被动凝集法检测肺炎支原体抗体的实验室评价

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1、被动凝集法检测肺炎支原体抗体的实验室评价〔摘要〕目的：探讨被动凝集法测定肺炎支原体(MP)抗体的诊断价值。方法：分别用被动凝集法和ELISA间接法来检测50例门诊患者的MP抗体，比较两种方法是否差异有显著性。结果：被动凝集法和ELISA间接法在检测MP抗体中差异无显著性。结论：被动凝集法更能精确测定抗体滴度，敏感度高，操作简单，有重要的临床应用价值，可在临床推广使用。　　〔关键词〕被动凝集法；肺炎支原体抗体；ELISA间接法　　TheevaluationofParticleAgglutinationTestforDetect

2、ingMycoplasmaPneumoniaAntibody　　Abstract:ObjectiveToinvestigatetheapplicationvalueofserodiaMycoⅡparticleAgglutinationtestforMPantibody．MethodsPantibodytiterexactly,ItistheadvantageofhighsensitiveandoperatingEasily．Ithavetheimportantclinicalapplicationthevalueandcan

3、beuniversallyusedInClinic．　　Keymunofluorescence　　肺炎支原体(MP)通过呼吸道传播，冬秋季较多见，青少年易感染。引起间质性肺炎和急性支气管炎，占肺炎发病率的15％～20％，占非细菌性肺炎50％，近年来＜6岁患儿发病呈上升趋势，MP体对红霉素和四环素敏感，但对常规治疗肺炎的药物耐受，为避免滥用抗生素，早期诊断尤为重要。我们分别用被动凝集法和ELISA间接法检测50例门诊患者血清中肺炎支原体抗体，并对两种方法进行分析评价。　　1　材料和方法　　1.1　试剂　被动凝集法采用日本富士瑞

4、必欧株式会社生产的赛乐迪亚—麦克Ⅱ试剂盒，ELISA间接法采用深圳市博卡生物技术有限公司生产试剂盒。　　1.2　观察对象　2006年5月在本院就诊的50例门诊患者。　　1.3　标本采集和测定方法　采集患者末梢血100μl，室温静置1h，2400r/min离心10min，被动凝集法吸取血清后按要求加入血清稀释液和明胶颗粒，室温静置3h，设阴阳对照，滴度＞1∶80为阳性。　　2　结果　　见表1。　　表1　两种方法检测MP体抗体的结果比较(略)　　对两种方法检测结果进行χ2检验，P＞0.005两种方法差异无显著性。　　3　讨论　　

5、MP体可从口腔呼吸道分离到，是人类原发生非典型性肺炎的主要病原体之一。病理变化主要是间质性肺炎和急性细支气管炎，还可引起肺外并发症。分离培养是确诊支原体感染的可靠方法，但需要时间较长，对临床快速诊断意义大，但患者和临床不易接受。特异性血清试验包括补体结合试验，ELISA法和间接血凝试验。补体结合试验需要一定的仪器和技术，操作较复杂，不适用于临床常规检测。ELISA间接法用于检测患者急性期和恢复期血清中特异性IgM、IgG抗体，即其敏感度与标本采集期有关，感染初期阳性率39％，疾病后期可达76％，溶血、混浊和脂血样本会干扰该试

6、验。被动凝集法采用MP体细胞膜成分(mac株)致敏人工明胶粒子制造而成，致敏粒子与人血清中存在的MP体抗体发生凝集反应，其检测抗体滴度广，从1∶40～1∶10240，该法用明胶颗粒作载体，从而消除了许多非特异性反应。本试验仅用于检测MP体抗体而非直接检测MP体，因而阳性结果并不能确诊是支原体感染。须注意的是，极低含量的抗体不能被检测出是可能的，因为一些患者不产生或只产生少量抗体，特别是40岁以上的人可呈阴性结果，此外大约20％成人再次感染MP后几乎检测不到MP特异性抗体。当怀疑感染时，即使试验为阴性也要隔一段时间进行重新检测

7、。MP肺炎患者的IgM抗体感染后7d～10d出现，20d左右出现IgG抗体，但检测到MP特异性抗体并不表明是急性感染，因为在MP感染后1年内，IgM可持续升高，故应结合患者临床症状加以分析和诊断。被动凝集法作为辅助诊断MP感染的试验，其方法敏感度高，简单快速，价格便宜，可作为临床常规检测项目和筛查依据。