高压氧对肾虚豚鼠药物所致听觉功能损伤的影响论文

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1、高压氧对肾虚豚鼠药物所致听觉功能损伤的影响论文.freell，浙江仙居制药有限公司（批号：031216）；卡那霉素：0.5g/2ml，天津药业焦作有限公司（批号：031205）；主要仪器：ZEP诱发电位仪：北京中科电器高技术公司；高压氧舱：DoticB5型生物显微镜：麦克奥迪实业集团有限公司；图像处理系统：Moticimagesadvanced3.0。1.2实验方法1.2.1实验动物及分组选用健康活泼、无耳疾、耳廓反射灵敏的白色红目雄性豚鼠30只，体重250～350g，适应性饲养1周后随机分为3

2、组，分别为正常对照组（正常组）、肾虚耳聋模型对照组（模型组）、肾虚耳聋高压氧治疗组（治疗组），每组各10只。标记各组动物后于安静环境下饲养。1.2.2动物造摸及治疗将模型组及治疗组豚鼠按50mg/(kg·d)的剂量每日肌注醋酸泼尼松龙注射液［2］，共10d，从第6天起按400mg/(kg·d)的剂量每日肌注硫酸卡那霉素，直至第10天。将治疗组豚鼠置于2MPa透明有机玻璃纯氧动物专用实验舱内吸氧，压力0.12MPa，升压、稳压、降压时间分别为15min、25min、10min，每次总时间为50mi

3、n［5］。每天1次，共10天。正常组豚鼠不作任何处理。1.2.3观察指标动物分别在造模前、造模后及治疗后在隔音的电屏蔽室内用ZEP诱发电位仪进行ABR测试，测定各组豚鼠ABRⅠ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ波的潜伏期及波间期。温室保持15～20℃。在治疗后行耳蜗基底膜铺片［6］及形态学观察，耳蜗螺旋韧带铺片［7］及血管纹观察，耳蜗琥珀酸脱氢酶（succinatedehydrogenase，SDH）染色及组织化学观察［8］。1.3统计学方法计量资料用均数±标准差（x±s）表示，用SPSS11.0软件统计包对各组数据

4、进行统计分析。在检验方差齐性的条件下，多组间均数比较用方差分析，F检验。均数间两两比较用q检验（Nean-Keuls法）及LSD法检验。同组数据在不同时期的比较采用配对t检验。均以P＜0.05为差异显著的检验标准。2结果2.1各组豚鼠的ABR阈值造模前，各组豚鼠正常ABR阈值无显著性差异（F＝0.04，P0.05）。造模后，模型组及治疗组豚鼠ABR阈值明显升高（F＝107.863，P0.01），正常组与其他两组比较，差异有显著性（P0.01）。但模型组与治疗组比较，差异无显著性（q＝0.24，P

5、0.05），见表1。2.2各组豚鼠的ABR各波潜伏期经q检验，三组豚鼠的ABRⅠ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ各波的潜伏期均数之间两两比较有显著性差异，模型组与治疗组各波比较P0.05，模型组与正常组、治疗组与正常组各波比较P0.01，见表2。2.3各组豚鼠ABR各波的波间期表3、4的统计结果表明，各组豚鼠在造模后及治疗后的各波间期均无显著性差异（P0.05）。表1造模前后及治疗后各组动物ABR阈值（略）与同期模型组及治疗组比，*P0.01与同期治疗组比，**P0.05；与同组造模后比，▲P0.05；与同组造模后

6、比，▲▲P0.01表2各组动物治疗后ABR潜伏期的q检验（略）表3造模后各组动物ABR波间期（略）表4治疗后各组动物ABR波间期（略）2.4耳蜗基底膜铺片形态学观察及外毛细胞计数40×10倍光镜观察显示模型组豚鼠（图2）的外毛细胞缺失较治疗组豚鼠（图3）严重，两组均可见听纤毛排列紊乱、倒伏、融合，内毛细胞完整。表5为各组豚鼠耳蜗基底膜第二回起始段外毛细胞的计数，结果显示外毛细胞的损失以模型组为多，方差分析（F＝146.52，P0.01）表明差异有显著性，3组间进行两两比较均有显著性差异（P0.0

7、1）。表5各组动物3个视野下外毛细胞数（x±s）及损伤率（略）与模型组及治疗组比，*P0.01；与治疗组比，▲P0.012.5耳蜗螺旋韧带铺片血管纹观察耳蜗螺旋韧带铺片观察结果显示：正常组豚鼠（图4）螺旋韧带微血管充盈良好，管径粗细均匀，血管间有很多分支吻合成网状。模型组（图5）血管纹毛细血管管径变细、粗细不均，血管吻合支减少，血管内红细胞瘀积，部分血管出现较严重的断流现象；治疗组（图6）血管纹毛细血管收缩，呈轻度缺血，但毛细血管内未见明显红细胞瘀积现象。2.6耳蜗基底膜毛细胞琥珀酸脱氢酶（SD

8、H）组化反应光镜下可观察到正常组豚鼠耳蜗基底膜铺片毛细胞SDH组化反应呈深蓝色（见图7）；模型组豚鼠耳蜗基底膜铺片显示SDH染色较正常组变淡，有的甚至消失，耳蜗外毛细胞受损明显，SDH变化显著，内毛细胞无明显损害；各回比较以底回毛细胞损害重，顶回较轻；三排外毛细胞以外两排损害重（见图8）；治疗组豚鼠毛细胞SDH酶活性有明显恢复，但仍有部分区域着色变浅，毛细胞排列基本恢复正常，但毛细胞染色仍不均匀（见图9）。与文献报道基本一致［9］。图1正常组豚鼠基底膜铺片（40×10）（略）图2模型组豚鼠基底膜