苦参山楂合剂对单侧输尿管梗阻大鼠结缔组织生长因子表达的影响

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1、苦参山楂合剂对单侧输尿管梗阻大鼠结缔组织生长因子表达的影响作者：姚钢炼　廖婷婷　宁宁　高登峰　桂保松【摘要】　　目的探讨中药复方苦参山楂合剂对肾间质纤维化大鼠结缔组织生长因子(CTGF)表达的影响以及其对肾间质纤维化的防治作用。方法40只雄性SD大鼠,随机分为假手术组、模型组、苯那普利组、苦参山楂合剂小剂量组和大剂量组。以单侧输尿管结扎术建立肾间质纤维化的动物模型。术后第14天取术侧肾组织做HE、Masson染色及CTGF、α平滑肌动蛋白(αSMA)和Ⅲ型胶原蛋白(ColⅢ)免疫组化检测，并运用图像分析系统作半定量分析。结果苦参山楂合剂可以显著

2、改善梗阻侧肾组织病理变化，下调CTGF表达，减少αSMA及ColⅢ沉积。结论苦参山楂合剂可能通过下调CTGF并抑制肌成纤维细胞的活化来起到防治梗阻性大鼠肾间质纤维化的作用。【关键词】苦参山楂合剂；纤维化；肾间质；结缔组织生长因子；肌成纤维细胞　　Effectofmatrineandcrataegusmixtureonconnectivetissue　groatrineandcrataegusmixtureontherenalinterstitialfibrosisinunilateralureteralobstruction(UUO)rats.M

3、ethodsFortymaleSpragueDalydividedinto5groupsonaverage:shamgroup(A),modelgroup(B),benaprilgroup(C),smalldosematrineandcrataegusmixturegroup(D),andlargedosematrineandcrataegusmixturegroup(D).Themodelsmunohistochemicalstainingofconnectivetissuegrooothmuscleactin(αSMA)andcolla

4、genⅢ(ColⅢ)iquantitativeanalysised.ResultsMatrineandcrataegusmixturetreatmentcanlessenthepathologicallesionandreducethelevelsofCTGF,αSMAandColⅢ.ConclusionMatrineandcrataegusmixturemaydoentationofECM,thuspreventingrenalinterstitialfibrosis.　　KEY)合成、降解失衡和大量积聚是引起肾间质纤维化的主要原因。寻找针对肾

5、间质纤维化发生机制的药物,将是防治肾间质纤维化、延缓尿毒症发生的有效措施。转化生长因子β1(transforminggrooothmuscleactin,αSMA)及Ⅲ型胶原蛋白(CollagenⅢ,ColⅢ)的合成表达情况，探讨该药物对大鼠肾间质纤维化的影响，以阐明其保护作用的部分机制。　　1材料与方法　　1.1实验动物及分组雄性SD大鼠40只，清洁级，体重180-200g，由西安交通大学医学院实验动物中心提供。随机分为5组：假手术组(A组)：蒸馏水10mL/(kg·d)；模型组(B组)：蒸馏水10mL/(kg·d)；苯那普利组[4](C组)

6、：苯那普利10mg/(kg·d)；苦参山楂合剂小剂量组(D组)：苦参山楂合剂50mg/(kg·d)；苦参山楂合剂大剂量组(E组)：苦参山楂合剂100mg/(kg·d)。每组8只，均于术前1d开始灌胃给药。　　1.2造模方法UUO致肾小管间质纤维化模型参照　　2.4肾组织内CTGF表达镜下可见，A组脏层与壁层上皮细胞、间质细胞、小管旁毛细血管内皮细胞、间质成纤维细胞中都可有微量棕黄色颗粒表达，肾间质区无或仅有微量表达；B、C、D、E组表达增多，主要分布在间质内、肾小管上皮细胞、肌成纤维细胞以及肾小球壁层上皮细胞，其中以B组更为明显。免疫组化半定量结果

7、统计分析示，B、C、D、E组肾脏CTGF蛋白表达显著高于A组(P<0.01)，C、D、E组显著低于B组(P<0.01)，E组虽低于D组(P>0.05)，但C、D、E组之间无显著性差异(P>0.05，表2)。　　2.5肾组织ColⅢ表达镜下可见，A组肾脏ColⅢ表达极少，在肾间质基质中呈散在黄色细线样分布；B、C、D、E组表达增多，呈局部或弥漫棕黄色条索状分布，其中以B组更为明显。免疫组化半定量结果统计分析示，B、C、D、E组肾脏ColⅢ蛋白表达显著多于A组(P<0.01)，C、D、E组显著少于B组(P<0.01)

8、，E组虽低于D组(P>0.05)，但C、D组与E组之间无显著性差异(P>0.05，表2)。　　表2各组肾脏组织