榄香烯通过下调原癌基因c-met表达对肝癌h22荷瘤小鼠的抑瘤作用

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1、榄香烯通过下调原癌基因c—Met表达对肝癌H22荷瘤小鼠的抑瘤作用计：学位论文：43页表格：3个插图：5幅秦岩指导教师：左云飞‘教授申请学位级别：硕士学位论文提交日期：2012年4月学位授予单位：大连医科大学专业名称：临床检验诊断学论文答辩日期：2012年5月学位授予日期：2012年6月评阅人：答辩委员会主席：独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得大连医科大学或其他教育机构的学位或证书而使

2、用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名：签字日期：赴旦年旦月．Io一日目录一、摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯’⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯1(一)中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯1(二)英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯3二、正文⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯5(一)前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯5(二)材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯6(三)结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯00O0⋯⋯

3、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯11(四)讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯O0OD0⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯18(五)结论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯22(六)参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯23三、文献综述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯27(一)综述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯27(二)参考文献⋯DOD0DO0⋯⋯⋯⋯⋯00OB001⋯⋯ODO00⋯36四、致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯43榄香烯通过下调原癌基因c-Met表达对肝癌H22荷瘤小鼠的抑瘤作用硕士生姓名：秦

4、岩指导教师：左云飞教授专业名称：临床检验诊断学摘要目的：榄香烯是提取于莪术根茎具有广泛抗癌作用的一种中药制剂，是我国自行研发的一种抗癌药物，对多种肿瘤细胞具有抑制作用并且已经引入到临床的治疗使用中。它的优势在于治疗肿瘤过程中对病人没有骨髓抑制且不易产生耐药性，相反能使病人的免疫系统能力得到部分提高。因此在临床中逐渐被广泛使用。c-Met是由原癌基因c-Met编码的具有酪氨酸激酶活性的受体，c．Met受体的异常激活会引发肿瘤细胞的增殖，侵袭浸润，血管生成等行为，因此在一些实体肿瘤中高表达，与恶性疾病的发生发展及预后息息相关。相反，若干扰抑制

5、肿瘤细胞c-Met分子的表达，会控制肿瘤的发生发展，使得肿瘤病人的预后得到显著提高。本文旨通过检测经榄香烯抗癌药物处理后的小鼠肝癌H22细胞及瘤体中c．Met受体的表达水平，明确榄香烯药物发挥的抗癌作用与c．Met受体的表达水平是否具有相关性；进一步探讨揭示榄香烯抑制肿瘤细胞生长的分子学机制。方法：1．H22细胞表面c—Met受体表达的鉴定：采用RT．PCR，免疫荧光以及免疫印迹技术检测c．Met受体在H22细胞株表面的表达水平。2．体外试验：H22细胞经榄香烯抗癌药物作用不同时间后，采用RT-PCR，免疫荧光以及免疫印迹技术检测榄香烯作

6、用不同时间段细胞中c．Met受体的表达水平。3．体内试验：建立肝癌H22细胞荷瘤小鼠模型，利用不同浓度榄香烯注射荷瘤小鼠给予治疗，采用RT．PCR，免疫组化技术检测治疗后瘤体中c．Met受体的表达水平。结果：1．经RT．PCR，免疫荧光以及免疫印迹技术鉴定，证明H22细胞表面有c．Met受体的表达，且定位于细胞的胞膜及核膜上。2．体外试验：经RT．PCR，免疫荧光和免疫印迹技术检测结果证明随着榄香烯抗癌药物作用时间的增加c．Met受体的表达水平逐渐下降。3．体内试验：荷瘤小鼠模型建立成功后，与盐水阴性对照组相比，榄香烯药物治疗组的瘤体质量

7、明显下降且瘤体内c—Met受体的表达水平显著降低。结论：榄香烯抗癌药物可以明显地抑制小鼠肝癌实体肿瘤的生长，其抗癌作用与原癌基因c-Met表达水平的下调相关。关键词：H22细胞榄香烯c．Met肿瘤生长抑制2Anti—tumorEffectofp-elemeneinMurineHepatocellularCarcinomaCellLineH22Dependsonthelevelofc-MetDownregulationMasterdegreecandidate：YanQinSupervisor：ProfessorYunfeiZuoMajor

8、：ClinicalLaboratoryDiagnosticsAbstraetObjective：13-elemene，extractedfromgingerplantRhizomazeodar