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时间:2018-11-27
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1、正常妊娠及妊高征孕妇胎盘组织中细胞凋亡及增殖基因表达的研究论文论文摘要目的:探讨正常妊娠及妊高征(PIH)孕妇胎盘组织bcl-2、bax及ki67基因的表达及其相互关系。方法:采用免疫组化方法测定正常早、中、晚期妊娠30例及轻、中、重度PIH36例的胎盘组织bcl-2、bax及ki67的表达。结果:(l)bcl-2表达主要定位在绒毛的合体滋养层细胞(S-cells),而bax在S-cells和细胞滋养层细胞(C-ceIIs)均呈阳性,在绒毛间质中baX也呈阳性表达,但强度低于滋养层细胞。ki67定位于C-ce
2、IIs;(2)bcl-2在晚期妊娠组的阳性率低于早、中期妊娠组(P<0.05)。ki67在正常早、中、晚期妊娠组,对照组与PIH组,轻、中、重度PIH组之间均有显著性差异(P<0.01);(3)bcl-2和bax表达及与ki67的表达无相关性(P>0.05)。结论:bcl-2及bax在高水平上达到平衡,在胎盘组织中并不起介导细胞凋亡的主导作用,而且二者的表达不影响细胞的增殖。关键词胎盘细胞凋亡bcl-2baxki67论文人类胎盘不仅在胎儿—胎盘—母体的关系上起中心轴的作用.freel×2cm×2cm胎盘组织,
3、生理盐水冲洗干净后立即放入10%福尔马林固定液中。1.3方法用免疫组化SP法,抗bcl-2、抗bax、抗ki67单克隆抗体即用型及SP试剂盒均购自福州迈新生物工程公司。每次染色均设阳性和阴性对照。1.4结果判定由2名医师独立观察切片中10个高倍视野。(1)阳性标准:SP法显示bcl-2及bax定位于胞浆和胞膜内,反应产物为棕黄色。根据显色程度分为4级:(-)为无着色,(+)为淡黄色,(++)为棕黄色,(+++)为棕褐色;(2)SP法显示ki67以细胞核呈清晰棕褐色为阳性,按阳性细胞占C-cells的比例分为:
4、阳性细胞数<10%为(-);10%-20%为(+);20%-30%为(++);>30%为(+++)。1.5统计学分析Fisher精确概率检验法,两组计数资料用等级相关分析。2结果2.1正常妊娠期胎盘组织中bcl-2、bax及ki67的基因表达bcl-2表达主要定位在绒毛的S-cells,而bax在S-cells和C-cells均呈阳性,同时在绒毛间质中bax也呈阳性表达,但强度低于滋养层细胞;ki67蛋白主要定位在C-cells。bcl-2在晚期妊娠组的阳性率明显低于早、中期妊娠组(P>0.05);ki67在
5、晚期妊娠组的阳性率明显低于早、中期妊娠组(P<0.01)。早、中、晚期妊娠组bcl-2的表达强度与ki67的表达强度无相关性(P>0.05),bax与ki67也无相关性(P>0.05)。2.2妊高征与正常晚期妊娠胎盘组织中bcl-2、bax及ki67的基因表达bcl-2的阳性率在对照组与PIH两组间差异无显著性(P>0.05),bax两组差异无显著性(P>0.05),对照组ki67的阳性率明显低于PIH组(P<0.01)。bcl-2与ki67的表达强度无相关性(P>0.05),bax与ki67也无相关性(P>
6、0.05)。2.3妊高征胎盘组织中bcl-2、bax及ki67的基因表达bcl-2的阳性率在轻、中、重度PIH3组间差异无显著性(P>0.05),bax在3组间差异也无显著性(P>0.05),而ki67在轻度PIH组的阳性率明显低于中、重度组(P<0.01)。PIH轻、中、重度组妊娠bcl-2的表达强度与ki67的表达强度经等级相关分析无相关性(P>0.05),bax与ki67也无相关性(P>0.05)。3讨论3.1正常妊娠与妊高征胎盘组织bcl-2、bax的基因表达bcl-2是细胞凋亡的重要抑制基因。本研究
7、中免疫组化已确定bcl-2定位在S-cell表达,并且从正常早孕到晚期妊娠持续出现3,6,因此保留滋养层细胞团可能是维持妊娠的一种机制1。晚期妊娠bcl-2表达下降、可能是因为bcl-2正常生理性功能,在孕晚期组成胎盘的细胞不再需要存活,可能是细胞凋亡的一种早期生物学变化,也可能与分娩有关2。目前已知bcl-2和bax是bcl-2家族中重要成员。bcl-2表达水平较高时,可形成bcl-2和bax的异源二聚体,细胞凋亡受到抑制;bax表达水平较高时,可形成bax-bax同源二聚体,加速细胞凋亡。本研究中,对照组
8、bcl-2与bax的阳性率为66.7%与80%,PIH组的阳性表达均为75%,表明大多数胎盘组织均呈bcl-2与bax高表达。bcl-2和bax表达已在一定水平上达到平衡,所以在胎盘组织中不起介导细胞凋亡的主导作用。PIH组的bax并无随病情的严重程度而有下降的趋势,说明bax会进一步影响妊娠的结局,反映病情的严重程度。这些结果可能提示,胎盘的细胞凋亡并不是bax单独起作用,但有待进一步证实。3.2
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