紫外分光光度法测定石蒜鳞茎的总生物碱含量

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时间:2018-11-24

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1、紫外分光光度法测定石蒜鳞茎的总生物碱含量作者:李亚仲,单宇,吴志平,袁菊红,夏冰、【摘要】目的建立一种简单快速的方法来测定石蒜鳞茎总生物碱含量,为石蒜鳞茎质量控制提供依据。方法紫外分光光度法,以加兰他敏为对照品,测定波长为289nm。结果加兰他敏在20.4~102.0μg/ml范围内与吸光度值呈良好的线性关系,计算得回归方程Y=0.0084X-0.0227,r=0.9999(n=5);加样回收率为99.8%,RSD=1.44%;测定结果在5h内稳定,RSD=0.64%;不同来源石蒜鳞茎的总生物碱含量差异较大,栽培石蒜鳞茎的总生物碱含量可以达到并超过

2、野生石蒜。结论该测定方法稳定、快速、简便,测定结果良好。【关键词】石蒜;总生物碱;紫外分光光度法DeterminationofTotalAlkaloidsinBulbofLycorisradiatebyUV-spectrophotographyAbstract:ObjectiveAneffectivemethodinethetotalalkaloidsfrombulbofL.radiate.MethodsThetotalalkaloidsthesamplesandtestedat289nm.ResultsThecalibrationcurveofg

3、alanthamineeasurementdifferentpopulations.ConclusionThismethodissimple,effectiveandquickandthecontentsoftotalalkaloidsongdifferentpopulations.Keyaryllidaceae)石蒜属多年生草本植物,主要分布于长江流域及西南各省。据《本草纲目》等记载,石蒜具有解毒、祛痰、利尿、催吐等功效,主治痈疮恶核、咽喉肿痈、水肿等。石蒜的鳞茎含有石蒜碱(Lycorin)、加兰他敏(Galanthamine)、水仙碱(Taze

4、ttine)、石蒜来宁(Lycorenine)、普洛维因(Pluviine)、石蒜胺(Lycoramine)、维他廷(Vitatine)、亥派斯特林(Hippeastrine)等十多种生物碱和重要医药成分。石蒜碱是治疗阿米巴痢疾药吐根代用品的原料,也有一定抗癌作用;加兰他敏、石蒜胺(力可拉敏)在临床上为治疗小儿麻痹后遗症恢复神经功能的要药。1995年版《中国药典》记载,加兰他敏的氢溴酸盐为原料药和注射液已成功用于小儿麻痹后遗症、重症肌无力、肠麻痹的治疗以及手术后的催醒剂。近年来,国内外将其用于轻中度阿尔茨海默症(AD)的治疗。加兰他敏作为第2代胆碱

5、酯酶抑制剂,因其药效持续时间长,不良反应小,服药方便,而日益受到各国研究人员及临床医师的青睐[1~5]。目前,国内外对石蒜的研究主要集中在石蒜生物碱的成分分析,引种栽培和临床药效的研究[6~9]。何丽一等[10,11]曾利用分光光度法分别对石蒜碱、氢溴酸加兰他敏进行了测定,而对石蒜鳞茎总生物碱含量的测定方法研究未见报道,石蒜鳞茎总生物碱含量的测定对于研究石蒜生物碱代谢,控制石蒜质量,合理栽培、采收,提高提取率具有重要意义。本文主要目的在于建立一套稳定、快速、简便,测定结果良好的石蒜鳞茎总生物碱含量测定方法,为石蒜鳞茎品质分析提供参考。同时我们利用该

6、方法对不同栽培方式及野生石蒜鳞茎的总生物碱含量进行了测定比较。1器材UV-2501PC型分光光度计(日本岛津公司);电子天平(北京赛多利斯仪器系统有限公司);加兰他敏对照品(中国药品生物制品检定所);所用试剂均为国产分析纯。取盛花期开花植株的鳞茎,切成片后于55~60℃干燥12h,粉碎后过80目筛备用。石蒜鳞茎来源于4个不同样地。分别来自于南京汤山、南京紫金山的两个野生居群及江苏省中科院植物研究所2个不同栽培样点。2方法与结果2.1样品供试液的制备称取石蒜鳞茎粉末(过80目筛)12.000g,置于平底烧瓶中,加12ml10%NaOH溶液,静置15m

7、in,加50ml醋酸乙酯(P>0.900),摇匀后放在80℃水浴中,保持回流。第1次回流2h,第2次回流1h,第3次回流1h。将滤液合并,减压浓缩至干,用甲醇定容至25ml,将此溶液过滤后,用移液枪精密吸取50μl入10ml容量瓶,用甲醇定容至10ml备用。2.2波长扫描以甲醇为空白对照,将标准对照品溶液、样品供试液和空白对照液在200~700波长范围内进行扫描。结果显示前两者在(289±2)nm处有最大吸收值,且吸收峰相同,而空白对照液在289nm处几乎没有吸收,故本实验选择289nm为测定波长。见图1。2.3稳定性实验室温下取40.8μg

8、/ml的对照品溶液,分别在1,2,3,4,5h后,于289nm处测定吸光度。结果5h内稳定,RSD=0.64%。2.4标准

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