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时间:2018-11-24
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1、免疫散射比浊法测定CRP【关键词】散射比浊法 [摘要]目的本文对比浊法测定血清CRP(C-反应蛋白)进行方法学评价。方法采用免疫散射比浊法检测100例患者和30例健康正常人血清CRP含量,同时与乳胶凝集法结果对比。结果批内、批间变异系数分别为1.41%和4.66%,定量检测具有满意的线性响应(r=0.987),免疫比浊法阳性率为35%,乳胶法为18%,比浊法阳性率明显高于乳胶法。结论本方法的重复性、准确性、稳定性、特异性均较好,脂血、黄疸无明显影响,具有较高的临床推广价值。 [关键词]散射比浊法;乳胶凝集法;C-反应蛋白 Abstract:Objec
2、tiveMethodologicalevaluationofnephelometryedinthedetectionofserumCRP.MethodsThelevelsofse-rumCRPin100patientsand30normalsubjectsinedbytethods:nephelometryandlatexagglutinationtest,andtheresultsetry,and18%bylatexagglutinationtest.Ahigherpositiverateetryinparisonetryisquitegoodinrep
3、lication,accura-cy,stability,andspecificity,andnotaffectedbylipidandjaundice.Nephelometryisvaluableinclinicalapplication. Keyetry;latexagglutinationtest;CRP CRP是一种急性期反应蛋白,能激活补体、促进吞噬并具有其他的免疫调控作用。在各种急性和慢性感染、组织损伤、恶性肿瘤、心肌、手术创伤、放射线损伤等时,CRP在病后数小时迅速升高,病变好转时又迅速降至正常。目前国内CRP的检测普遍采用胶乳凝集法和免
4、疫扩散法,这两种方法虽然操作简便,但其重复性、稳定性等较差,阳性率低。国外主要采用ELISA和比浊法进行CRP的检测。国内近年来也逐渐开始采用比浊法对CRP进行定量分析,我们采用半自动散射比浊仪检测了100例患者和30例健康人血清CRP含量,并同时与乳胶法进行比较分析。 1材料与方法 1.1仪器和试剂 半自动免疫比浊仪TURBOX(r)PLUS、CRP测定试剂盒均购自ORION公司。 1.2检测对象 体检健康血清30例,患者100例。测定CRP含量,并收集患者血清30份混合、分装、冷冻保存待用。 1.3检测方法 采用散射比浊法,反应杯中加入
5、配制好的反应液0.5ml(30ml缓冲液加入0.5ml试剂),混合均匀,室温(20~25℃),反应25~35min,免疫散射比浊仪测定。CRP正常值为小于10mg/ml。乳胶凝集试验按试剂盒说明书操作。 1.4统计学处理 用t检验和χ2检验对结果进行分析。 2结果 2.1两种方法检测和结果比较 检测100例患者血清CRP,比浊法阳性率为35%,乳胶法阳性率为18%,比浊法阳性率高于乳胶法。通过配对χ2检验两种方法检测CRP的阳性数有显著性差异(P<0.05),30例体检健康正常人CRP值均小于10mg/ml。 2.2批内、批间精密度检测
6、 取混合患者血清一份,作批内重复测定20次,结果显示CV值为1.41%,在仪器所标明的范围内(<5%),批间试验每天一次共20次,结果显示CV值为4.66%,在仪器标明的8%范围内。 2.3线性关系评价 取患者混合高值血清一份测定CRP含量,然后作倍比稀释共5个稀释度,结果表明该方法具有满意的线性响应(r=0.987)。 2.4干扰试验 脂血(甘油三脂4.51mmol.L和15.7mmol.L)、黄疸(总胆红素84.3μmol.L和315μmol.L)对测定结果无明显影响。 3讨论 传统的乳胶凝集法检测CRP缺乏精确度,样品的滴度是靠稀释
7、血清的阳性结果来确定的,不能定量地表示检测结果,而且对于小量低浓度的CRP不够敏感,因而不能满足现代临床对医学检验的要求[1]。为了能够给临床提供反映患者免疫功能状况及疗效的指标,国内近年来逐渐开始对CRP进行定量测定,采用得较多的方法是ELISA法,但该法操作较为复杂,特异性和重复性均不如免疫散射比浊法,免疫散射比浊法具有试剂稳定,操作简便,流程短,重复性和精确性好的优势[2-4]。作者利用ORION公司提供的半自动免疫比浊仪TURBOX(r)PLUS,采用散射免疫比浊法检测了100例患者和30例健康人群CRP含量,同时以乳胶法作对照,结果显示两种方法检
8、测的阳性率有显著性差异(P<0.05)。散射比浊法检测批内、
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