正常与不同证候 h22 荷瘤小鼠肾上腺高表达的基因

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1、正常与不同证候H22荷瘤小鼠肾上腺高表达的基因作者：潘志强方肇勤卢文丽梁超吴中华刘小美侯俐张辉卓少元廖明娟高必峰【摘要】目的：揭示正常与不同证候昆明种荷瘤小鼠肾上腺高表达的基因。方法：采用昆明种正常小鼠与腋下接种H22腹水瘤细胞的小鼠，取接种肿瘤后第8天（早期）邪毒壅盛证与气虚证、第21天（中期）阳气虚证、第29天（中晚期）气阴阳虚证荷瘤小鼠与正常对照组小鼠肾上腺，抽提RNA、纯化及GeneChipMouseExon1.0STArray检测。结果：筛选到402条高表达的基因，其中有1个及以上组别芯片读数计算值大于5000的有8

2、8条。这些基因主要参与代谢和基因表达的调控，部分参与化学合成、化学加工修饰、运输和信号转导，以及部分参与免疫、细胞周期和细胞凋亡、发育；另有许多基因功能未知。结论：这些在正常与疾病小鼠肾上腺内持续且稳定表达的基因，可能对于维持肾上腺的正常生理功能具有重要的生物学意义；鉴于气虚证荷瘤小鼠这些基因大多表达量低于正常小鼠和同期的邪毒壅盛证小鼠，反映出气虚证候的本质及特征；再次，4个不同证候荷瘤小鼠肾上腺这些基因表达差异分别有集中的趋势，印证了中医学“同病异证”的理论及其本质，要求辨证论治。【关键词】肾上腺；小鼠；基因表达；基因芯片；

3、肿瘤〔Abstract〕ObjectiveTorevealthecharacterofhighexpressiongenesinadrenalglandofnormalandH22tumourmiceabouttypicalsymptomsandsigns.MethodsBythequantitativefourdiagnosisandsyndromedifferentiationmethodsandGeneChipMouseExon1.0STArray,eandastheniaofqisyndromeon8thday,ast

4、heniaofyangandqisyndromeon21thday,astheniaofqiandyinandyangsyndromeon29thdayourmice.Results402highexpressiongenesorethan5000.Thesegenesparticipateinmetabolism,geneexpressionandregulation,chemistrysynthesisandprocessingandmodify,transport,signaltransduction,immunizat

5、ion,cellcycle,apoptosis,development,andsomegenesfunctionareunknoalandH22tumourmiceadrenalthatcouldbeimportantbiologysignificance.Genesexpresseddoaybereflecttheessenceandfeatureofastheniaofqisyndrome.Otherongfourdifferentsymptomsandsigns,thetheoryandessenceaboutdiffe

6、rentsymptomsandsignsofthesamedisease,anditisessentialtoexecutesyndromedifferentiationandtreatment.〔Keyouse;Geneexpression;GeneChip;Tumour肾上腺是机体的重要内分泌组织，在维持内环境稳定、应激、机体防御、免疫调控及糖、脂肪、水与电解质代谢中发挥重要作用，并受下丘脑-垂体的精密调控。以往对肾上腺的研究主要集中在以下几方面[1，2]：①肾上腺皮质和髓质的功能；②肾上腺激素的合成、分泌与代谢；③肾上腺

7、激素合成的酶，如20，22-羟化酶，20，22-碳链裂解酶、3β-羟类固醇脱氢酶、21-羟化酶、17-羟化酶、11-羟化酶等；④酶的有关调节因子[3]，如白细胞介素类；胰岛素样生长因子；转化生长因子；碱性成纤维生长因子；肿瘤坏死因子α；集落刺激因子；干扰素等，所涉及的基因不多。最近，我们在H22荷瘤小鼠证候本质的研究中，采用GeneChipMouseExon1.0STArray检测了正常与不同证候荷瘤小鼠肾上腺基因的表达差异，观察到许多高表达的基因，推测这些基因在维持肾上腺功能方面具有重要的作用，而且可能与证候本质有关，鉴于这

8、些基因以往大多在肾上腺的研究中涉及不多，特报道如下。1材料与方法1.1材料1.1.1实验动物昆明种雄性小鼠250只，体重（25±1）g，由上海斯莱克实验动物有限公司提供，动物合格证号SCXK（沪）：2003-0003。1.1.2试剂主要试剂有：Trizol（GIBCOBRC）