痛泻要方抑制大鼠离体结肠平滑肌收缩的钙动员机制

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1、痛泻要方抑制大鼠离体结肠平滑肌收缩的钙动员机制作者：袁建业,谢建群,吴大正,郑昱,潘相学,费晓燕,徐海珍【摘要】目的：从影响钙动员角度，探讨痛泻要方抑制大鼠结肠平滑肌收缩的作用机制。方法：应用离体平滑肌张力测定方法，观察痛泻要方对乙酰胆碱（acetylcholine,ACh）、氯化钾（KCl）和细胞内钙库耗竭后细胞外Ca2+内流引起的大鼠结肠平滑肌收缩的影响。结果：痛泻要方能够抑制KCl和细胞内钙库耗竭后细胞外Ca2+内流引起的大鼠结肠平滑肌收缩，并呈浓度依赖性。3000μg/mL痛泻要方还能抑制ACh引起的第二收缩时相张力，与不加

2、药的对照组（Krebs液）比较，差异有统计学意义（P<0.01）；痛泻要方对ACh引起的第一收缩时相张力无明显影响。结论：痛泻要方主要通过抑制胞外Ca2+内流来抑制大鼠结肠平滑肌的收缩，可能涉及到阻断电压门控钙通道、钙库调控性钙通道和受体操纵性钙通道，但不影响ACh引起的胞内Ca2+释放。【关键词】痛泻要方;结肠;平滑肌;钙动员;大鼠　　Objective:Tostudytherelationshipbetedicine,onthecontractionofthecolonicsmoothmuscleisolatedfromr

3、atsandcalciummobilization.　　Methods:Bymeasuringthetensionoftheisolatedcolonicsmoothmusclestrips,theinhibitoryeffectsofTongxieYaofangonthecontractioninducedbyacetylcholine(ACh),KClandexhaustingCa2+ofinternalcalciumstoreoothmusclestripsinducedbyKClandexhaustingtheCa2+ofi

4、nternalcalciumstore.TongxieYaofangcouldalsoinhibitthetensionofthesecondcontractilephaseinducedbyACh(P<0.01,vscontrol),buthadnoinfluenceonthefirstcontractilephase.　　Conclusion:TongxieYaofangcaninhibitthecontractionofisolatedratcolonicsmoothmusclestripsmainlybyprevent

5、ingtheinfluxofextracellularCa2+,aybeassociatedcalciumstore.　　Keyoothmuscle;calciummobilization;rats　　痛泻要方是中医治疗“痛泻”证的名方，最早见于《丹溪心法·卷二》［1］。许多临床研究报道以痛泻要方为基础方治疗腹泻型肠易激综合征取得良好疗效［2，3］。药理实验表明，痛泻要方对大鼠、兔等实验动物的肠平滑肌收缩具有抑制作用［4，5］，但具体作用机制尚不完全清楚。本实验从钙动员角度探讨痛泻要方抑制大鼠离体结肠平滑肌收缩的作用机制。　　1材料

6、与方法　　1.1实验动物18只健康成年SD大鼠，雄性，清洁级，体质量200～300g，购自中国科学院上海实验动物中心，动物使用许可证号为SYXK（沪）20070005，饲养在上海中医药大学实验动物中心，实验前禁食24h，不禁水。　　1.2药物与试剂痛泻要方（由白术、白芍、陈皮、防风组成），生药饮片一次性购自上海华宇药业有限公司；乙酰胆碱（acetylcholine,ACh），购自Sigma公司（批号为97H2649）；EGTA（ethyleneglycolbis(βaminoethylether)N,N,N',N'tetr

7、aaceticacid），购自Sigma公司（批号为E4378）；毒胡萝卜内酯（thapsigargin），购自Sigma公司（批号为T9033）；Krebs液（NaCl115mmol/L、NaHCO325mmol/L、KCl2.4mmol/L、KH2PO40.6mmol/L、CaCl21.2mmol/L、MgCl21.2mmol/L、glucose10mmol/L），除NaHCO3为Sigma公司产品外，其余所用试剂均为国产分析纯。无钙Krebs液，即Krebs液去掉CaCl2。　　1.3仪器设备PoL。加入乙醇使乙醇浓度达9

8、0％，静置过夜，取上清液，用旋转蒸发仪回收乙醇后将药液置入真空干燥箱内干燥，并研末装入密封袋内备用。1g生药得到0.105g提取物。实验时用Krebs液或无钙Krebs液配制成所需浓度的溶液。　　1.5实验内容与方法　　1.5.1离体