeSA,DeenJ,MurtaughMP,andJooHS.Anevaluationofisolatepathogenicityonthetransmissionofporcinereproductiveandrespiratorysyndromevirusbyaerosols.CanJ 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strategiesforthecontrolofinsectsonacommercialswinefarmSwineHealthProd2006;14:7681.16SchurrerJA,DeeSA,MoonRD,MurtaughMP,FinneganCP,DeenJ,KleiboeckerSB,andPijoanC.Retentionofingestedporcinereproductiveandrespiratorysyndromevirusinhouseflies.AmJVetRes2005;66:15171525.SchurrerJA,DeeSA,MoonRD,RossowKD,MahlumC,MondacaE,OtakeS,FanoE,CollinsJE,andPijoanC.SpatialdispersalofporcinereproductiveandrespiratorysyndromeviruscontaminatedfliesfollowingcontactwithexperimentallyinfectedpigsAmJVetRes2004.65:12841292.OtakeS,DeeSA,MoonRD,RossowKD,TrincadoC,andPijoanC.Studiesonthecarriageandtransmissionofporcinereproductiveandrespiratorysyndromevirusinanindividualhousefly(Muscadomestica,Linnaeus).VetRec2004.154:8085.OtakeS,DeeSA,MoonRD,RossowKD,TrincadoCandPijoanC.Evaluationofmosquitoes(Aedesvexans,Meigen)asbiologicalvectorsofporcinereproductiveandrespiratorysyndromevirus.CanJVetRes2003.67:265270.OtakeS,DeeSA,MoonRD,RossowKD,TrincadoC,FarnhamM,andPijoanC.Survivalofporcinereproductiveandrespiratorysyndromevirusinhouseflies(MuscadomesticaLinnaeus)CanJVetRes2003.67:198203.OtakeS,DeeSA,RossowKD,MoonRD,TrincadoC,andPijoanC.Transmissionofporcinereproductiveandrespiratorysyndromevirusbyhouseflies,(MuscadomesticaLinnaeus).VetRec2003.152:7376.OtakeS,DeeSA,RossowKD,MoonRD,andPijoanC.Transmissionofporcinereproductiveandrespiratorysyndromevirusbymosquitoes(Aedesvexans).CanJVetRes2002.66:191195.OtakeS,DeeSA,JacobsonL,TorremorellM,andPijoanC.Evaluationofaerosoltransmissionofporcinereproductiveandrespiratorysyndromevirusunderfieldconditions.VetRec2002150,804808.运输DeeSA,TorremorellM,ThompsonR,CanoJP,DeenJ,andPijoanC.EvaluationoftheThermoassisteddryinganddecontaminationsystem(TADD)forthesanitationoffullsizetransportvehiclescontaminatedwithporcinereproductiveandrespiratorysyndromevirus.SwineHealthProd2007;15:1218.DeeSA,DeenJandPijoanC.AnevaluationofanindustrybasedsanitationprotocolforfullsizePRRSVcontaminatedtransportvehicles.SwineHealthProd2006;14:307311. 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