自体游离骨膜移植修复家兔关节软骨缺损的形态学研究

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1、自体游离骨膜移植修复家兔关节软骨缺损的形态学研究【摘要】〔目的〕观察并分析移植自体游离骨膜修复家兔关节软骨缺损的形态学变化过程.〔方法〕在18只中国家兔双侧膝关节股骨髌面上制作6.0mm×3.0mm大小的全层关节软骨缺损模型，行胫骨内侧面骨膜片移植，利用显微镜及图像分析技术观察股骨髌面关节软骨缺损修复的形态学变化.〔结果〕术后第4周时，自体游离骨膜组可见明显的软骨陷窝及同源细胞群，第12周时，细胞密度降低，基质增多，接近正常透明软骨的特征.自体游离骨膜移植组在术后第4，8，12周时平均单个软骨细胞面积与对照组相比较均有显著性差异.〔结论〕移植自体游离骨膜可修

2、复关节软骨缺损，其过程可分为细胞分化增殖期、幼稚软骨形成期及软骨改造塑形期等3个阶段.【关键词】骨膜移植自体兔StudyofmorphologicalchangesinrepairingarticularcartilagedefectsABSTRACT:OBJECTIVEToobserveandanalyzetheprocessofmorphologicalchangesinrepairingarticularcartilagedefects.METHODSUsingthemodelsof6.0mm×3.0mmoffullthicknessofarticul

3、arcartilagedefectsonthepatellarsurfaceoffemurestablishedin18casesofkneejointofChineserabbits,theautologousfreeperiosteumedialistibiae,andthemorphologicalchangesonthepatellarsurfaceofthefemurbymicroscopeandimageanalysis.RESULTSDistinctcartilageholloologouscellmassilaralhyalinecartil

4、ageatrix.Thereandcontrolgrouponthesinglecartilagecellareacouldrepairarticularcartilagedefect,anditscoursecanbedevidedintothreeperiods,includingcelldifferentiationandproliferation,formationofimmaturecartilageandthecartilagetransformationandshaping.Key;transplantation,autologous;rabb

5、its关节软骨缺损的移植修复是热点研究课题，本实验在中国家兔股骨髌面建立了自体游离骨膜移植修复关节软骨缺损模型，并利用显微镜及图像分析技术观察并分析了自体游离骨膜修复关节软骨缺损的形态学变化，旨在为自体游离骨膜移植的临床应用提供实验依据.1材料与方法1.1动物与分组选取体重为（2.15±0.30）kg的健康中国家兔18只，雌雄不限.利用自制手术刀在家兔股骨髌面制作6.0mm×3.0mm大小的股骨髌面全层软骨缺损模型，深度以均匀出血为准，共36侧.随机选择28侧为自体游离骨膜移植组，在关节软骨缺损区内铺盖从胫骨内侧面锐性剥离的8.0mm×4.0mm大小的骨膜片

6、，使生发层朝向关节腔，用6号缝合线将四角缝合于膝关节面周围的结缔组织上；选择8侧为无移植对照组，其关节软骨缺损区内未植入任何组织.1.2标本制作分别于术后等1，2，4，8，12周时取材，行常规苏木精伊红染色、阿尔辛蓝过碘酸雪夫反应及阿尔辛蓝丽春红组合染色.1.3观测方法利用日本OLYMPUS光学显微镜对移植组织标示修复细胞的形态变化进行观察，并采用北京航空航天大学产CMIAS008型多功能真彩病理显微图像分析仪测量单个软骨细胞的面积.每块标本分别在高倍镜下取3个视野，计算再生细胞面积平均值作为每块标本的参数值，进行定量分析.2结果2.1光学显微镜观察

7、术后第1周自体游离骨膜移植组标本移植骨膜增生，生发层骨原细胞大量增生、分化，体积变大，多呈扁椭圆形，核大，呈卵圆形，染色较深，胞质嗜碱性；对照组标本缺损区内形成较薄的肉芽状组织.第2周时，自体骨膜移植组标本游离骨膜明显增厚，细胞密度增加，呈圆形或卵圆形，核大，偏居一侧，偶尔可见较小的软骨囊、软骨陷窝及双细胞；对照组标本深层可见小血管形成，周围见成纤维细胞，在浅层有散在的扁椭圆形细胞.第4周时，自体游离骨膜组标本细胞密度降低，基质增多，可见明显的软骨陷窝和同源细胞群(图1)；对照组标本浅层细胞明显增多，体积较小，呈卵圆形，核较大，胞质少.第8周时，自体游离骨膜

8、移植组标本浅层可见多层卵圆形细胞，随深度的增加体积逐