肝癌小鼠不同阶段有关证候肾上腺差异表达的基因分析

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1、肝癌小鼠不同阶段有关证候肾上腺差异表达的基因分析作者：潘志强,方肇勤,卢文丽,梁超,吴中华,刘小美,侯俐,张辉,卓少元,廖明娟,高必峰【摘要】　　目的：揭示肝癌小鼠不同阶段常见证候肾上腺基因表达的特征。方法：采用实验小鼠及其标准化四诊及辨证方法，以及GeneChipMouseExon1.0STArray等技术，检测H22肝癌小鼠早期邪毒壅盛证和气虚证、中期阳气虚证、中晚期气阴阳虚证共3阶段4个证候肾上腺基因表达的差异，重点关注那些表达量大、差异显著的基因。结果：筛选到不同阶段一致上调的基因73个，一致下

2、调的基因26个。其中一致上调的基因包括Hp、C3、Anxa1、Procr、C2、Il4ra、Cd14、Ptprc、Cd52、C4b以及Eno3、Xdh、Gpx3等。一致下调的基因涉及到神经系统相关基因如Plp1、Mbp、Aldh1a1、Cck和Atn1，与水电解质代谢有关的基因如Aldh1a1和Slc22a17等，与信号转导有关的基因如Cxcr4、Spag5和Stmn3等，以及参与转录调控和蛋白质生物合成的基因，如Hspa1a、Dnajb1、Thra和Hhex等。结论：H22肝癌小鼠在疾病发生发展过程中

3、，存在证候的演变及肾上腺组织基因表达的差异，不同阶段一致上调或下调的差异表达基因可能是肝癌小鼠及其证候区别于正常小鼠的特征之一。【关键词】肝癌证候肾上腺肿瘤分期基因表达基因芯片　　Methods:BythequantitativefourdiagnosisandsyndromedifferentiationmethodsandGeneChipMouseExon1.0STArray,ormiceinancesyndromeandqideficiencysyndromeintheearlierstage,y

4、angqideficiencysyndromeintheintermediatestage,andqiyinyangdeficiencysyndromeintheadvancedstage.GeneshighlyexpressedandremarkablydifferentfunctionrelatedgenessuchasPlp1,Mbp,Aldh1a1,Cck,Atn1,genesassociatedetabolismsuchasAldh1a1andSlc22a17,genesrelated

5、tosignaltransductionsuchasCxcr4,Spag5andStmn3,etc,andgenesrelatedtotranscriptionalcontrolandprotEinbiosynthesissuchasHspa1a,Dnajb1,Thra,Hhexandsoon.　　Conclusion:ouseExon1.0STArray系统，对H22肝癌小鼠早期邪毒壅盛证（pathogenicfactortoxinpredominancesyndrome，PTPS）和气虚证（qid

6、eficiencysyndrome，QDS）、中期阳气虚证（yangqideficiencysyndrome，YQDS）和中晚期气阴阳虚证（qiyinyangdeficiencysyndrome，QYYDS）等3个阶段4个常见证候进行了肿瘤、下丘脑、垂体、肾上腺、甲状腺、胸腺、脾脏和睾丸共8个目标组织基因表达谱的检测，本文主要报道荷瘤小鼠3个阶段一致上调或下调的肾上腺基因芯片数据特征。　　1材料与方法　　1.1实验动物昆明种雄性小鼠270只，体质量（25±1）g，由上海斯莱克实验动物有限公司提供，

7、动物合格证号为SCXK（沪）20030003，其中20只腹腔接种H22腹水癌细胞株作为种鼠，腹水形成后抽取腹水用于H22实体瘤接种。H22腹水癌细胞株由上海中医药大学科技实验中心保存。　　1.2实验试剂TRIzol试剂购自美国GIBCOBRC公司，RNeasyMiniKit购自德国QIAGEN公司，RNA6000NanoLabChip购自美国AgilentTechnologies公司，小鼠外显子基因芯片（GeneChipMouseExon1.0STArray）及其试剂盒购自美国Affymetrix公司

8、。　　1.3实验仪器　　1.3.1四诊计量化检测设备YLS13A型小鼠抓力测定仪（购自山东省医学科学院设备站）用于抓力检测，底部划有4.5cm×5.5cm方格（3行×6列=18格）的实验笼用于旷场检测，NIKON4500数码相机用于显微和普通拍照、旷场检测录像，3200K（色温）250P200B型电子天平（购自上海恒平科学仪器有限公司）用于动物和饲料称质量，数字Y01型温度计（购自上海华辰医用仪表有限公司）用于检测腋温，SQFEA体视