资源描述：
《青紫薯色素安全性评价》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。
1、青紫薯色素安全性评价【关键词】色素类甘薯急性毒性试验染色体畸变 ［ABSTRACT］ObjectiveToassessthesafetyofsentalmiceL/kg,threetimesaday,for14days.BodyutagenicityofsparfloxacinonCHLcellinthepresenceandabsenceofS9mixentperiod,nosignificantchangesinbodyicereceivingsonstrateanyeffectonchromosomeaberration.ConclusionSuta
2、genicityaction. ［KEYMC）、环磷酰胺（CTX），山西泰盛制药有限公司生产。肝微粒体酶(S9)按常规方法制备。 1.2方法 1.2.1最大给药量试验[8]经预试验后，选健康小鼠40只，体质量21～23g，雌雄各半。随机分为生理盐水对照组和青紫薯色素组。禁食2h后，青紫薯色素组小鼠灌胃给予200g/L青紫薯色素水溶液，每次36mL/kg，每天3次，间隔6h，共21.6g/(kg·d)；空白对照组给予等量生理盐水。两组均连续给药14d，观察小鼠的活动状态、饮食情况、粪便、呼吸，记录体质量变化及死亡情况。 1.2.2染色体畸变试验以CHL
3、细胞进行加与不加S9的染色体畸变试验。阳性对照为不加S9的MMC（0.1mg/L）,加S9的CTX（20mg/L）。设青紫薯色素1.00、0.50、0.25g/L等3个剂量组，以生理盐水作为阴性对照组。每个测试组采用2个平行培养瓶。将5×104个CHL细胞接种于50mL培养瓶中,培养72h后,加入受试物。不加S9时,受试物与细胞作用24h及48h后,分别收获细胞制片。而加S9时,受试物、S9混合液与细胞共同作用6h后,将液体弃去,用PBS洗涤细胞3次,加入新培养液继续培养24h后,收获细胞制片。常规制片,GIEMA染色。每一试验组每瓶选择100个分散良好的中
4、期分裂相,在油镜下观察染色体有无断裂、缺失、易位、互换、环、多倍体等染色体畸变。 1.3统计学处理 结果用±s表示，用SPSS统计软件对数据进行处理，数据间比较采用t检验。 2结果 2.1最大给药量试验 小鼠灌服药物14d内,青紫薯色素组未出现毒性反应,体质量增加，与生理盐水对照组相比，差异无显著性（P>0.05），见表1。其外观、行为活动、精神状态、饮食、大小便及呼吸等均正常，无动物死亡。 表1青紫薯色素灌胃给药对小鼠体质量的影响（略） 2.2染色体畸变情况 不加S9青紫薯色素各剂量组CHL细胞染色体的畸变率为1%～3%，其畸变类型为
5、断裂和缺失，无明显浓度依赖性；阴性对照组染色体畸变率2%，畸变类型为微小体和断裂；而阳性对照组（MMC0.1mg/L)染色体畸变率26%，畸变类型以断裂、断片、缺失、微小体为主。 加S9青紫薯色素各剂量组CHL细胞染色体畸变率均为2%，畸变类型有断裂、缺失、微小体；阴性对照组染色体畸变率1%，畸变类型为交换；阳性对照组（CTX20mg/L)的畸变率为27%，畸变类型以断裂、断片、微小体为主。 无论是加S9组还是不加S9组，24h还是48h收获细胞，不同剂量青紫薯色素组畸变率均<5%，根据CHL细胞染色体畸变结果判定标准，畸变率在正常范围内，为阴性；
6、阳性对照组畸变率>20%，为强阳性。 3讨论 急性毒性试验是毒理学研究的第一步，急性毒性研究方法很多，常用的有半数致死量和最大给药量试验。当受试物的毒性很低，或者因浓度或体积的限制，无法测出LD50时，可仅提供最大给药量试验的结果，以对药物安全性进行评估[8]。 本文在预试验中，因受药物浓度和小鼠胃纳量限制无法测出LD50，所以进行多次最大给药量试验。正式试验结果表明，青紫薯色素组每天3次灌胃给予小鼠青紫薯色素14d，对动物的体质量增长、进食情况、行为活动均无明显影响，未发现因青紫薯色素蓄积而对动物产生毒性反应。小鼠灌胃给予青紫薯色素21.6g/
7、(kg·d)，最大耐受剂量(MTD)大于21600mg/kg,按1977年颁布的化学物质急性毒性分级标准，尤其是我国对职业性化学毒物危害程度的分级标准——中华人民共和国国家标准（GB504485），LD>5000mg/kg，为实际无毒物。由此确定青紫薯色素为实际无毒物。 本文CHL染色体畸变试验应用诱导剂处理后的S9进行体外代谢活化试验，即在加S9mix和不加S9mix平行的条件下测试。观察的畸变类型有：断裂、断片、缺失、微小体、着丝点环、无着丝点环及各种辐射体等。试验结果显示，直接诱变剂MMC（0.1mg/L）组细胞染色体畸变率为26%，间接诱变
8、剂CTX（20mg/L）在S9活化条件下的畸变率为2
