血管内皮生长因子在睾丸生殖细胞肿瘤中的表达

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1、血管内皮生长因子在睾丸生殖细胞肿瘤中的表达作者：罗小敏杨嗣星王玲珑【摘要】目的探讨血管内皮生长因子（VEGF）表达及微血管计数与睾丸生殖细胞肿瘤（TGCT）临床病理特征的关系。方法42例睾丸生殖细胞肿瘤和10例对照（无肿瘤浸润的去势睾丸组织）标本取自武汉大学人民医院病理科。应用免疫组化方法检测标本中血管内皮生长因子的表达及微血管计数（MVC），HE染色显示脉管（血管或淋巴管）浸润。结果肿瘤组VEGF阳性表达率及MVC均显著高于对照组。VEGF表达在各病理类型组间无显著差别（P>0.05）；随临床分期的进展VEGF表达增强（P<0.

2、001）。III期肿瘤的MVC分别显著高于I、II期。VEGF表达与MVC之间呈较强正相关（r=0.675）。脉管浸润率随临床分期的增加而增加。但多因素分析显示仅VEGF表达与临床分期相关。结论血管生成与TGCT的转移相关。VEGF在调节TGCT的血管生成及促进TGCT的临床进展方面可能发挥着重要作用，VEGF可作为反映TGCT生物学行为的客观指标。【关键词】睾丸肿瘤;血管内皮生长因子;血管新生TheExpressionofVascularEndothelialGroCellTumorsKeycelltumors；Vascularendoth

3、elialgro厚连续切片作免疫组化染色及HE染色。免疫组化方法采用链酶亲和素生物素过氧化物酶复合物法（SP法），设阴、阳性对照，阳性对照片购自武汉亚法生物有限公司，PBS液代替一抗作阴性对照。免疫组化染色检测肿瘤组织VEGF表达和微血管情况。HE染色显示脉管浸润情况。1.3结果判定1.3.1VEGF阳性染色判定标准细胞浆和/或细胞膜被染成棕黄色或棕褐色的肿瘤细胞或内皮细胞判断为VEGF染色阳性细胞，在光镜下随机选取三个高倍视野（×400），计算出其阳性细胞百分率。1.3.2微血管计数方法被染成棕黄色或棕褐色的单个的内皮细胞、内皮细胞团（或

4、簇）计为一个微血管。先在低倍（×40）光镜下选取新生血管密集的区域，再在高倍光镜下随机选取三个视野对微血管进行计数，三个视野中的平均值即为MVC。1.3.3脉管浸润标准HE染色切片中肿瘤间质的血管或淋巴管内可见肿瘤细胞浸润为脉管浸润阳性。1.4统计学方法各组VEGF阳性细胞百分率以及MVC以±s表示，组间差别分别采用单因素方差分析和q检验、χ2检验；对VEGF与MVC的相关性行直线相关与回归分析；各因素与临床分期的关系进行logistic多元回归分析；以P<0.05为差异显著性标准。2结果2.1VEGF在睾丸生殖细胞肿瘤中的表达VEGF

5、阳性染色主要定位于肿瘤细胞或内皮细胞的胞浆和/或细胞膜上，呈棕黄色或棕褐色。10例对照组织中2例阳性着色，占20%，这两例的阳性细胞百分率分别为4%、9%；42例TGCT中40例阳性着色，占95.2%，两者相比差异显著（P<0.001）。VEGF表达在TGCT四个病理类型组间无显著差异；随临床分期的增加，VEGF表达增强，各期之间两两比较差异均有显著性（P<0.001），见表1。表1VEGF表达与TGCT临床病理特点的关系检测项病理类型临床分期SETEYAEMI期II期III期VEGF阳性细注：SE：精原细胞瘤；TE：畸胎瘤；YA

6、：卵黄囊瘤；EM：胚胎癌（下同），与I期比:△P<0.001；与I、II期比：*P<0.0012.2睾丸生殖细胞肿瘤中微血管染色情况微血管的内皮细胞被染成棕黄色或棕褐色。肿瘤间质中微血管较密集，多数形态不规则。对照组睾丸组织中MVC为5.14±1.63，肿瘤组为15.02±5.32，肿瘤组MVC显著高于正常组（P<0.01）。四种病理类型组间微血管计数（MVC）无显著差异（P=0.11）；Ⅲ期TGCT中MVC分别显著高于Ⅰ、II期（P<0.05）；Ⅰ期与Ⅱ期之间MVC的差异无显著性（P>0.05），见表2。表2M

7、VC与TGCT临床病理特点的关系注：与I、II期比，*P<0.052.3睾丸生殖细胞肿瘤中VEGF表达与MVC的关系对每例TGCT中的VEGF阳性细胞百分率和其对应的MVC的关系进行直线相关与回归分析，从散点图和回归直线图中可以看出：VEGF表达与MVC有较强的线性关系。相关系数r=0.675（t=5.783、P<0.001），见图1。图1TGCT中VEGF表达与MVC关系的散点图及回归直线2.4睾丸生殖细胞肿瘤中脉管浸润结果应用HE染色显示TGCT的脉管浸润情况，I期肿瘤2例（2/20）阳性、II期8例（8/13）阳性、III期

8、8例（8/9）阳性，两两比较，均有显著性差异（P<0.01）。2.5各因素与TGCT临床分期的关系由上可见，VEGF表达、MVC及脉管浸润均与TGCT的临床分