急性毒性试验-ld50的测定

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1、开放性实验总结报告学生姓名班级学号所在院系专业开放实验室名称日期2013-5-5北京理工大学实验室设备处制7一、实验项目概况开放实验题目：实验动物的基本操作及其相关技术实验题目类型：□参与科研□科技活动√自选实验□素质培养指导教师及实验技术人员姓名：李岩实验项目起止日期：2013-4-5至2013-5-5利用何种时间段开展实验：课余时间开展实验的累计总学时数：32学时实验项目基本原理：急性毒性试验是临床前新药安全性评价的第一步，与其它毒性实验相比具有简单、经济、易行等特点。因此新药研究开发时往往

2、通过该项试验，尽可能多的了解一些新药的毒理学特点，为早期判断侯选新药是否具有研究开发价值提供毒性强度资料。通常测定药物ED50及LD50以初步估计药物毒性大小。实验项目的实验方法概述：给不同组的小白鼠腹腔注射不同剂量的戊巴比妥钠，并观察记录各组别小鼠的行为变化，通过比较不同组别小鼠出现死亡的数量来计算LD50。实验项目的仪器设备组成情况：天平，1000ul的移液枪，200μl移液枪，2ml离心管，1ml注射器，手术器械(包括剪刀、镊子等)，鼠笼，离心管架实验项目的消耗材料明细：乳胶手套，KM小鼠

3、,封口膜实验项目的主要结论：戊巴比妥钠的半数致死量为134.32mg/kg用Bliss法计算半数致死量，回归方程y(Probit)=-24.916+14.058Log(D)半数致死量LD50=134.32mg/kgLD50(Feiller校正)95%的可信限=92.405--205.57mg/kgLD5=102.59mg/kgLD95=175.85mg/kg7二、实验项目技术报告1．实验原理戊巴比妥钠属于巴比妥类镇静催眠药，对中枢神经系统有普遍性抑制作用，可起到镇静、催眠、抗惊厥作用。一定剂量的

4、戊巴比妥钠引起一般实验动物死亡。半数致死量（LD50）,即在一群实验动物中，能使实验动物一半死亡的药量，其值越大越好。2．实验内容(1)探测戊巴比妥钠LD50的剂量范围。(2)确定组数并计算各组剂量。（3）正式实验：给不同组的小白鼠腹腔注射不同剂量的戊巴比妥钠，并观察记录各组别小鼠的行为变化及死亡情况。（4）记录实验结果，并计算LD50。3．实验方法：1、预试溶液配制和样品处理（预实验）(1)探索剂量范围：取小鼠9到12只，以3只为一组，分成3到4组，包括组距较大的一系列剂量，按组分别腹腔注射戊

5、巴比妥钠溶液，观察出现的症状并记录动物死亡数，找出引起0及100%有效剂量的所在范围，此即上下限剂量Dn和Dm。(2)：确定组数并计算各组剂量确定组数《G》：根据适宜的组距确定组数，一般分为5到8个剂量，这里我们分为5组，按等比级数增减计算各组剂量：在找出Dm、Dn和确定组数后，课7按下列公式求出公比r.再按公比计算各组剂量Dl-Dm,其中D1=Dn=最小剂量。配置等比药液系列，让每只小鼠给药量相等，一般为0.1ml/10g体重经过预实验的五

6、个剂量浓度分别是77、96、120、150、190mg/kg,相应浓度：0.77、0.96、1.2、1.5、1.9%，在随后的急性毒实验中对这些剂量进行验证2、急性毒性试验：昆明种小鼠共15只，实验前一天晚禁食不禁水，实验当天称重，标记，随机分组。给5组小鼠分别按77、96、120、150、190mg/kg,腹腔注射，给药后观察动物死亡情况。记录小鼠死亡时间，死亡数目。利用Bliss法计算LD50。分组动物数（N）剂量（mg/kg）对数剂量（X）动物死亡数（n）死亡率（P=n/N）1234533

7、33377961201501901.891.982.082.182.28001230％0％33.3％66.7％100％表1药物对小白鼠产生效应情况【实验结果】：LD50的测定依据药物剂量依次给药。利用Bliss法计算LD507样品名称戊巴比妥钠实验动物昆明小鼠给药途径腹腔注射实验日期2013.5.5用Bliss法计算半数致死量--------------------------------------------------------------------------剂量对数剂量动物数死亡数

8、死亡百分率实验机率单位回归机率单位(x)(只)(只)(%)(Y)(Y)--------------------------------------------------------------------------771.8865300.00----1.6031961.9823300.00----2.94951202.07923133.004.56974.31191502.17613267.005.43035.67421902.2788331E2----7.1173-------------