紫外分光光度法测定紫云英蜜中总酚的含量论文

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1、紫外分光光度法测定紫云英蜜中总酚的含量论文张赛群梁妍杨杰彭佼朱洁【摘要】目的：建立紫云英蜜中总酚含量测定方法。方法：采用Folin酚法，样品经福林试剂显色反应后，紫外可见分光光度计测定其总酚含量。结果：总酚在2.03～8.04μg·mL-1内线性良好，r=0.9997，且平均回收率为102.42%，RSD=2.64%(n=5)。结论：该方法准确，简便，重现性好.freelethodfordeterminationofthecontentoftotalhydroxybenzeneforZiyunyingmi.Method：FolinDenisiningtheco

2、ntentoftotalhydroxybenzenebyUV.Result：ThetotalhydroxybenzeneshoL-1，r=0.9997，theaveragerecoveryethodisaccurateandsimplei；totalhydroxybenzene；FolinDenis；UV紫云英蜜又名红花草蜜或草子蜜，具有大自然清新宜人的草香味，甜而不腻，鲜洁清甜，色泽为浅琥珀色。富含多糖、多酚、氨基酸、维生素、微量元素等多种营养成分，长期饮用可补气血，健脾胃，增强抗病能力，强身健体。且其中的多酚酸具有抗病原微生物、抗炎症、抗变态反应、抗心血管疾病

3、和抗氧化等作用［1，2］。为了控制产品质量，我们采用Folin酚法对贵州不同产地的紫云英蜜中总多酚含量进行了研究。1仪器与试药1.1仪器紫外可见分光光度计（岛津2401）;超声波清洗仪（昆山市超声仪器有限公司KQ2508型）;恒温水浴锅（余姚市亚星仪器仪表有限公司）。1.2试药原儿茶酸对照品（批号：110809200503）；钨酸钠，磷钼酸，85%磷酸，Na2CO3，以上试剂均为分析纯；水为蒸馏水；1.3福林试剂的配制［3］：称取钨酸钠40g，磷钼酸8g和85%磷酸20mL，溶于300ml蒸馏水，煮沸加热回流2h，冷却，稀释至400mL，置于棕色瓶中保存。1

4、.4Na2CO3溶液的配制称取15gNa2CO3，溶于200mL蒸馏水中，即为75g·L-1Na2CO3溶液。2方法与结果2.1对照品溶液的制备原儿茶酸对照品的配制：称取原儿茶酸对照品15.80mg于50mL容量瓶中，蒸馏水溶解并定容，摇匀，备用，浓度为316μg·mL-1。2.2供试品溶液的制备取同一批样品，精密称定，置于50mL容量瓶中，超声使溶，过滤，取20mL续滤液定容成50mL，摇匀，备用。2.3测定方法精密吸取适量样品溶液1mL于10mL带塞离心管中，加入2.5mL福林试剂，放置5min，再精密加入Na2CO3溶液2mL，50℃水浴保持5min，再取出室

5、温放置2h，于760nm左右测定吸光度值。2.4标准曲线的制备从原儿茶酸标准储备液中分别吸取1，1.5，2，2.5，3，3.5mL于25mL容量瓶中，蒸馏水稀释定容，摇匀，浓度分别为12.64μg·mL-1，18.96μg·mL-1，25.28μg·mL-1，31.60μg·mL-1，37.92μg·mL-1，44.24μg·mL-1，分别从中精密吸取1mL，按2.3测定方法反应，测定吸光度值。以终浓度为横坐标，吸光度值为纵坐标，得回归方程为Y=0.0932X-0.0315，r=0.9997。结果表明总酚在12.64μg·mL-1～44.24μg·mL-1范围内线性

6、良好。2.5精密度试验取同一份对照品按上述反应后连续测定5次，吸光度值RSD=0.386%。结果表明仪器精密度良好。2.6样品吸光度值稳定性试验按2.2供试品溶液制备方法制备样品液，并按2.3测定方法反应后，每隔5min测定一次，观察吸光度值变化，结果1h内的吸光度值RSD=1.42%，结果见图1。结果表明样品显色后在1h内较稳定。2.7重现性试验取同一批样品，平行5份，精密称定，按供试品溶液法制备，并按2.3测定法反应。结果表明，样品的平均含量为2.154mg·g-1，RSD=3.43%。结果表明方法重现性良好。2.8加样回收率试验取同一批样品，精密称定，精密加入

7、337μg·mL-1原儿茶酸对照品2mL，按供试品溶液法操作，并按2.3测定样品中总酚的含量，结果表明，其回收率为102.42%，RSD=2.64%，数据见表1。表1总酚加样回收率试验结果（、略）2.9样品含量测定分别精密称取贵州不同产地的样品，每批平行取5份，按2.3测定方法操作，测定每批样品中总酚平均含量。结果见表2。表2不同批次样品总酚含量（略）3讨论植物多酚的测定方法有多种［3，4］，曾考察普鲁士蓝法［5］、重氮比色法［6］等，均因为方法显色不稳定或方法步骤复杂而未采用。而Folin酚法实验操作较简单，且结果稳定可靠，故选用该方法作为紫云英蜜中总酚含量