锁阳对衰老模型大鼠脾淋巴细胞转化能力、脾病理学变化及血清sod、mda、no水平的影响论文

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1、锁阳对衰老模型大鼠脾淋巴细胞转化能力、脾病理学变化及血清SOD、MDA、NO水平的影响论文苏韫刘永琦吴建军张毅颜春鲁聂蕾【摘要】目的探讨锁阳多糖、水提取物咀嚼片延缓衰老的效应及其作用机制。方法提取并制备锁阳多糖、水提取物咀嚼片;TT法检测各组大鼠脾淋巴细胞对ConA刺激的增殖能力,检测各组大鼠脾脏指数,观察脾组织的病理形态学变化;并检测各组大鼠血清中超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)及一氧化氮(NO)的含量。结果与正常组比较,衰老模型组大鼠脾脏指数、脾淋巴细胞对ConA刺激的增殖能力明显下降,脾脏发生明显病

2、理损伤,血清中SOD活性明显下降.freelechanismoftheCynomoriumoriumpolysaccharidecheoriumpolysaccharideandCynomoriumlydividedintonormalcontrol,agingmodel,VitE,Cynomoriumpolysaccharidecheoriumodel.Afterdrugintervention,theproliferationactivityofratspleenlymphocytesstimulatedbyCon

3、Aeasured.Thepathologicalmorphologicalchangesofspleenutase(SOD),thecontentofmalondialdehyde(MDA)andnitricoxide(NO)inserumofratsalcontrolgroup,thespleenindex,theproliferationactivityofratspleenlymphocytesstimulatedbyConAofagingmodelratsoriumcheadeaboveabnormalinde

4、xessignificantimprove(P<0.05).ConclusionsTheextractionofCynomoriumcheprovementontheimmunopathologicchangeandfreeradicalmetabolismofagingratsmodelinducedbyDgal.【KeyoriumSongaricumRupr.;Spleen;Immune;Freeradical锁阳(CynomoriumsongaricumRupr),又名不老药、铁棒槌,性甘、温,具有补肾、助阳、

5、益精等功能。现代医学从药理实验及临床等方面均研究证明锁阳具有调节免疫内分泌、抗衰老、改善性功能、润肠通便等多种生理活性,是治疗老年性疾病、延缓衰老的理想药物〔1,2〕。大量研究表明,衰老的发展与免疫系统、神经系统功能的减退,自由基代谢等密切相关〔3〕。本实验研究是在中医理论指导下,利用现代医学技术结合中药制剂研究,探讨锁阳提取物咀嚼片延缓衰老的效应及其作用机制。1材料与方法1.1实验动物DA、NO测试盒由南京建成生物工程研究所提供;RPMI1640购于GIBCOBRL公司;小牛血清为hyclone产品;ConA为sig

6、ma产品;二甲基亚酚购于宝泰克公司;四甲基偶氮唑盐(MTT)购于FlukaAG,中国分装;D半乳糖购于上海恒信化学试剂有限公司;维生素E为海南制药厂有限公司产品;其余试剂均为国产分析纯。1.3锁阳咀嚼片的制备1.3.1锁阳水提取物咀嚼片制备锁阳加水回流提取2次。第一次加10倍量水,时间1.5h;第二次加水6倍量,时间1.0h,提取温度100℃,合并两次提取液。常压浓缩至生药1g/ml(药液),加乙醇至50%静置24h。滤过,滤液回流乙醇浓缩至稠膏状(D1.40),60℃常压烘干。粉碎至40目,加入乳糖、甘露醇。提取物

7、∶乳糖∶甘露醇比例为3∶1∶1,湿法制粒压片(1g相当于3.3g生药,成人量7.8g/d)。1.3.2锁阳多糖咀嚼片制备锁阳加水回流提取2次。第一次加10倍量水,时间1.5h;第二次加水6倍量,时间1.0h,提取温度100℃,合并两次提取液。常压浓缩至生药1g/ml(药液),加乙醇至30%静置24h,滤过;滤液继续加乙醇至80%静置24h,滤过,得沉淀多糖粗提物,80℃常压烘干。粉碎至80目,加入乳糖、甘露醇。提取物∶乳糖∶甘露醇为3∶1∶1,湿法制粒压片(1g相当于11.2g生药,成人量2g/d)。1.4大鼠衰老模型

8、的复制及给药TT(5g/L)50μl/孔,继续培养4h后,每孔加入0.1ml二甲基亚酚,过夜完全溶解紫色结晶后,每孔用酶联免疫检测仪,以570nm波长测定光密度值(OD值)。各孔OD值减去对照孔OD值代表淋巴细胞的增殖能力。1.6脾脏组织形态的观察将上述称重后的1/2脾脏经福尔马林固定后,石蜡包埋,切片,HE染色,光镜下观察。1.

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