益肾胶囊对系膜增殖性肾小球肾炎大鼠肾脏nfκb及pdgfβ表达的影响

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1、益肾胶囊对系膜增殖性肾小球肾炎大鼠肾脏NFκB及PDGFβ表达的影响作者：吴喜利，孙万森，张王刚，乔成林，马巧亚【摘要】目的探讨益肾胶囊对系膜增殖性肾小球肾炎(MsPGN)大鼠肾脏核转录因子(NFκB)及血小板源生长因子β(PDGFβ)表达的影响。方法观察治疗组大鼠血脂、肾功能及24h尿蛋白(Pro/24h)的变化，同时用SABC免疫组化方法检测各组肾小球、肾小管NFκB及PDGFβ的表达情况。结果经过8周的观察，治疗组大鼠血脂、肾功能及Pro/24h与模型组比较，甘油三酯(TG)、

2、胆固醇(TC)、低密度脂蛋白(LDLC)、血肌酐(Scr)、血尿素氮(BUN)及Pro/24h均明显降低(P<0.05或P<0.01)，而高密度脂蛋白(HDLC)明显升高(P<0.05)；且益肾胶囊可明显抑制肾组织NFκB、PDGFβ的表达(P<0.05或P<0.01)。结论益肾胶囊可明显降低MsPGN大鼠血脂及Pro/24h，改善肾功能，其作用机制可能与抑制肾组织NFκB、PDGFβ的表达有关。【关键词】益肾胶囊；系膜增殖性肾小球肾炎；核转录因子；血小

3、板源生长因子β　　EffectsofYishenCapsuleontheexpressionofNFκB　andPDGFβinrenaltissuesofratsesangialproliferativeglomerulonephritis　　　　ABSTRACT:ObjectiveToinvestigatetheeffectsofYishenCapsuleontheexpressionofNFκBandPDGFβinrenaltissuesofratsesangialprolifer

4、ativeglomerulonephritis.MethodssPGN)大鼠肾脏核转录因子(nuclearfactorkappaB,NFκB)及血小板源生长因子β(plateletderivedgroL含生药1.25g的药液，冰箱保存备用。　　1.3大鼠模型的建立与分组全部SD大鼠预养1周后，随机将其分为对照组、模型组和治疗组，每组各20只。其中模型组和治疗组大鼠分别经尾静脉注射抗大鼠胸腺细胞免疫血清(antithymocyteserum,ATS)10.0mL/kg体重，制作系膜增殖性肾小

5、球肾炎模型[3]。治疗组按每公斤体重3.75g生药，灌服益肾胶囊稀释液；对照组则给予同等量的自来水灌服；每日1次，连续给药8周。　　1.4生化指标的检测于第8周末大鼠处死前由股静脉采血，冷却、离心，取血清作肾功能、血脂等指标的测定。　　1.524h尿蛋白定量的测定实验开始后的8周，用代谢笼收集24h尿液标本，应用美国生产的MiditronM型尿液自动分析仪进行检测。　　1.6标本采集与染色全部动物于实验结束后逐个宰杀取肾脏，并反复用生理盐水灌洗后入10%(体积分数)的中性甲醛溶液固定，石蜡包埋、

6、切片。然后，严格按SABC试剂盒要求进行免疫组化染色。NFκB按推荐条件行微波抗原修复，PDGFβ不用抗原修复直接进入下一步。选(抗原表达最丰富的)对照组用PBS代替相应一抗作为阴性对照。　　1.7切片处理与原始数据的采集[4]免疫组化染色阳性结果的判定标准是阳性组织呈棕黄色，阴性部分呈淡蓝色，分布于肾小球系膜细胞的细胞质、胞核、核膜及肾小管上皮细胞的细胞质等部位。用图像采集模块软件，每组切片随机采集30个视野(10-20倍物镜)，用组化分析模块软件对每个视野的肾小球和肾小管/间质进行阳性目

7、标分割、视野调整(去除非组织视野所占空间等)后，得出每个肾小球和肾小管/间质视野阳性目标面密度(阳性染色面积/统计场面积)及阳性单位(代表染色部分的平均吸光度，染色越深，数值越大)，而阳性面密度与阳性单位之乘积可以反映免疫组化阳性目标的总强度，即抗原的总量。为保证测定数据的准确性，对每个统计场的参数进行3次操作，最后取3次参数的均值作为统计场参数进入统计学分析的原始数据。　　1.8统计学处理所有数据均以±s表示，运用SPSS10.0软件包进行统计分析，采用t检验，P<0.05为有统计学意义

8、。　　2结果　　2.1益肾胶囊对MsPGN大鼠血脂、肾功能及24h尿蛋白(Pro/24h)的影响模型组及治疗组大鼠血脂、肾功能及Pro/24h与对照组比较，均有显著性差异(P<0.05或P<0.01)；治疗组大鼠血脂、肾功能及Pro/24h与模型组比较，TG、TC、LDLC、Scr、BUN及Pro/24h均明显降低(P<0.05或P<0.01)，而HDLC明显升高(P<0.05，表1)。　　表1益肾胶囊对MsPGN大鼠血脂、肾功能及Pro/24h的影响（略）