肾组织移植对慢性肾功能衰竭大鼠促红细胞生成素的调节作用

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1、肾组织移植对慢性肾功能衰竭大鼠促红细胞生成素的调节作用【关键词】肾组织移植；慢性肾功能衰竭；促红细胞生成素；肾包膜　　EffectofallograftkidneytissuemassimplantationonEPOofratsassimplantationintothecapsuleofratkidneyonEPOofratsodelsofchronicrenalfailue(CRF)inducedbyadriamyucinass(1mm3)ofneodels.Duringtheprocessoftreatment,

2、EPOlevelintheseruminedbyImmunohistochemicalmethod.Results①ThelevelsofEPO(1.160±0.324mU/mL)inthecontrolgroup1mm3to4mm3in60days,aroundinationshoalstructureofglomeruleanduriniferoustubules.③ImmunohistochemicalstudydemonstratedEPOpositivegrainsorepositivegrainsinrena

3、ltissueofthegraftthaninthatofCRF(P0.05).ConclusionAllografttransplantationofkidneytissuemasscanamelioraterenalanemiacausedbychronicrenalfailureandmightbeaneeanstotreatCRFinducedanemia.　　KEYPUS图象分析仪(上海分析仪器总厂)。　　1.4实验动物分组与给药A组：正常对照组(n=20)。B组：病例对照组(n=20)。C组：rHuEPO治疗

4、组30u/kg，腹腔注射，1周3次，连续6周(n=20)。D组：肾组织移植治疗组(n=20)。　　1.5动物模型制备经鼠尾静脉注射盐酸阿霉素6.5mg/kg，三周后行右肾切除，制成稳定的慢性肾功能衰竭大鼠(CRF)模型。　　1.6移植方法用引颈法处死鼠婴，然后把整个小鼠浸入盛有75%(体积分数)酒精的烧杯中；2-3s后取出拭去酒精放入碟皿中，继之在动物腹部用尖刀纵行切开皮肤取婴肾；置入盛有Hanks液的消毒青霉素小瓶中，反复剪切组织至1mm3大小为止(成糊状)；静置使组织下沉，弃上清液，加入37℃的F12培养基待用[1]

5、。受鼠用10%(体积分数)水合氯醛4mL/kg体重麻醉后，俯卧并将四肢固定，剪去背部毛发；手术野消毒后切开皮肤、肌肉至显露肾脏，于左侧肾脏腹面横形切口长约3mm；之后用睫状体分离器分离肾包膜使之成囊袋，取10-15块肾组织置于左肾包膜下，小块相互距离为0.5cm，之后用尼龙线缝合包膜，逐层缝合切口。移植后不用免疫抑制剂[13]。　　1.7标本采集分别于实验0、15、30、45、60d经大鼠内眦静脉采血做指标检测，60d时处死动物摘除肾脏，观察大体外观，沿肾门纵切，置10g/L甲醛固定，送病检。　　1.8观察指标血清EPO

6、的测定：分别于实验0、15、30、45、60d经大鼠内眦静脉采血，采用ELISA法直接测定。　　1.9统计学处理采用SPSS11.5统计软件，实验的结果采用(±s)表示，各实验组与对照组均数间比较采用混合模型重复测量资料的方差分析。　　　　2结果　　2.1血清BUNScr测定结果表1显示实验前病例组、rHuEPO组、肾组织移植组已出现较明显的肾功能减退，与正常组两两比较有显著性差异(P0.05)，而病例组、rHuEPO组、肾组织移植组两两比较无显著性差异(P0.05)。　　表1A、B、C、D组血清BUNScr的含量(略)

7、　　2.2血清EPO变化见表2。实验0dB、C和D组EPO水平稍高于正常组，但尚无统计学意义(P>0.05)。30dC和D组的EPO水平比B组显著升高(P0.01)，随着病程迁延，45和60dC和D组的EPO水平仍高于B组(P0.05)，但C和D组EPO水平较30d下降(P0.05)，实验60dC组EPO水平高于D组(P0.05)。　　表2A、B、C、D组血清EPO含量(略)　　2.3肾组织EPO免疫组化结果观察见表3。EPO抗原阳性反应为位于移植物、肾组织的肾小管细胞胞浆内的棕黄色均匀细颗粒，正常组内表达呈强阳性

8、；对照组呈弱阳性或不表达，在移植物中呈强阳性。　　表3EPO半定量分析比较　略　　3讨论　　经鼠尾静脉注射盐酸阿霉素6.5mg/kg，三周后行右肾切除，移植前测血清BUN显著升高，即造成典型的肾功能衰竭动物模型[1]。动物死亡或术后60d处死取肾脏，进行组织病检。HE染色可见局灶性节段性肾小球硬化，肾小管透明管型说明