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时间:2018-11-26
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1、青紫薯色素安全性评价论文【摘要】目的对青紫薯色素安全性进行评价。方法采用最大给药量试验,小鼠每天3次、每次36mL/kg灌胃给予200g/L的青紫薯色素水溶液14d,观察其体质量变化和死亡情况;以仓鼠肺成纤维细胞(CHL)行染色体畸变试验,对青紫薯色素进行毒理学评价。结果小鼠灌胃给予21.6g/(kg·d)青紫薯色素后未出现毒性反应,也无动物死亡,体质量增长良好;CHL染色体畸变试验呈阴性,染色体畸变率在正常范围内。结论青紫薯色素灌胃给药21.6g/(kg·d)未出现急性毒性反应,青紫薯色素在1.00g/L剂量下无致突变作用。【关键
2、词】色素类甘薯急性毒性试验染色体畸变[ABSTRACT]ObjectiveToassessthesafetyofsentalmiceL/kg,threetimesaday,for14days.BodyutagenicityofsparfloxacinonCHLcellinthepresenceandabsenceofS9mixentperiod,nosignificantchangesinbodyicereceivingsonstrateanyeffectonchromosomeaberration.ConclusionSutage
3、nicityaction.[KEYMC(0.1mg/L),加S9的CTX(20mg/L)。设青紫薯色素1.00、0.50、0.25g/L等3个剂量组,以生理盐水作为阴性对照组。每个测试组采用2个平行培养瓶。将5×104个CHL细胞接种于50mL培养瓶中,培养72h后,加入受试物。不加S9时,受试物与细胞作用24h及48h后,分别收获细胞制片。而加S9时,受试物、S9混合液与细胞共同作用6h后,将液体弃去,.freelg/L)染色体畸变率26%,畸变类型以断裂、断片、缺失、微小体为主。加S9青紫薯色素各剂量组CHL细胞染色体畸变率均为
4、2%,畸变类型有断裂、缺失、微小体;阴性对照组染色体畸变率1%,畸变类型为交换;阳性对照组(CTX20mg/L)的畸变率为27%,畸变类型以断裂、断片、微小体为主。无论是加S9组还是不加S9组,24h还是48h收获细胞,不同剂量青紫薯色素组畸变率均5%,根据CHL细胞染色体畸变结果判定标准,畸变率在正常范围内,为阴性;阳性对照组畸变率20%,为强阳性。3讨论急性毒性试验是毒理学研究的第一步,急性毒性研究方法很多,常用的有半数致死量和最大给药量试验。当受试物的毒性很低,或者因浓度或体积的限制,无法测出LD50时,可仅提供最大给药量试验
5、的结果,以对药物安全性进行评估8。本文在预试验中,因受药物浓度和小鼠胃纳量限制无法测出LD50,所以进行多次最大给药量试验。正式试验结果表明,青紫薯色素组每天3次灌胃给予小鼠青紫薯色素14d,对动物的体质量增长、进食情况、行为活动均无明显影响,未发现因青紫薯色素蓄积而对动物产生毒性反应。小鼠灌胃给予青紫薯色素21.6g/(kg·d),最大耐受剂量(MTD)大于21600mg/kg,按1977年颁布的化学物质急性毒性分级标准,尤其是我国对职业性化学毒物危害程度的分级标准——中华人民共和国国家标准(GB504485),LD5000mg
6、/kg,为实际无毒物。由此确定青紫薯色素为实际无毒物。化学物的致突变作用一般通过致突变试验来筛检9。CHL细胞染色体畸变试验是广泛使用的遗传毒理学试验之一。可直接从染色体水平上反映遗传物质的损伤情况,染色体是遗传单位基因的载体,具有独特的形态和结构,当受到外界诱变剂作用时出现损伤,形态及结构上就会发生畸变。染色体畸变涉及的遗传物质改变的范围比较大,一般可通过在光学显微镜下观察细胞有丝分裂中期相,计算畸变率来检测。本文CHL染色体畸变试验应用诱导剂处理后的S9进行体外代谢活化试验,即在加S9mix和不加S9mix平行的条件下测试。观察
7、的畸变类型有:断裂、断片、缺失、微小体、着丝点环、无着丝点环及各种辐射体等。试验结果显示,直接诱变剂MMC(0.1mg/L)组细胞染色体畸变率为26%,间接诱变剂CTX(20mg/L)在S9活化条件下的畸变率为27%,均为强阳性,畸变类型主要有断裂、断片、缺失、微小体等。在S9活化和非活化两种测试条件下,青紫薯色素在0.25~1.00g/L浓度范围内,其诱发CHL细胞染色体畸变率5%,在正常范围,说明对CHL细胞染色体无损伤作用,即在本试验条件下无致突变作用。综上所述,青紫薯色素最大给药量为21.6g/(kg·d),为实际无毒物。在
8、0.25~1.00g/L剂量范围内未见诱发CHL细胞染色体畸变率增高,无致突变作用。【
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