黑曲霉产纤维素酶酶学性质的研究及其分离纯化毕业论文

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1、黑曲霉产纤维素酶酶学性质的研究及其分离纯化摘要：从我院保藏菌株中，分离纯化出一株较纯的产酶相对较高的菌株。通过在单因素实验基础上进行正交实验，对其液态产酶的发酵条件进行研究，结果显示：氮源为1%的NH4NO3，无机盐为1%的NaCl,表面活性剂为0.05%的tween-80，接种量为3.6%，水量为1:1.5，pH6.0,发酵温度28℃，复合碳源为麸皮：酵母粉：蛋白胨=4:1:1，装料量为75g(250ml三角瓶)为最佳发酵条件。酶活力测定采用3，5-二硝基水杨酸（DNS）法。通过对纤维素酶酶学性质的研究，得

2、出其酶反应的最适温度为45℃，最适pH为4.5。关键词：紫外诱变育种液态发酵黑曲霉纤维素酶酶学性质ScreeningNystatinStrainfromAspergillusnigermutatedbyuv.TheoptimizationproductionandextractionconditionofcellulosefromAspergillusnigerthroughliquidfermentation.Abstract:Fromthestrainsexistinginthelab,wecangeta

3、bacterialstrainwithrelativelyhigherenzymaticactivitythroughseparationandpurificationprocess.Themediumingredientsandconditionsareoptimizedbysinglefactorandorthogonalexperiments.Theresultsareasfollows:Nitrogensource:1%NH4NO3,surfactant:tween-800.05%,inoculums

4、size:3.6%,waterquantity:1:1.5,pH:6.0.Thefermentationtemperatureis28℃，compoundcarbonsource:theproportionofbran:yeastextractpowder:peptoneinmediumis4:1:1,liquidmediumvolume:75g.Thatistheoptimizationconditiontoproducecellulasewhichwehaveexplored.Weusethemethod

5、ofDNStodeterminationtheactivityofenzymes.Throughstudyingthecharacterizationofcellulase,wehavefoundoutthattheoptimumpHandtemperatureofthepurifiedenzymeare4.5and45℃respectively.Keywords:strainselectionbyUltravioletRaymutationNystatinCellulaseAspergillusnigerl

6、iquidfermentationenzymology1前言1.1本论文的主要概况：1.1.1立题背景随着我国加入WTO和签署《烟草控制框架公约》，烟草行业面临诸多方面的压力，降低烟叶有害成分、提高烟叶质量成为烟草行业关注的热点问题。目前卷烟减害多侧重于工业减害技术（如：改善过滤和透气条件）研究。降低烟叶有害成分（主要是有害成分前体物），减少烟草燃烧后产生的有害物质是卷烟减害的另外一条有效途径，目前正日益受到研究者关注。纤维素和果胶等都是生物大分子，在燃烧过程中常产生有害成分，它们的降解不仅有利于降焦减害，同

7、时可提高烟叶品质。以往的研究多关注纤维素和果胶等单组分的降解，往往达不到理想的减害效果，需要综合考虑同时降低这些组分来解决这个问题，而选育和驯化多功能兼性好氧菌株及菌群来降解纤维素和果胶质等组分是降低焦油含量、提升烟叶品质的有效途径。项目拟从烟叶及烟草甲共生菌中选育驯化具有同时降解纤维素和果胶质能力的功能微生物菌株及相关菌群，采用多尺度代谢调控的方法研究功能微生物的耦合发酵工艺，使用神经网络技术及响应面方法优化相关功能酶制剂配方，最终达到降低烟叶中纤维素等有害分子的目的。本项目的实施，不但可筛选出对烟叶纤维素

8、及果胶质等生物分子有明显降解作用的功能微生物，降低烟叶有害成分，还可通过降低纤维素及果胶质等成分直接提高烟叶质量。相关研究和应用不但可为烟草行业提供具有良好降焦作用的功能微生物，同时还可为生物方法提高烟草品质提供理论依据和技术支撑。1.1.2国内外研究概况随着我国加入WTO和签署《烟草控制框架公约》，烟草行业面临诸多方面的压力，降低烟叶有害成分、提高烟叶质量成为烟草行业关注的热点问题。目前卷烟减害多