红毛五加多糖对荷人喉癌裸鼠抗癌作用的研究

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1、红毛五加多糖对荷人喉癌裸鼠抗癌作用的研究刘国龙毛海波伍勇翁成荫吴红锳【摘要】目的采用人喉癌裸鼠移植模型及电镜观察，研究红毛五加多糖的抗肿瘤药理作用和可能机制。方法建立人喉癌裸鼠移植模型，观测红毛五加多糖（AGP）与对照组的抑癌率；电镜观察AGP引发的癌细胞超微结构改变。结果AGP对裸鼠移植人喉具有明显的抑制作用，平均抑瘤率为47.21%，对荷癌裸鼠体重增长无明显抑制作用，透射电镜观察发现AGP可诱导大量肿瘤细胞凋亡和少量直接坏死。结论AGP对人喉癌有明显的抑制作用，诱导癌细胞凋亡是其主要作用机制，对实验动物的生长无

2、明显影响。【关键词】红毛五加多糖裸鼠移植瘤模型人喉癌　　Abstract：ObjectiveTostudytheanti-tumoreffectofAGPonnudemiceinplantedanlaryngealcarcinomacellsanditsmachanism.MethodsThetumorinhibitoryrateeasuredonnudemiceimplantedanlaryngealcarcinomacellsandthesuper-microstructurechangeofcancercel

3、lsisssionelectronmicroscope.ResultsTheinhibitoryrateoftheimplantedcancerinAGPgroupissionelectronmicroscopeobservationresultsshoorethandirectnecrosis.ConclusionAGPcaninhibitthegroplantedhumanlaryngealcarcinomacellsbyinducingapoptosis.AGPhasnosideeffectongroicei

4、nthistrial.　　Keyicemodel;Humanlaryngealcarcinoma　　喉癌(laryngealcarcinoma)是头颈部常见的恶性肿瘤。目前喉癌的治疗仍以手术为主。晚期喉癌术后多辅助放射治疗和化学治疗。但喉癌对目前的常用化疗药物反应较差，多联多周期化疗时毒副反应明显。红毛五加多糖(canthopanaxgiraldilHarmsvarhispidusHoopolysaccharides,AGP)是中药红毛五加的地上茎皮水溶性提取物经分离纯化得到的精华成分。多糖类具有增强免疫功能、抑制

5、肿瘤生长、抗炎、降血糖等广泛的生物学活性〔1〕。近10年来有关AGP辅助抗癌的研究报道很多，但未见对喉癌的研究报道。本文通过人喉癌裸鼠移植模型观察AGP对人喉癌的作用，并通过电镜观察探索其可能的机理。　　1材料　　1.1药品与试剂AGP，由广州市第一人民医院制剂科提供；阳性对照药猪苓多糖注射液（zhulingpolysaccharide,ZP），连云港正大天晴制药有限公司产品；环磷酰胺（cyclophospha-midum,Cy），上海华联制药有限公司产品。　　1.2动物与瘤株BALB/c系裸小鼠（mudemice

6、,NM），由南方医科大学动物实验中心提供，6～8周龄雌雄兼用，放置在空气净化室内繁殖、饲养、室内保持（25±2）℃。全部实验过程达到SPF(SpectficPathogen-free)条件。人喉癌瘤源（E-1）由南方医科大学中心实验室提供。　　2方法　　2.1喉癌接种将瘤源裸鼠脱颈椎处死，取出喉癌肿瘤组织，切成2mm×2mm×2mm的小瘤块，用套管针将瘤块接种于每只裸鼠的背部皮下，形成人喉癌裸鼠模型。　　2.2动物分组及实验方法裸鼠48只，接种后次日随机分为4组，即空白对照组、Cy组、ZP组、AGP组。实验组于接种

7、24h后每只皮下注入红毛五加多糖液0.2ml，对照组在同样条件下分别每只皮下注入生理盐水＼猪苓多糖注射液＼环磷酰胺每只0.20ml（调节药物浓度使药量达到10mg/kg体重），1次/d，连续30d。各组裸小鼠分别从给样品后15d起每3天做1次活体肿瘤大小测量，以最大长径（L）和横径（S）按下式计算肿瘤体积（V），绘制不同治疗组肿瘤生长曲线，V（mm3）=0.5×L×S2。停药次日处死动物，按下式计算抑瘤率：　　抑瘤率（%）=1-给药组平均瘤重对照组平均瘤重×100%　　电镜观察：处死动物后，立即取出0.5～1mm3

8、大小的癌细胞，迅速侵入预冷的前固定液（2.5%戊二醛加2%多聚甲醛）固定4h，再用1%锇酸作用后固定2h，酒精、丙酮梯度脱水，Epon812渗透包埋，LKB型超薄切片机切片，铀铅双重染色，在投射电镜下进行观察。　　3结果　　实验结束时全部实验裸鼠均存活。　　3.1对裸鼠体重增长的影响结果见表1。空白对照组裸鼠的体重与30d前比较，体重增加显著（t值检验，P＜