左金丸方药3种方法提取液的初步药效学比较论文

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1、左金丸方药3种方法提取液的初步药效学比较论文【摘要】目的观察左金丸方药的3种提取液的抑菌、抗炎作用。方法分别制备左金丸的水提取液（直径圆形新华一号定性滤纸片，经压力蒸气灭菌处理后，置120℃烤干2h，保存备用)，微量移液器(5～50μl，可调式)，游标卡尺，营养琼脂培养基。1.2供试液的制备提取前将黄连、吴茱萸药材分别粉碎，过14目筛。1.2.1水提取液按照处方比例分别称取黄连粗粉12g，吴茱萸粗粉2g，用水加热回流提取3次，时间分别为2，2，1h，加水量依次为药材量的10，8，8倍，4层纱布加100目筛滤过，合并提取

2、液，减压浓缩至60ml样品液（每毫升相当于原药材0.23g）。1.2.260%乙醇提取液按照处方比例分别称取黄连粗粉12g，吴茱萸粗粉2g,用60％乙醇浓度加热回流提取工艺提取，回流3次，时间分别为2，2，1h，加醇量依次为药材量的10，8，8倍，4层纱布加100目筛滤过，合并提取液，回收乙醇，减压浓缩至60ml样品液（每毫升相当于原药材0.23g）。1.2.3半仿生提取液按照处方比例分别称取黄连粗粉12g,吴茱萸粗粉2g,混匀，加热回流提取3次（加水量依次为药材量的10，8，8倍，用水煎煮3次，第1煎用水以0.1mo

3、l/LHCl调至pH2.0；第2、3煎用水依次以0.1mol/LNaOH调至pH7.0，9.0；煎煮时间依次为170min,85min,40min），提取液用4层纱布加100目筛分别滤过，离心（2000r/min,20min）,合并上清液，减压浓缩至60ml样品液（每毫升相当于原药材0.23g）。1.3操作程序1.3.1抑菌片的制备取无菌并干燥的滤纸片，制成直径为5mm，厚不超过4mm圆片(块)，每4片(块)1组，每片滴加1.2项下3种供试液各20μl，然后将滤纸片平放于清洁的无菌平皿内，开盖置温箱(37℃)中烤干后备

4、用。1.3.2阴性对照样片的制备取无菌干燥滤纸片，制成与试验组大小相同的样(块)。每片滴加无菌蒸馏水20μl，干燥后备用。1.3.3试验菌的接种用无菌棉拭子蘸取浓度为5×105～5×106cfu/ml试验菌悬液，在营养琼脂培养基平板表面均匀涂抹3次。每涂抹1次，平板应转动60°，最后将棉拭子绕平板边缘涂抹1周。盖好平皿，置室温干燥5min。1.3.4抑菌剂样片贴放每次试验贴放1个染菌平板，每个平板贴放4片试验样片。用无菌镊子取样片贴放于平板表面。各样片中心之间相距25mm以上，与平板的周缘相距15mm以上。贴放好后，用

5、无菌镊子轻压样片，使其紧贴于平板表面。盖好平皿，置37℃温箱，培养16～18h观察结果。用游标卡尺测量抑菌环的直径(包括贴片)并记录。试验重复3次。测量抑菌环时，应选均匀而完全无菌生长的抑菌环进行。测量其直径应以抑菌环外沿为界。1.4评价标准规定抑菌作用的判断:抑菌环直径大于7mm者，判为有抑菌作用；抑菌环直径小于或等于7mm者，判为无抑菌作用。1.5抑菌结果见表1。表1左金丸提取液抑菌结果1.6小结左金丸提取液对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌均有抑制作用，按抑菌环的大小判断，对金黄色葡萄球菌的抑制作用强于大肠杆菌。抑菌环的

6、大小顺序为：半仿生提取液水提液醇提液，可见左金丸3种提取液的抑菌效果为：SBE液l/10g，阳性对照药布洛芬片（0.1g/kg），给药途径：口服灌胃。空白对照组灌胃等容积的蒸馏水，连续灌胃2d(1次/d)。末次给药1h45min后于小鼠右耳涂二甲苯20μl/只，25min后处死动物，以直径7mm的打孔器打下小鼠左右耳两侧同部位的耳片，精密称重，计算肿胀度和肿胀抑制率。肿胀度(mg)=右耳重(mg)-左耳重(mg)肿胀抑制率（%）=（空白对照组肿胀度-给药组肿胀度）/空白对照组肿胀度×100%2.6结果见表2。2.7小结

7、与空白对照组相比，左金丸高剂量组、中剂量组的3种提取液均对二甲苯致小鼠耳肿胀有显著抑制作用，差异有非常显著性意义（P0.01）；3种提取液对小鼠耳肿胀的肿胀抑制率大小顺序为：SBE液WE液AE液。与空白对照组相比，左金丸低剂量组的半仿生提取液对二甲苯致小鼠耳肿胀有显著抑制作用，差异有非常显著性意义（P0.01）；水提取液和醇提取液对二甲苯致小鼠耳肿胀的抑制无统计学意义（P0.05）；3种提取液对小鼠耳肿胀的肿胀抑制率大小顺序为：SBE液WE液AE液。左金丸提取液对二甲苯致小鼠耳肿胀有显著抑制作用，肿胀抑制率大小顺序为：

8、SBE液WE液AE液。表2左金丸对小鼠耳肿胀的影响t检验：与空白对照组比较，*P0.05,**P0.01；n=10因此，左金丸方药的3种提取液的抑菌、抗炎作用大小顺序为：SBE液WE液AE液。【