黄连多糖抑菌活性初探

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1、黄连多糖抑菌活性初探姜延伟王懿萍吴玉娟洪鹏举许伦杰【摘要】　　目的探讨黄连多糖对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抑制作用。方法用扩散法研究黄连多糖对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抑制作用，并选用黄连水提液和盐酸小檗碱作为对照。结果黄连水提液和小檗碱对菌体均有抑菌效果，黄连水提液的抑菌效果尤为明显；黄连多糖没有抑菌作用。结论黄连多糖在体外条件下，不具有对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抑制作用。【关键词】黄连多糖；小檗碱；水提液；抑菌作用　　Abstract：ObjectiveToresearchtheinvitrogroethodples.ResultsTheaq

2、ueousextractsolutionandberberinehadeffectofgroaynothavetheeffectofgrol。　　2.1.2除蛋白将其中一份加木瓜酶0.06g，40℃水浴1h，Sevag法4次。(Sevag法：即，提取液∶氯仿∶正丁醇＝25∶5∶1，电动搅拌20min，静置分层后弃蛋白质沉淀及有机层。)　　2.1.3醇沉将提取液的醇浓度调至80%，在冰箱中4℃静置12h后取出。将醇沉液以5000r/min离心5min，将沉淀用无水乙醇洗涤3次，真空干燥即得灰白色粉末状的黄连多糖。　　2.1.4溶液的制备黄连多糖分为除

3、蛋白黄连多糖和未除蛋白黄连多糖。分别加水配制成5mg/ml即为高浓度溶液，稀释10倍为中浓度，再稀释10倍为低浓度。　　2.2小檗碱溶液的制备将小檗碱药片研磨成粉，加水配成小檗碱溶液。5mg/ml为高浓度，稀释10倍为中浓度，再稀释10倍为低浓度。　　2.3黄连水提液的制备将粉碎至20目的黄连粗粉加入10倍重量的水，浸泡1h，再80℃水浴加热2h，然后浓缩至1/10体积，即配成了高浓度的黄连水提液，稀释10倍为中浓度，再稀释10倍为低浓度。　　2.4菌液的制备将大肠杆菌，金黄色葡萄球菌分别接种于固体肉汤培养基中，37℃培养24h，然后在无菌条件下用

4、无菌生理盐水洗涤菌体，混合菌体制备菌悬液。　　2.5抑菌实验在无菌操作条件下，将牛肉膏固体培养基熔化冷却至45～55℃，加入适量的菌悬液，混匀，吸取40ml于平皿内，待凝固后，在平板内挖取直径8mm圆形小坑，将不同浓度的除蛋白黄连多糖溶液、未除蛋白黄连多糖溶液、小檗碱溶液、黄连水提液注入小坑中，37℃培养24h，观察并测量抑菌圈直径。各溶液在平皿中注入的位置和顺序如图1。　　3结果　　3.1抑菌效果的比较各样品对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌的抑制作用见图2～5。　　3.2抑菌圈直径的比较黄连水提液，小檗碱溶液对大肠杆菌，金黄色葡萄球菌的抑菌圈直径比较见

5、表1。　　图1各溶液在平皿中注入的位置和顺序（略）　　图2高浓度溶液对大肠杆菌的抑制效果（略）　　图3中浓度溶液对大肠杆菌的抑制效果（略）　　图4高浓度溶液对金葡菌的抑制效果（略）　　图5中浓度溶液对金葡菌的抑制效果（略）　　表1黄连水提液和小檗碱对菌体抑菌圈直径平均值（略）　　3.3结果根据图片效果和表中数据可以看出，黄连水提液和小檗碱对菌体均有抑菌效果，黄连水提液的抑菌效果尤为明显；黄连多糖没有抑菌作用。　　4讨论　　黄连本身具有清热燥湿、泻火解毒、清心明目等功效，相关研究证明其有抑菌作用。本实验研究结果也证实了黄连水提液的高浓度溶液和中浓度溶

6、液对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌均有明显的抑制作用，并显示出抑菌的效果随着浓度升高而增强。盐酸小檗碱对细菌的抑制作用也得到了证实。对于黄连多糖，从本实验的结果看，对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌不具备抑制作用，黄连多糖对其它微生物的抑菌效果有待进一步研究。　　本研究对目前使用比较普遍的抑菌实验方法、纸片扩散法〔6〕进行了改进。由于滤纸片所能够承载的药液量很少，而中药成分在体外的抑菌作用普遍较弱，因此我们采取在平板内挖取圆形小坑，然后注入药液的方式来代替纸片扩散法。改进之处在于圆形小坑能够承载的药液量更多，并且能够使药液与培养基接触的更加充分，从而能更加直观准

7、确地反映药液的抑菌效果。实验结果表明，各样品抑菌效果区别非常明显，该方法用于中药提取物的抑菌实验效果较好。【