紫外分光光度法优选黄芩总黄酮的提取工艺研究

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1、紫外分光光度法优选黄芩总黄酮的提取工艺研究志勤，朱贤森，程齐来，杨庆春【摘要】　　目的探讨黄芩中总黄酮提取工艺中的提取溶剂用量、提取时间、提取次数对黄芩中总黄酮得率的影响。方法采用紫外分光光度法，测定不同提取溶剂用量、不同提取时间、不同提取次数所得到总黄酮含量。结果通过正交实验，找到黄芩中总黄酮提取的最佳提取工艺条件为：30%乙醇提取3次，剂量12，10，10倍，时间2，1，1h。结论该研究可以为工厂化黄芩总黄酮的生产过程制定合理的提取工艺提供理论依据，对生产具有一定的指导意义。【关键词】黄芩；总黄酮；提取工艺；紫外分

2、光光度法　　Abstract:ObjectiveTostudytheeffectsoffactorslikesolventdosage，extractiontimeandextractiontimesontheproductionextractionofflavonoidsfromScutellariabaicalensis.MethodsTodeterminethecontentofthetotalflavonoidsbyUV-spectrophotometry.ResultsAbettermethodofextra

3、ctionofflavonoidsfromScutellariabaicalensiseandextractiontimesontotalflavoneses,dosage12，10，10times，time2，1，1hours.ConclusionTheoreticalfoundationofthereasonableprocedurecanbeprovidedfortheflavonoidproductionfromScutellariabaicalensisinthefactoryanditissignifica

4、ntfortheproduction.　　Keyetry　　黄芩ScutellariabaicalensisGeorgi为常用中药之一，具有清热燥湿、泻火解毒、止血安胎等功效。其主要有效成分为黄酮类化合物。现代药理研究证明黄芩不仅具有明显的抗菌消炎、抗过敏、抗氧化、抗癌和抗病毒等作用，而且对心血管疾病也具一定的作用〔1〕。从黄芩中提取黄芩苷的工艺研究报道大多以水为溶剂进行煎煮提取〔2〕，但此法黄芩苷的收率低，生产周期长。本研究采用正交实验，总黄酮为指标，对各影响因素进行研究，得到较佳的提取工艺，较大地提高了收率。　　1

5、材料与仪器　　1.1材料　　药材：黄芩（购于河北安国药市）；试剂：黄芩苷标品（中国药品生物制品检定所）；甲醇（色谱纯北京化工厂）；甲醇（分析纯北京化工厂）；磷酸（分析纯天津化学试剂三厂）。　　1.2仪器　　UV-2401PC紫外分光光度计（日本岛津公司）。　　2方法与结果　　2.1黄芩总黄酮标准曲线的制作　　精密称定3mg的干燥至恒重的黄芩苷标品，用甲醇定容于100ml容量瓶中，摇匀，作为对照品溶液，备用。用对照品溶液以甲醇为空白对照，进行190～500nm的紫外扫描。扫描结果显示在波长277.6nm处有最大吸收值，所

6、以选择277.6nm做为检测波长。观察对照品溶液于1h内的稳定性时，变化很小，因此采用不加显色剂方法直接测定黄芩总黄酮。精密吸取对照品溶液0.00，1.00，2.00，3.00，4.00，5.00ml，分置10ml容量瓶中，用甲醇定容到刻度，摇匀，以0.00ml对照品溶液作空白，于277.6nm处测定吸光度(A)。以A对浓度(C)进行线性回归，其方程为Y=66.878X-0.003（R2=0.9996，r=0.9998）。　　2.2正交设计优化黄芩中总黄酮的提取工艺用L9（34）正交表来选择黄芩的最佳提取工艺。称取药材

7、9份，每份50g。按正交表1，用30%乙醇提取，以总黄酮含量为指标，考察影响提取效果的3个因素：溶剂用量、最佳提取时间、提取次数。每份药材提取后过滤，合并滤液，定容于277.6nm处测定吸光度(A)，测定提取物中总黄酮的含量。结果见表2。方差分析见表3。表1黄芩的提取工艺正交设计因素水平（略）表2正交实验L9（34）表结果分析（略）表3正交提取工艺总黄酮方差分析（略）　　3结果分析从正交分析结果及方差分析表来看，各因素对黄芩中总黄酮含量的影响程度为C>A>B，且C为极显著性差异因素，A、B为显著性差异因素，

8、C3>C2>C1，A1>A2>A3，B3>B2>B1，最佳提取条件为A1B3C3，即溶剂用量（12，10，10），提取时间（2，1，1）h，提取3次为最佳提取工艺条件。　　4讨论分光光度法测定黄酮含量的常用方法有直接测定法、Al(NO3)3法和AlCl3法，为了选择合适的测定方法，我们用对照品溶